脂质纳米粒负载siRNA

Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6142	Synthetic siRNA Quantitation Core Kit	30 Rxns	￥4,963

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Sirna – 修饰性PEG

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*■ 制品内容 (30次量)^1**
1. Terminal Transferase Buffer	390 μl
2. Terminal Transferase	30 μl
3. dATP	150 μl
4. Recombinant RNase Inhibitor	30 μl
5. Oligo dT Primer^*2	150 μl
6. RT Buffer	270 μl
7. RT Enzyme Mix	30 μl
8. Universal Primer (10 μM)	120 μl
9. EASY Dilution (for Real Time PCR)	1 ml
10. Control siRNA (20 nM)	10 μl
11. Control Primer (10 μM)	20 μl
1 含 poly dA 加尾反应及反转录反应 30 次反应量、Real Time PCR用Universal Primer 120 次反应量。 2 本制品专用Oligo dT Primer。

■ 保存

-20℃。

■ 制品说明

在动物或细胞中siRNA对特定基因敲除效果的验证，在医药领域被广泛应用。
本制品是对合成siRNA进行定量的试剂盒，通过Real Time PCR解析方法，对细胞、组织、血液等提取的Total RNA样品中siRNA的残余量进行测定。
siRNA化学合成时一般在3’末端带有两个脱氧胸腺嘧啶(dT)碱基。本试剂盒在3’末端(dT)加上poly(A)尾，再利用特别设计的Oligo dT Primer进行反转录反应，即使在Total RNA存在的条件下也能制备与siRNA互补的cDNA。以合成的cDNA为模板，利用TB Green^® Premix Ex Taq Ⅱ (Tli RNaseH Plus)等试剂盒中的嵌合法进行Real Time PCR，对合成的siRNA进行高灵敏度的定量。
注意：1. 本试剂盒应用于3’末端带有脱氧胸腺嘧啶d(TT)的siRNA的定量。
2. 合成的siRNA 3’末端两个(dT)碱基以外带有DNA序列时，可以通过更改Oligo dT Primer序列，使用本试剂盒。
3. 合成的siRNA 3’末端没有添加(dT)碱基或者3’末端为RNA时，不能使用本试剂盒。

■ 实验例

小鼠血液中合成siRNA的定量模拟实验

【方法】

在50 μl小鼠全血(柠檬酸钠抗凝剂)中分别添加10 amol、1 fmol、100 fmol的Control siRNA后，使用RNAiso Plus(Code No.: 9108)及Dr. GenTLE Precipitation Carrier(Code No.: 9094)制备Total RNA(50 μl)。
使用本制品和TB Green Premix Ex Taq II (Perfect Real Time) 进行Real Time PCR反应，对Control siRNA进行定量检测。

【结果】

使用本制品，通过Real Time PCR解析方法，对于添加到小鼠血液中的siRNA进行了定量。

Takara 6142 Synthetic siRNA Quantitation Core Kit 30 Rxns

图. 小鼠血液样品中掺入的Control siRNA定量结果

Takara 3430 siRNA Ladder Marker 约25 次酶试剂盒

发表于2022年9月29日由修饰性PEG

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

siRNA Ladder Marker
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3430	siRNA Ladder Marker	约25 次	￥391

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Sirna – 修饰性PEG

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■ 制品内容

siRNA Ladder Marker	25 μg
6X Loading Buffer	1 ml

■ 浓度

200 ng/μl

■ 制品说明

siRNA Ladder Marker由长度20 bp至1,000 bp间的10条dsRNA片段组成，20 bp至50 bp间隔10 bp、100 bp至500 bp间隔100 bp，此外，还有一条1,000 bp dsRNA片段。其中100 bp的双链 RNA片段为增强带，显示亮带，可作为参照。

■ 保存

-20℃。
6X Loading Buffer开封后应于室温保存。

■ 15%的PAGE电泳图像示意图

■ 用途

该Marker主要应用于制备siRNA时标记凝胶电泳中dsRNA分子大小。

■ 使用注意

1. 开封后建议分装保存使用，避免反复冻融。
2. 不要保存已加入Loading Buffer的siRNA Ladder Maker，否则电泳条带可能不清晰。
3. 使用后立即于-20℃保存。
4. 采取必要措施避免RNase污染，如佩戴洁净的一次性手套，使用RNA实验专用的tubes和micropipette chips等。不要在同一区域进行使用RNase的实验。
5. 不要用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。否则会导致条带重叠，不能正确分离。
6. 由于dsRNA样品序列不同，显示的片段长度会略有差异。当使用的siRNA样品中含有DNA时，片段大小会略有差异。