Takara 3390 pHEK293 Ultra Expression Vector I 20 μg酶试剂盒

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pHEK293 Ultra Expression Vector
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Takara 3390 pHEK293 Ultra Expression Vector I 20 μg ¥5,007 Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg
Takara 3392 pHEK293 Ultra Expression Vector II 20 μg each ¥5,007 Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg
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■ 制品内容
pHEK293 Ultra Expression Vector I(Code No. 3390)
     1.pHEK293 Ultra Expression Vector I 20μg(1μg /μl)
pHEK293 Ultra Expression Vector II(Code No. 3392)
     1.pHEK293 Ultra Expression Vector II 20μg(1μg /μl)
     2.pHEK293 Enhancer Vector 20μg(1μg /μl)
Limited Use Label License: [M86]
请先确认产品专利信息,订购时请填写专利确认书。 Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg
 
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■ 制品说明
pHEK293 Ultra Expression Vectors是使用人源HEK293细胞可瞬时产生大量重组蛋白质的质粒载体。本制品与以往使用巨细胞病毒来源启动子的蛋白质表达载体相比,可产生其2~10倍的重组蛋白质。 pHEK293 Ultra Expression Vector I是单一质粒,转染HEK293细胞后,可大量表达目的蛋白质。 而pHEK293 Ultra Expression Vector II与试剂盒中附带的pHEK293 Enhancer Vector共转染HEK 293细胞后,通过优化转染时两种质粒载体的比例,可更有效地产生目的蛋白质。
 
【pHEK293 Ultra Expression Vector I】
pHEK293 Ultra Expression Vector I中包含巨细胞病毒来源启动子(CMV IE promoter)、编码Trans- Activation-Responsive region(TAR) 的序列、多克隆位点(MCS)、Internal Ribosome Entry Site(IRES)、Transactivator(Tat)基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶的polyA信号(HSV TK polyA)(见图1)。在MCS位点插入目的基因,转染HEK293细胞后,可瞬时大量表达目的蛋白质。
【pHEK293 Ultra Expression Vector II】
pHEK293 Ultra Expression Vector II中包含巨细胞病毒来源启动子(CMV IE promoter)、编码TAR的序列、多克隆位点(MCS)、单纯疱疹病毒胸苷激酶的polyA信号(HSV TK polyA)(见图2)。此外,试剂盒中附带了表达Tat蛋白质的质粒载体pHEK293 Enhancer Vector(见图3)。在pHEK293 Ultra Expression Vector II 的多克隆位点(MCS)插入目的基因,与pHEK293 Enhancer Vector共转染HEK293细胞后,可瞬时大量表达目的蛋白质。转染时可根据目的蛋白质表达水平来优化pHEK293 Ultra Expression Vector II 与pHEK293 Enhancer Vector的使用比例。
注:本制品是用于HEK293细胞的高表达载体。本制品应用于人源以外的哺乳动物细胞时,可能不会充分发挥本制品的高表达效果。
 
■ 质粒图谱
Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg
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图1
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图2
Takara                      3390           pHEK293 Ultra Expression Vector I             20 μg
图3

NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶/含纯化磁珠 货 号 #E6177L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

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NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠
NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

特性

 更高的文库产量,满足更多实验所需
 即使是起始量极低的样本,依然可以制备高质量文库,最低起始量可低至 500 pg
 各种类型的 DNA 样本均可制备文库,包括高 GC 及 FFPE DNA 样本
 提高靶向富集应用的产量及质量
 流程化的操作设计,减少了手动操作时间,与自动化兼容,试剂盒与模块形式,提供了选择的便利
 使用 FS 版本的试剂盒,DNA 分片段化酶被整合到 Ultra II DNA 流程中,可靠并易于使用
 试剂盒中提供实验所需的片段筛选及纯化金标准 SPRIselect 磁珠,为实验提供了极大的灵活性和可靠性

概述

NEBNext  Ultra II DNA 文库制备试剂盒能够用更低起始量的 DNA 构建高质量的文库。文库制备每一个步骤中的试剂都经过优化,能够从  500 pg 至 1 μg 的起始 DNA 高效构建高质量的文库。新一代的 NEBNext  试剂采用了快速、流程化、自动化的工作流程,在降低 PCR 循环数的同时提高了 GC  覆盖度。本试剂盒与 PCR-free  的工作流程兼容,且对于难以建库的样本,如 FFPE  样本,也有很好的效果。
 
Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒精简文库制备流程,将 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾优化到一步。
 
Ultra II DNA 和 Ultra II FS DNA 试剂盒均有包含或不含 SPRIselect® 磁珠的包装。
 
NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 - 含片段化酶/含纯化磁珠            货   号                  #E6177L
 
NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 - 含片段化酶/含纯化磁珠            货   号                  #E6177L
 

用于 Illumina 测序平台的 NEBNext 试剂:DNA 文库制备

 除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext DNA 试剂盒还都经过构建基因组 DNA 文库或 ChIP-Seq 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。注:接头、引物是单独供应的。

 
NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 - 含片段化酶/含纯化磁珠            货   号                  #E6177L
 

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NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠 货 号 #E7103L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

 更高的文库产量,满足更多实验所需
 即使是起始量极低的样本,依然可以制备高质量文库,最低起始量可低至 500 pg
 各种类型的 DNA 样本均可制备文库,包括高 GC 及 FFPE DNA 样本
 提高靶向富集应用的产量及质量
 流程化的操作设计,减少了手动操作时间,与自动化兼容,试剂盒与模块形式,提供了选择的便利
 使用 FS 版本的试剂盒,DNA 分片段化酶被整合到 Ultra II DNA 流程中,可靠并易于使用
 试剂盒中提供实验所需的片段筛选及纯化金标准 SPRIselect 磁珠,为实验提供了极大的灵活性和可靠性

概述

NEBNext  Ultra II DNA 文库制备试剂盒能够用更低起始量的 DNA 构建高质量的文库。文库制备每一个步骤中的试剂都经过优化,能够从  500 pg 至 1 μg 的起始 DNA 高效构建高质量的文库。新一代的 NEBNext  试剂采用了快速、流程化、自动化的工作流程,在降低 PCR 循环数的同时提高了 GC  覆盖度。本试剂盒与 PCR-free  的工作流程兼容,且对于难以建库的样本,如 FFPE  样本,也有很好的效果。
 
Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒精简文库制备流程,将 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾优化到一步。
 
Ultra II DNA 和 Ultra II FS DNA 试剂盒均有包含或不含 SPRIselect® 磁珠的包装。
 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠            货   号                  #E7103L
 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠            货   号                  #E7103L

用于 Illumina 测序平台的 NEBNext 试剂:DNA 文库制备

 除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext DNA 试剂盒还都经过构建基因组 DNA 文库或 ChIP-Seq文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。注:接头、引物是单独供应的。

 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠            货   号                  #E7103L
 

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NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒 货 号 #E7410L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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 NEBNext® Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)

 NEBNext® Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

NEBNext® Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶(含纯化磁珠)

产品特点

·起始量范围广:250 ng 至 1,000 ng 的起始 DNA 均可制备高质量文库,且无需扩增步骤

 ·更高的文库产量,获得更多有用信息
 ·提高文库均一性,进而提高测序质量
 ·不同类型的起始样本,均可制备 PCR-free 文库
 ·通过优化的 PCR-free 实验流程,减少手动操作时间,并可与自动化兼容
 ·配合使用 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)           (NEB #E7395)或其它具有3′ T 突出的适用于 Illumina 平台的接头
 ·也可提供含有样品纯化磁珠的 NEBNext Ultra II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)
 

产品概述

 没有偏差!基于简化可靠的 Ultra II 流程,适用于 Illumina® 测序平台的本试剂盒可为 DNA-seq 提供无需扩增的文库制备流程。即使 DNA 起始量低至 250 ng,也可获得高质量、高产量的文库,而无需担忧 PCR 偏差。


NEBNext Ultra II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒包含不同起始量、已打断的 DNA 文库制备所需的所有酶和缓冲液,以便在 Illumina 平台上进行二代测序,且不需要扩增步骤。快速、用户友好的流程仅需最少的手动操作时间,在无需 PCR 的情况下,就可获得优异的文库产量和 GC 覆盖度。

注意:如果您的起始 DNA 尚未打断,我们推荐您使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶,该试剂盒将 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾优化到同一管中,无需纯化或移液。
 
产品描述:
NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒            货   号                  #E7410L
 
使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒,能获得更高的文库产量。
A.以 1 µg NA19240 基因组 DNA(Coriell Institute)为起始样本,使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Illumina TruSeq® PCR-free 文库制备试剂盒分别制备 PCR-free 文库,350 bp 插入片段作为筛选标准。
B.分别使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Roche Sequencing Kapa HyperPrep 文库制备试剂盒,结合 Covaris 打断,制备 150 – 200 bp 插入片段的文库,不进行片段筛选。根据生产商推荐方法,NEBNext、Illumina 和 Kapa 试剂盒分别使用了 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)、IDT for Illumina(TruSeq DNA UD Indexes)和 Kapa Dual-Indexed Adaptors。
 
 NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒            货   号                  #E7410L
 
使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒,实现人类基因组均一覆盖。相较于 Illumina DNA PCR-free 文库制备试剂盒,NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒可实现更高的基因组覆盖度。根据生产商推荐方法,以 250 ng NA19240 基因组 DNA 为起始样本制备文库,使用 NovaSeq 6000 S4 v1.5 flow cell(PE 2 x 150 bp)测序。Reads 去接头(fastp 0.20.0)后比对至端粒到端粒 chm13 参考基因组(draft 1,bwa-mem 0.7.17),并标记重复(samblaster 0.1.24)。从每个 bam 中随机抽取 2.8 B Reads(sambamba view -s 0.6.8)。使用 mosdepth(v0.3.1,-F 772)评估过滤水平和初级覆盖度,并绘制常染色体或线粒体基因组图。图中标示出了预期覆盖度(num_reads*read length/genome size)。

NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠) 货 号 #E7415L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

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NEBNext® Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

NEBNext® Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶(含纯化磁珠)

产品特点

·起始量范围广:250 ng 至 1,000 ng 的起始 DNA 均可制备高质量文库,且无需扩增步骤
·更高的文库产量,获得更多有用信息
·提高文库均一性,进而提高测序质量
·不同类型的起始样本,均可制备 PCR-free 文库
·通过优化的 PCR-free 实验流程,减少手动操作时间,并可与自动化兼容
·配合使用 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)(NEB #E7395)或其它具有3 T 突出的适用于 Illumina 平台的接头
·试剂盒提供 SPRIselect® 磁珠,可灵活方便地进行片段筛选和纯化
·也可提供不含样品纯化磁珠的 NEBNext Ultra II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒
 

产品描述

 没有偏差!基于简化可靠的 Ultra II 流程,适用于 Illumina® 测序平台的本试剂盒可为 DNA-seq 提供无需扩增的文库制备流程。即使 DNA 起始量低至 250 ng,也可获得高质量、高产量的文库,而无需担忧 PCR 偏差。

 
NEBNext Ultra II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒包含不同起始量、已打断的 DNA 文库制备所需的所有酶和缓冲液,以便在 Illumina 平台上进行二代测序,且不需要扩增步骤。快速、用户友好的流程仅需最少的手动操作时间,在无需 PCR 的情况下,就可获得优异的文库产量和 GC 覆盖度。
 
为方便起见,该试剂盒还提供 NEBNext 样品纯化磁珠(Beckman Coulter 的 SPRIselect 磁珠),可用于片段筛选和酶反应纯化步骤。
 
注意:如果您的起始 DNA 尚未打断,我们推荐您使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶,该试剂盒将 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾优化到同一管中,无需纯化或移液。
 
产品描述:
 
NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)            货   号                  #E7415L
 
使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒,能获得更高的文库产量。
A.以 1 µg NA19240 基因组 DNA(Coriell Institute)为起始样本,使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Illumina TruSeq® PCR-free 文库制备试剂盒分别制备 PCR-free 文库,350 bp 插入片段作为筛选标准。
B.分别使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Roche Sequencing Kapa HyperPrep 文库制备试剂盒,结合 Covaris 打断,制备 150 – 200 bp 插入片段的文库,不进行片段筛选。根据生产商推荐方法,NEBNext、Illumina 和 Kapa 试剂盒分别使用了 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)、IDT for Illumina(TruSeq DNA UD Indexes)和 Kapa Dual-Indexed Adaptors。
NEBNext® Ultra™ II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)            货   号                  #E7415L
使用 NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒,实现人类基因组均一覆盖。相较于 Illumina DNA PCR-free 文库制备试剂盒,NEBNext Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒可实现更高的基因组覆盖度。根据生产商推荐方法,以 250 ng NA19240 基因组 DNA 为起始样本制备文库,使用 NovaSeq 6000 S4 v1.5 flow cell(PE 2 x 150 bp)测序。Reads 去接头(fastp 0.20.0)后比对至端粒到端粒 chm13 参考基因组(draft 1,bwa-mem 0.7.17),并标记重复(samblaster 0.1.24)。从每个 bam 中随机抽取 2.8 B Reads(sambamba view -s 0.6.8)。使用 mosdepth(v0.3.1,-F 772)评估过滤水平和初级覆盖度,并绘制常染色体或线粒体基因组图。图中标示出了预期覆盖度(num_reads*read length/genome size)。
 

NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶 货 号 #E7430L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶                              收藏

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产品特点

·起始量范围广:50 ng 至 500 ng 的完整 DNA 均可制备高质量文库,且无需扩增步骤

·不同 DNA 起始量或 GC 含量的样本,都可使用同样的操作流程达到稳定可靠的片段化效果
·包含 NEBNext FS(片段化系统)酶法片段化试剂,使用同一种酶混合物即可完成 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾三个步骤
·更高的文库产量,获得更多有用信息
·提高文库均一性,进而提高测序质量
·不同类型的起始样本,均可制备 PCR-free 文库
·通过优化的 PCR-free 实验流程,减少手动操作时间,并可与自动化兼容
·配合使用 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)(NEB #E7395)或其它具有3 T 突出的适用于 Illumina 平台的接头
·也可提供含有样品纯化磁珠的 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)
 

产品概述

 没有偏差!基于简化可靠的 Ultra II FS 流程,适用于 Illumina® 测序平台的本试剂盒可为 DNA-seq 提供无需扩增的文库制备流程。即使 DNA 起始量低至 50 ng,也可获得高质量、高产量的文库,而无需担忧 PCR 偏差。

 
NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒包含不同起始量、完整的 DNA 文库制备所需的所有酶和缓冲液,以便在 Illumina 平台上进行二代测序,且不需要扩增步骤。快速、用户友好的流程包含可靠的酶法 DNA 片段化过程,仅需最少的手动操作时间,在无需 PCR 的情况下,就可获得优异的文库产量和 GC 覆盖度。
 
注意:如果您的起始 DNA 已被打断,我们推荐您使用 NEBNext® UltraII DNA PCR-free 文库制备试剂盒(NEB #E7410)。
 
产品描述: 
NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 - 含片段化酶            货   号                  #E7430L
图1:使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒,能获得更高的文库产量
 
A.以人 NA19240 基因组 DNA(Coriell Institute)为起始样本,使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Illumina PCR-free 文库制备试剂盒分别制备 PCR-free 文库,350 bp 插入片段作为筛选标准。
B.分别使用基于酶法片段化的 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Roche Sequencing Kapa HyperPlus 文库制备试剂盒,制备 150 – 200 bp 插入片段的 PCR-free 的文库,不进行片段筛选。根据生产商推荐方法,NEBNext 和 Kapa 试剂盒分别使用了 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)和 Kapa Dual-Indexed Adaptors。
NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 - 含片段化酶            货   号                  #E7430L
 
图2:使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒,实现人类基因组均一覆盖。相较于 Illumina DNA PCR-free 文库制备试剂盒,NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒可实现更高的基因组覆盖度。根据生产商推荐方法,以 250 ng NA19240 基因组 DNA 为起始样本,分别由 2 位实验员制备文库,使用 NovaSeq 6000 S4 v1.5 flow cell(PE 2 x 150 bp)测序。Reads 去接头(fastp 0.20.0)后比对至端粒到端粒 chm13 参考基因组(draft 1,bwa-mem 0.7.17),并标记重复(samblaster 0.1.24)。从每个 bam 中随机抽取 2.8 B Reads(sambamba view -s 0.6.8)。使用 mosdepth(v0.3.1,-F 772)评估过滤水平和初级覆盖度,并绘制常染色体或线粒体基因组图。图中标示出了预期覆盖度(num_reads*read length/genome size)。两位实验员在使用 Illumina PCR-free 文库制备试剂盒时覆盖度存在显著差异,而使用 FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒时不存在该问题,结果非常一致。
 

NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶(含纯化磁珠) 货 号 #E7435L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

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NEBNext® Ultra II DNA PCR-Free 文库制备试剂盒

NEBNext® Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)
NEBNext® Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

产品特点

·起始量范围广:50 ng 至 500 ng 的完整 DNA 均可制备高质量文库,且无需扩增步骤

·不同 DNA 起始量或 GC 含量的样本,都可使用同样的操作流程达到稳定可靠的片段化效果
·包含 NEBNext FS(片段化系统)酶法片段化试剂,使用同一种酶混合物即可完成 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾三个步骤
·更高的文库产量,获得更多有用信息
·提高文库均一性,进而提高测序质量
·不同类型的起始样本,均可制备 PCR-free 文库
·通过优化的 PCR-free 实验流程,减少手动操作时间,并可与自动化兼容
·配合使用 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)(NEB #E7395)或其它具有3T 突出的适用于 Illumina 平台的接头
·试剂盒提供 SPRIselect® 磁珠,可灵活方便地进行片段筛选和纯化
·也可提供不含样品纯化磁珠的 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒
 

产品概述

 没有偏差!基于简化可靠的 Ultra II FS 流程,适用于 Illumina® 测序平台的本试剂盒可为 DNA-seq 提供无需扩增的文库制备流程。即使 DNA 起始量低至 50 ng,也可获得高质量、高产量的文库,而无需担忧 PCR 偏差。

 
NEBNext Ultra II FS DNA PCR-Free 文库制备试剂盒包含不同起始量、完整的 DNA 文库制备所需的所有酶和缓冲液,以便在 Illumina 平台上进行二代测序,且不需要扩增步骤。快速、用户友好的流程包含可靠的酶法 DNA 片段化过程,仅需最少的手动操作时间,在无需 PCR 的情况下,就可获得优异的文库产量和 GC 覆盖度。
 
为方便起见,该试剂盒还提供 NEBNext 样品纯化磁珠(Beckman Coulter 的 SPRIselect 磁珠),可用于片段筛选和酶反应纯化步骤。
 
注意:如果您的起始 DNA 已被打断,我们推荐您使用 NEBNext® Ultra II DNA PCR-free 文库制备试剂盒(含纯化磁珠)(NEB #E7415)。
 
产品描述: 
NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 - 含片段化酶(含纯化磁珠)            货   号                  #E7435L
 
图1:使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒,能获得更高的文库产量。
A.以人 NA19240 基因组 DNA(Coriell Institute)为起始样本,使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Illumina PCR-free 文库制备试剂盒分别制备 PCR-free 文库,350 bp 插入片段作为筛选标准。
B.分别使用基于酶法片段化的 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒和 Roche Sequencing Kapa HyperPlus 文库制备试剂盒,制备 150 – 200 bp 插入片段的 PCR-free 的文库,不进行片段筛选。根据生产商推荐方法,NEBNext 和 Kapa 试剂盒分别使用了 NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1(Unique 双端 Index 引物,UMI 接头,适用于 DNA)和 Kapa Dual-Indexed Adaptors。
 
NEBNext® Ultra™ II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒 - 含片段化酶(含纯化磁珠)            货   号                  #E7435L
图2:使用 NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒,实现人类基因组均一覆盖。相较于 Illumina DNA PCR-free 文库制备试剂盒,NEBNext Ultra II FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒可实现更高的基因组覆盖度。根据生产商推荐方法,以 250 ng NA19240 基因组 DNA 为起始样本,分别由 2 位实验员制备文库,使用 NovaSeq 6000 S4 v1.5 flow cell(PE 2 x 150 bp)测序。Reads 去接头(fastp 0.20.0)后比对至端粒到端粒 chm13 参考基因组(draft 1,bwa-mem 0.7.17),并标记重复(samblaster 0.1.24)。从每个 bam 中随机抽取 2.8 B Reads(sambamba view -s 0.6.8)。使用 mosdepth(v0.3.1,-F 772)评估过滤水平和初级覆盖度,并绘制常染色体或线粒体基因组图。图中标示出了预期覆盖度(num_reads*read length/genome size)。两位实验员在使用 Illumina PCR-free 文库制备试剂盒时覆盖度存在显著差异,而使用 FS DNA PCR-free 文库制备试剂盒时不存在该问题,结果非常一致。
 

NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 货 号 #E7645L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

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#E7645L
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NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠

NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶/含纯化磁珠

特性

 更高的文库产量,满足更多实验所需
 即使是起始量极低的样本,依然可以制备高质量文库,最低起始量可低至 500 pg
 各种类型的 DNA 样本均可制备文库,包括高 GC 及 FFPE DNA 样本
 提高靶向富集应用的产量及质量
 流程化的操作设计,减少了手动操作时间,与自动化兼容,试剂盒与模块形式,提供了选择的便利
 使用 FS 版本的试剂盒,DNA 分片段化酶被整合到 Ultra II DNA 流程中,可靠并易于使用
 试剂盒中提供实验所需的片段筛选及纯化金标准 SPRIselect 磁珠,为实验提供了极大的灵活性和可靠性

概述

NEBNext  Ultra II DNA 文库制备试剂盒能够用更低起始量的 DNA 构建高质量的文库。文库制备每一个步骤中的试剂都经过优化,能够从  500 pg 至 1 μg 的起始 DNA 高效构建高质量的文库。新一代的 NEBNext  试剂采用了快速、流程化、自动化的工作流程,在降低 PCR 循环数的同时提高了 GC  覆盖度。本试剂盒与 PCR-free  的工作流程兼容,且对于难以建库的样本,如 FFPE  样本,也有很好的效果。
 
Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒精简文库制备流程,将 DNA 片段化、末端修复和加 dA 尾优化到一步。
 
Ultra II DNA 和 Ultra II FS DNA 试剂盒均有包含或不含 SPRIselect® 磁珠的包装。
 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒            货   号                  #E7645L
 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒            货   号                  #E7645L

用于 Illumina 测序平台的 NEBNext 试剂:DNA 文库制备

除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext DNA 试剂盒还都经过构建基因组 DNA 文库或 ChIP-Seq 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。注:接头、引物是单独供应的。 
NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒            货   号                  #E7645L
 

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NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 货 号 #E7760L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E7760L
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产品特点

  更高的文库产量,满足更多实验需求

 即使是起始量极低的 RNA 样本,依然可以制备高质量文库:
 – 10 ng – 1μg 总 RNA (polyA mRNA 纯化流程) 
 – 5 ng – 1μg (去除 rRNA 流程) 
 通过减少 PCR 循环获得最低的偏嗜性
 最大灵活度满足您的特定流程所需试剂
 – 有定向(使用“dUTP 方法”进行链特异性文库制备)和非定向流程可选
 – rRNA 去除和 poly(A) mRNA 分离试剂可单独购买
 – 多样本接头盒引物有 12 和 96 个不同检索包装,可单独购买
 流程化的操作设计,减少了手动操作时间,与自动化兼容 
 试剂盒中提供实验所需的片段筛选及纯化金标准 SPRIselect 磁珠,为实验提供了极大的灵活性和可靠性
 质量很差的 RNA,依然有很好的性能

概述

 您需要提高 RNA 测序实验中的灵敏度和特异性吗? RNA 起始量非常低吗? 为了应对这些挑战,我们的

二代 RNA 文库制备试剂盒已经重新优化了每个步骤,使文库产量提高了几倍,并且达到更低的起始量
和更少的 PCR 循环。这些流程化的试剂盒可兼容自动化的工作流程,可用于定向(使用“dUTP 方法”
进行链特异性文库制备)和非定向库准备,并可选择 SPRISelect 磁珠进行片段筛选和纯化步骤。
 
NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L
 
 NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L
 

RNA 文库制备流程

 NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L

 

RNA 文库制备试剂——订购信息

 NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L

适用于所有平台的试剂

NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L 

 登陆 UltraIIRNA.com  学习观看更多性能数据。

NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠 货 号 #E7765L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠            货   号                  #E7765L 

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