Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒 货号36200-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

货号 36200 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 Plate 价格 3924
Ex (nm) 581 Em (nm) 593
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW,其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内,Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,导致带电荷的荧光染料停留在细胞内,并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性,高灵敏度和100-250倍的荧光增加(当它与钙形成复合物时)使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式
其他仪器
FDSS, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
  4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液:向Calbryte 590 AM(组分A)的小瓶中加入20 µL(#36200)或200 µL(#36201和#36202)DMSO。 注意:20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装,并在<-20℃下保存。 注意:避光,并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液(1X):将9 mL的HHBS(组分C,试剂盒#36202中未包括)与1 mL的10XPluronic®F127 Plus(10X)(组分B)充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液:将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(1X)中,并充分混合。 注意:该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意:10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟,然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意:如果测定需要37°C,请立即进行实验,而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作,则在室温下孵育细胞板1小时(建议孵育时间不超过2小时)。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。

 

图示

Screen Quest  Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒    货号36200

图1.图表说明了信噪比(SNR)x 100%。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液,在37°C下孵育45分钟,在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP(50 µL /孔)以达到最终指示的浓度。

 

 

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Authors: Wu, Yanjiao and Xu, Xiaoli and Ma, Lunkun and Yi, Qian and Sun, Weichao and Tang, Liling
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Liu, Jia and Du, Qing and Zhu, He and Li, Yu and Liu, Maodong and Yu, Shoushui and Wang, Shilei
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Lu, Jiang and Yao, Xue-qin and Luo, Xin and Wang, Yu and Chung, Sookja Kim and Tang, He-xin and Cheung, Chi Wai and Wang, Xian-yu and Meng, Chen and Li, Qing and others
Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
Authors: Yang, Gang and Xiao, Zhenghua and Ren, Xiaomei and Long, Haiyan and Ma, Kunlong and Qian, Hong and Guo, Yingqiang
Journal: Scientific Reports (2017): 41781

Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Sun, Xia and Lin, Yi and Huang, Qiansheng and Shi, Junpeng and Qiu, Ling and Kang, Mei and Chen, Yajie and Fang, Chao and Ye, Ting and Dong, Sijun
Journal: Journal of cellular and molecular medicine (2015): 581–594

The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Zhao, Lantao and Li, Shuhong and Wang, Shilei and Yu, Ning and Liu, Jia
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542

Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Peng, Xu-Dong and Zhao, Gui-Qiu and Lin, Jing and Jiang, Nan and Xu, Qiang and Zhu, Cheng-Cheng and Qu, Jain-Qiu and Cong, Lin and Li, Hui
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447

Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Li, Qing and Lu, Jiang and Wang, Xianyu and others
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Liang, Nan and Wang, Peng and Wang, Shilei and Li, Shuhong and Li, Yu and Wang, Jinying and Wang, Min
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: Hagiyama, M and Inoue, T and Furuno, T and Iino, T and Itami, S and Nakanishi, M and Asada, H and Hosokawa, Y and Ito, A
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778

说明书
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Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒 货号36201-AAT Bioquest荧光染料

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Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

货号 36201 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 Plates 价格 12588
Ex (nm) 581 Em (nm) 593
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW,其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内,Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,导致带电荷的荧光染料停留在细胞内,并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性,高灵敏度和100-250倍的荧光增加(当它与钙形成复合物时)使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙检测试剂盒。

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式
其他仪器
FDSS, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
  4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液:向Calbryte 590 AM(组分A)的小瓶中加入20 µL(#36200)或200 µL(#36201和#36202)DMSO。 注意:20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装,并在<-20℃下保存。 注意:避光,并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液(1X):将9 mL的HHBS(组分C,试剂盒#36202中未包括)与1 mL的10XPluronic®F127 Plus(10X)(组分B)充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液:将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(1X)中,并充分混合。 注意:该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意:10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟,然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意:如果测定需要37°C,请立即进行实验,而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作,则在室温下孵育细胞板1小时(建议孵育时间不超过2小时)。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。
 

图示

Screen Quest  Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒    货号36201

图1.图表说明了信噪比(SNR)x 100%。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液,在37°C下孵育45分钟,在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP(50 µL /孔)以达到最终指示的浓度。

 

 

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Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: Hagiyama, M and Inoue, T and Furuno, T and Iino, T and Itami, S and Nakanishi, M and Asada, H and Hosokawa, Y and Ito, A
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778

说明书
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Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒 货号36202-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

货号 36202 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Plates 价格 92016
Ex (nm) 581 Em (nm) 593
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW,其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内,Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,导致带电荷的荧光染料停留在细胞内,并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性,高灵敏度和100-250倍的荧光增加(当它与钙形成复合物时)使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙检测试剂盒。

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式
其他仪器
FDSS, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
  4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液:向Calbryte 590 AM(组分A)的小瓶中加入20 µL(#36200)或200 µL(#36201和#36202)DMSO。 注意:20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装,并在<-20℃下保存。 注意:避光,并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液(1X):将9 mL的HHBS(组分C,试剂盒#36202中未包括)与1 mL的10XPluronic®F127 Plus(10X)(组分B)充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液:将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液(1X)中,并充分混合。 注意:该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意:10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟,然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意:如果测定需要37°C,请立即进行实验,而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作,则在室温下孵育细胞板1小时(建议孵育时间不超过2小时)。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。

 

图示

Screen Quest  Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒    货号36202

图1.图表说明了信噪比(SNR)x 100%。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液,在37°C下孵育45分钟,在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP(50 µL /孔)以达到最终指示的浓度。

 

 

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Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Lu, Jiang and Yao, Xue-qin and Luo, Xin and Wang, Yu and Chung, Sookja Kim and Tang, He-xin and Cheung, Chi Wai and Wang, Xian-yu and Meng, Chen and Li, Qing and others
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Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Li, Qing and Lu, Jiang and Wang, Xianyu and others
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Liang, Nan and Wang, Peng and Wang, Shilei and Li, Shuhong and Li, Yu and Wang, Jinying and Wang, Min
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: Hagiyama, M and Inoue, T and Furuno, T and Iino, T and Itami, S and Nakanishi, M and Asada, H and Hosokawa, Y and Ito, A
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说明书
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Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红* 货号36300-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*    货号36300 货号 36300 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mL 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:36300

产品名称:Screen Quest 10X细胞染色缓冲液

规格:10ml

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品介绍

即用型缓冲液,针对荧光细胞成像进行了优化。 在某些情况下,此缓冲液可明显增强成像信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest 10X细胞染色缓冲液。 

 

图示

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*    货号36300

图1.带有Phenol Red Plus 的Screen Quest 10X细胞染色缓冲液的图

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*    货号36300

图2.使用Cal-520 AM在CHO-M1细胞中测量了ATP剂量反应。 将CHO-M1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中过夜接种。 加入含1X Phenol Red Plus 细胞染色缓冲液的HH缓冲液中的100 µL 10ug / ml Cal-520 AM,并在37oC下孵育60分钟。 加入ATP(50µL /孔)以达到最终指示的浓度。

 

参考文献

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: J Neurosci Methods (2004): 247

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: Cell Calcium (2004): 509

Amplitude distribution of calcium sparks in confocal images: theory and studies with an automatic detection method
Authors: Cheng H, Song LS, Shirokova N, Gonzalez A, Lakatta EG, Rios E, Stern MD.
Journal: Biophys J (1999): 606

Flow cytometric kinetic assay of calcium mobilization in whole blood platelets using Fluo-3 and CD41
Authors: do Ceu Monteiro M, Sansonetty F, Goncalves MJ, O’Connor JE.
Journal: Cytometry (1999): 302

A simple numerical model of calcium spark formation and detection in cardiac myocytes
Authors: Smith GD, Keizer JE, Stern MD, Lederer WJ, Cheng H.
Journal: Biophys J (1998): 15

Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Loading and localization of Fluo-3 and Fluo-3/AM calcium indicators in sinapis alba root tissue
Authors: Tretyn A, Kado RT, Kendrick RE.
Journal: Folia Histochem Cytobiol (1997): 41

Nucleoplasmic and cytoplasmic differences in the fluorescence properties of the calcium indicator Fluo-3
Authors: Perez-Terzic C, Stehno-Bittel L, Clapham DE.
Journal: Cell Calcium (1997): 275

Detection of a trigger zone of bradykinin-induced fast calcium waves in PC12 neurites
Authors: Reber BF, Schindelholz B.
Journal: Pflugers Arch (1996): 893

Improved four-color flow cytometry method using fluo-3 and triple immunofluorescence for analysis of intracellular calcium ion ([Ca2+]i) fluxes among mouse lymph node B- and T-lymphocyte subsets
Authors: Greimers R, Trebak M, Moutschen M, Jacobs N, Boniver J.
Journal: Cytometry (1996): 205

说明书
Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*.pdf

Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红* 货号36301-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*

Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*

货号 36301 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mL 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:36301

产品名称:Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液

规格:10ml

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

适用仪器


荧光酶标仪  
推荐孔板: 黑色孔板
其他仪器
FDSS, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

 

产品介绍

即用型缓冲液,针对钙分析进行了优化。 在某些情况下,该缓冲液会大大增加成像信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液。 

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

图示

Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*   货号36301

图1. Screen Quest 10X钙测定缓冲液和苯酚Red Plus 的曲线图。

 

参考文献

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: J Neurosci Methods (2004): 247

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: Cell Calcium (2004): 509

Amplitude distribution of calcium sparks in confocal images: theory and studies with an automatic detection method
Authors: Cheng H, Song LS, Shirokova N, Gonzalez A, Lakatta EG, Rios E, Stern MD.
Journal: Biophys J (1999): 606

Flow cytometric kinetic assay of calcium mobilization in whole blood platelets using Fluo-3 and CD41
Authors: do Ceu Monteiro M, Sansonetty F, Goncalves MJ, O’Connor JE.
Journal: Cytometry (1999): 302

A simple numerical model of calcium spark formation and detection in cardiac myocytes
Authors: Smith GD, Keizer JE, Stern MD, Lederer WJ, Cheng H.
Journal: Biophys J (1998): 15

Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Loading and localization of Fluo-3 and Fluo-3/AM calcium indicators in sinapis alba root tissue
Authors: Tretyn A, Kado RT, Kendrick RE.
Journal: Folia Histochem Cytobiol (1997): 41

Nucleoplasmic and cytoplasmic differences in the fluorescence properties of the calcium indicator Fluo-3
Authors: Perez-Terzic C, Stehno-Bittel L, Clapham DE.
Journal: Cell Calcium (1997): 275

Detection of a trigger zone of bradykinin-induced fast calcium waves in PC12 neurites
Authors: Reber BF, Schindelholz B.
Journal: Pflugers Arch (1996): 893

Improved four-color flow cytometry method using fluo-3 and triple immunofluorescence for analysis of intracellular calcium ion ([Ca2+]i) fluxes among mouse lymph node B- and T-lymphocyte subsets
Authors: Greimers R, Trebak M, Moutschen M, Jacobs N, Boniver J.
Journal: Cytometry (1996): 205

说明书
Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*.pdf

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒 货号36305-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒

货号 36305 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 Plates 价格 4584
Ex (nm) 437 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

钙通量测定法是药物发现中筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的首选方法。该试剂盒使用高度钙敏感和膜通透的腔肠素类似物作为用载脂蛋白基因转染细胞的钙指示剂。水母发光蛋白是来自维多利亚水母的钙敏感生物发光蛋白,已广泛用作细胞中的钙指示剂。当与钙离子结合时,水母发光蛋白复合物发出蓝光。发光强度与Ca 2+浓度成正比。我们的腔肠素试剂盒比荧光钙测定试剂盒(如Fluo-4,Fluo-3,Calcium-3和Calcium-4)灵敏得多。该试剂盒提供了一种优化的测定方法,用于检测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道。该测定可以使用96孔或384孔微孔板进行,并易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒。

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 通过去除生长培养基制备细胞
  2. 加入腔肠素装载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在室温下孵育3-4小时
  4. 检测水母发光蛋白的发光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1.腔肠素类似物:将250 µL 100%ETOH(组分B)加到腔肠素类似物(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:25 µL重组腔肠素类似物对于一块板就足够了。 如果将试管密封,则未使用的腔肠素类似物原液可在<-20℃下保存一个月以上。 避光并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液(1X):a)对于#36305(10板试剂盒),准备使用1X分析缓冲液(组分C)。b)对于 #36306(100板试剂盒),通过将10 mL的10X分析缓冲液(组分C)稀释到90 mL的HHBS缓冲液(试剂盒中未提供)中,制成1X分析缓冲液,并充分混合。 注意:10 mL 1X分析缓冲液足以用于一块板。 将未使用的1X分析缓冲液存储在4℃下。

 

工作溶液配制

腔肠素装载溶液:将25 µL ETOH重构的腔肠素类似物(储备溶液制备)添加到10 mL 1X分析缓冲液(储备溶液制备)中,并充分混合。 注意:该工作溶液在室温下至少可稳定2小时,并避免光照。

 

实验步骤

1.从细胞板中去除生长培养基。 注意:重要的是去除生长培养基,以最大程度地减少化合物对血清或培养基的干扰。 注意:将细胞在含0.5-1%FBS的生长培养基中培养,以避免去除培养基的步骤。 在这种情况下,需要在1X缓冲液中装载2X腔肠素。

2.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的腔肠素加载溶液添加到细胞板中。

3.在避光的条件下,于室温下孵育腔肠素装载板3-4小时。

4.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

5.通过使用具有光电倍增管的封闭腔室的光子检测系统,检测水母发光蛋白的发光强度。 仪器必须完全排除外部光线。

 

图示

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒   货号36305

图1. CHO-aeq细胞上的ATP剂量反应。 用载脂蛋白精稳定转染的CHO细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔接种在Costar白色96孔板中过夜。 除去生长培养基,并使用Screen Quest 腔肠素钙测定试剂盒将细胞与100 µL染料上载溶液一起在室温下孵育3小时,并避光。 由NOVOstar(BMG Labtech)添加ATP(25 µL /孔),以达到最终指示的浓度。 ATP的EC50约为0.8 µM。

 

 

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Authors: Harikumar, Kaleeckal G and Yan, Yan and Xu, Ting-Hai and Melcher, Karsten and Xu, H Eric and Miller, Laurence J
Journal: (2017)

Intracellular Ca2+ is important for flagellin-triggered defense in Arabidopsis and involves inositol polyphosphate signaling
Authors: Ma, Yi and Zhao, Yichen and Berkowitz, Gerald A
Journal: Journal of Experimental Botany (2017)

Orchestration of salivary secretion mediated by two different dopamine receptors in the blacklegged tick Ixodes scapularis
Authors: Kim, Donghun and Simo, Ladislav and Park, Yoonseong
Journal: Journal of Experimental Biology (2014): 3656–3663

Blue fluorescent protein from the calcium-sensitive photoprotein aequorin: catalytic properties for the oxidation of coelenterazine as an oxygenase
Authors: Inouye S, Sasaki S.
Journal: FEBS Lett (2006): 1977

Crystal structure of obelin after Ca2+-triggered bioluminescence suggests neutral coelenteramide as the primary excited state
Authors: Liu ZJ, Stepanyuk GA, Vysotski ES, Lee J, Markova SV, Malikova NP, Wang BC.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2006): 2570

Expression, purification and characterization of calcium-triggered luciferin-binding protein of Renilla reniformis
Authors: Inouye S.
Journal: Protein Expr Purif. (2006)

Extended bioluminescence resonance energy transfer (eBRET) for monitoring prolonged protein-protein interactions in live cells
Authors: Pfleger KD, Dromey JR, Dalrymple MB, Lim EM, Thomas WG, Eidne KA.
Journal: Cell Signal (2006): 1664

In vivo testing of Renilla luciferase substrate analogs in an orthotopic murine model of human glioblastoma
Authors: Otto-Duessel M, Khankaldyyan V, Gonzalez-Gomez I, Jensen MC, Laug WE, Rosol M.
Journal: Mol Imaging (2006): 57

Luminescence of imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one compounds
Authors: Teranishi K.
Journal: Bioorg Chem. (2006)

Mitochondrial adaptations within chronically ischemic swine myocardium
Authors: McFalls EO, Sluiter W, Schoonderwoerd K, Manintveld OC, Lamers JM, Bezstarosti K, van Beusekom HM, Sikora J, Ward HB, Merkus D, Duncker DJ.
Journal: J Mol Cell Cardiol (2006): 980

说明书
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Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒 货号36306-AAT Bioquest荧光染料

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Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒

货号 36306 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Plates 价格 32460
Ex (nm) 437 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

钙通量测定法是药物发现中筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的首选方法。该试剂盒使用高度钙敏感和膜通透的腔肠素类似物作为用载脂蛋白基因转染细胞的钙指示剂。水母发光蛋白是来自维多利亚水母的钙敏感生物发光蛋白,已广泛用作细胞中的钙指示剂。当与钙离子结合时,水母发光蛋白复合物发出蓝光。发光强度与Ca 2+浓度成正比。我们的腔肠素试剂盒比荧光钙测定试剂盒(如Fluo-4,Fluo-3,Calcium-3和Calcium-4)灵敏得多。该试剂盒提供了一种优化的测定方法,用于检测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道。该测定可以使用96孔或384孔微孔板进行,并易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒。

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 通过去除生长培养基制备细胞
  2. 加入腔肠素装载溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
  3. 在室温下孵育3-4小时
  4. 检测水母发光蛋白的发光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1.腔肠素类似物:将250 µL 100%ETOH(组分B)加到腔肠素类似物(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:25 µL重组腔肠素类似物对于一块板就足够了。 如果将试管密封,则未使用的腔肠素类似物原液可在<-20℃下保存一个月以上。 避光并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液(1X):a)对于#36305(10板试剂盒),准备使用1X分析缓冲液(组分C)。b)对于 #36306(100板试剂盒),通过将10 mL的10X分析缓冲液(组分C)稀释到90 mL的HHBS缓冲液(试剂盒中未提供)中,制成1X分析缓冲液,并充分混合。 注意:10 mL 1X分析缓冲液足以用于一块板。 将未使用的1X分析缓冲液存储在4℃下。

 

工作溶液配制

腔肠素装载溶液:将25 µL ETOH重构的腔肠素类似物(储备溶液制备)添加到10 mL 1X分析缓冲液(储备溶液制备)中,并充分混合。 注意:该工作溶液在室温下至少可稳定2小时,并避免光照。

 

实验步骤

1.从细胞板中去除生长培养基。 注意:重要的是去除生长培养基,以最大程度地减少化合物对血清或培养基的干扰。 注意:将细胞在含0.5-1%FBS的生长培养基中培养,以避免去除培养基的步骤。 在这种情况下,需要在1X缓冲液中装载2X腔肠素。

2.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的腔肠素加载溶液添加到细胞板中。

3.在避光的条件下,于室温下孵育腔肠素装载板3-4小时。

4.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

5.通过使用具有光电倍增管的封闭腔室的光子检测系统,检测水母发光蛋白的发光强度。 仪器必须完全排除外部光线。

 

图示

Screen Quest 发光法钙离子检测试剂盒   货号36306

图1. CHO-aeq细胞上的ATP剂量反应。 用载脂蛋白精稳定转染的CHO细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔接种在Costar白色96孔板中过夜。 除去生长培养基,并使用Screen Quest 腔肠素钙测定试剂盒将细胞与100 µL染料上载溶液一起在室温下孵育3小时,并避光。 由NOVOstar(BMG Labtech)添加ATP(25 µL /孔),以达到最终指示的浓度。 ATP的EC50约为0.8 µM。

 

 

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Journal: Protein Expr Purif. (2006)

Extended bioluminescence resonance energy transfer (eBRET) for monitoring prolonged protein-protein interactions in live cells
Authors: Pfleger KD, Dromey JR, Dalrymple MB, Lim EM, Thomas WG, Eidne KA.
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Authors: Teranishi K.
Journal: Bioorg Chem. (2006)

Mitochondrial adaptations within chronically ischemic swine myocardium
Authors: McFalls EO, Sluiter W, Schoonderwoerd K, Manintveld OC, Lamers JM, Bezstarosti K, van Beusekom HM, Sikora J, Ward HB, Merkus D, Duncker DJ.
Journal: J Mol Cell Cardiol (2006): 980

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Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系* 货号36307-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

货号 36307 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 Plate 价格 1272
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的钙检测试剂盒,钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Fluo-8 NW,其可以穿过细胞膜。 Fluo-8 NW是可用于HTS筛选的最亮钙指示剂。一旦进入细胞内,Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,产生带负电荷的荧光染料,其停留在细胞内,并且在与钙结合时其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Fluo-8 NW的荧光。其长波长,高灵敏度和100-250倍荧光增加的特性(当它与钙形成复合物时)使Fluo-8 NW成为测量细胞钙的理想指标。这个Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供了一种优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 510nm
推荐孔板: 黑色
仪器使用: 底部读取模式/可编程液体处理
其他可用仪器:
FDSS, FLIPR, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.去除生长培养基
3.添加Fluo-8 NW染料工作溶液
4.在室温下孵育1小时
5.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

 

溶液配制

1.储存溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Fluo-8 NW配制:
对于Cat No.36307,将10μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。
对于Cat No.36308和36309,将100μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。 注意:10μLFluo-8 NW原液足以容纳1个平板。

1.2分析缓冲液储备液(1X):
对于Cat No.36307和36308,将9mL HHBS(组分C)加入10X Pluronic F127 Plus(1mL,组分B)中并充分混合。
对于Cat No.36309,将整瓶10XPluronic®F127Plus(10 mL,组分B)加入90 mL HHBS缓冲液(不包括在试剂盒中)中并充分混合。 注意:对于一个平板,10 mL的1X分析缓冲液就足够了。

 

2.工作溶液配制

将10μLFluo-8 NW DMSO储备溶液加入10mL 1X测定缓冲液中并充分混合。 该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

操作步骤

1.有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

2.从细胞板上除去生长培养基。注意:重要的是去除生长培养基,以最大限度地减少背景荧光和化合物对血清或培养基的干扰。注意:或者,在含有0.5%至1%FBS的生长培养基中培养细胞,以避免培养基去除步骤。在这种情况下,需要在HHBS缓冲液中加入2X染料。 [我们为那些在生长培养基中使用0.5%至1%FBS以避免培养基去除步骤的人提供2个独立的无洗涤钙测定试剂盒(目录号36315和目录号36316)。

3.将100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Fluo-8NW染料工作溶液加入到细胞板中。

4.将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟,然后在室温下将板孵育另外30分钟。注意:如果测定需要37°C,立即进行实验,无需进一步室温孵育。注意:如果细胞在室温下运行时间较长,可在室温下孵育细胞培养板1-2小时(建议培养时间不超过2小时。)

5.用HHBS或所需缓冲液制备复合板。

6.通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来进行钙通量测定。注意:在实验之前运行信号测试很重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大强度计数的10%至15%的水平。例如,FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000,因此应调整仪器设置以使其信号测试强度在7,000到10,000左右。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU(Max-Min))用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算卡巴胆碱剂量样品。 

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*   货号36307

图1.使用Screen Quest Fluo-8 NW Assay Kit和Fluo-4 NW Assay Kit在HEK-293细胞中测量Carbachol剂量反应。 将HEK-293细胞以40,000个细胞/100μL/孔接种在Costar黑壁/透明底96孔板中过夜。 除去生长培养基,使用Screen Quest Fluo 8-NW钙测定试剂盒或Fluo-4 NW试剂盒(根据制造商的说明书)将细胞与100μL染料上样溶液一起在室温下孵育1小时 温度。 通过NOVOstar(BMG Labtech)添加卡巴胆碱(25μL/孔)以达到最终指示的浓度。 Fluo8 NW的EC50约为1.2μM。

 

参考文献

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
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Journal: Scientific reports (2017): 17093

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Journal: Bone (2017)

High Glucose Enhances Isoflurane-Induced Neurotoxicity by Regulating TRPC-Dependent Calcium Influx
Authors: ZhongJie Liu, ChangQing Ma, Wei Zhao, QingGuo Zhang, Rui Xu, HongFei Zhang, HongYi Lei, ShiYuan Xu
Journal: Neurochemical Research (2017): 1–14

 

相关产品

产品名称 货号
Screen Quest Calbryte 520 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒 Cat#36317
Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒 Cat#36314

说明书
Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*.pdf

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系* 货号36308-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

货号 36308 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 Plates 价格 4584
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的钙检测试剂盒,钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Fluo-8 NW,其可以穿过细胞膜。 Fluo-8 NW是可用于HTS筛选的最亮钙指示剂。一旦进入细胞内,Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,产生带负电荷的荧光染料,其停留在细胞内,并且在与钙结合时其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Fluo-8 NW的荧光。其长波长,高灵敏度和100-250倍荧光增加的特性(当它与钙形成复合物时)使Fluo-8 NW成为测量细胞钙的理想指标。这个Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供了一种优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 510nm
推荐孔板: 黑色
仪器使用: 底部读取模式/可编程液体处理
其他可用仪器:
FDSS, FLIPR, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.去除生长培养基
3.添加Fluo-8 NW染料工作溶液
4.在室温下孵育1小时
5.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

 

溶液配制

1.储存溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Fluo-8 NW配制:
对于Cat No.36307,将10μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。
对于Cat No.36308和36309,将100μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。 注意:10μLFluo-8 NW原液足以容纳1个平板。

1.2分析缓冲液储备液(1X):
对于Cat No.36307和36308,将9mL HHBS(组分C)加入10X Pluronic F127 Plus(1mL,组分B)中并充分混合。
对于Cat No.36309,将整瓶10XPluronic®F127Plus(10 mL,组分B)加入90 mL HHBS缓冲液(不包括在试剂盒中)中并充分混合。 注意:对于一个平板,10 mL的1X分析缓冲液就足够了。

 

2.工作溶液配制

将10μLFluo-8 NW DMSO储备溶液加入10mL 1X测定缓冲液中并充分混合。 该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

操作步骤

1.有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

2.从细胞板上除去生长培养基。注意:重要的是去除生长培养基,以最大限度地减少背景荧光和化合物对血清或培养基的干扰。注意:或者,在含有0.5%至1%FBS的生长培养基中培养细胞,以避免培养基去除步骤。在这种情况下,需要在HHBS缓冲液中加入2X染料。 [我们为那些在生长培养基中使用0.5%至1%FBS以避免培养基去除步骤的人提供2个独立的无洗涤钙测定试剂盒(目录号36315和目录号36316)。

3.将100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Fluo-8NW染料工作溶液加入到细胞板中。

4.将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟,然后在室温下将板孵育另外30分钟。注意:如果测定需要37°C,立即进行实验,无需进一步室温孵育。注意:如果细胞在室温下运行时间较长,可在室温下孵育细胞培养板1-2小时(建议培养时间不超过2小时。)

5.用HHBS或所需缓冲液制备复合板。

6.通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来进行钙通量测定。注意:在实验之前运行信号测试很重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大强度计数的10%至15%的水平。例如,FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000,因此应调整仪器设置以使其信号测试强度在7,000到10,000左右。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU(Max-Min))用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算卡巴胆碱剂量样品。 

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*   货号36308

图1.使用Screen Quest Fluo-8 NW Assay Kit和Fluo-4 NW Assay Kit在HEK-293细胞中测量Carbachol剂量反应。 将HEK-293细胞以40,000个细胞/100μL/孔接种在Costar黑壁/透明底96孔板中过夜。 除去生长培养基,使用Screen Quest Fluo 8-NW钙测定试剂盒或Fluo-4 NW试剂盒(根据制造商的说明书)将细胞与100μL染料上样溶液一起在室温下孵育1小时 温度。 通过NOVOstar(BMG Labtech)添加卡巴胆碱(25μL/孔)以达到最终指示的浓度。 Fluo8 NW的EC50约为1.2μM。

 

参考文献

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Masaaki Ishii, Bärbel Rohrer
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Cells smell on a CMOS: A portable odorant detection system using cell-laden collagen pillars
Authors: Yusuke Hirata, Yuya Morimoto, Eunryel Nam, Shotaro Yoshida, Shoji Takeuchi
Journal: (2017): 13–16

Ex vivo replication of phenotypic functions of osteocytes through biomimetic 3D bone tissue construction
Authors: Qiaoling Sun, Saba Choudhary, Ciaran Mannion, Yair Kissin, Jenny Zilberberg, Woo Y Lee
Journal: Bone (2017)

High Glucose Enhances Isoflurane-Induced Neurotoxicity by Regulating TRPC-Dependent Calcium Influx
Authors: ZhongJie Liu, ChangQing Ma, Wei Zhao, QingGuo Zhang, Rui Xu, HongFei Zhang, HongYi Lei, ShiYuan Xu
Journal: Neurochemical Research (2017): 1–14

说明书
Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*.pdf

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系* 货号36309-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

货号 36309 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Plates 价格 32460
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Screen Quest Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的钙检测试剂盒,钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定,用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Fluo-8 NW,其可以穿过细胞膜。 Fluo-8 NW是可用于HTS筛选的最亮钙指示剂。一旦进入细胞内,Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割,产生带负电荷的荧光染料,其停留在细胞内,并且在与钙结合时其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时,该受体表明细胞内钙的释放,这极大地增加了Fluo-8 NW的荧光。其长波长,高灵敏度和100-250倍荧光增加的特性(当它与钙形成复合物时)使Fluo-8 NW成为测量细胞钙的理想指标。这个Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供了一种优化的检测方法,用于监测G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 510nm
推荐孔板: 黑色
仪器使用: 底部读取模式/可编程液体处理
其他可用仪器:
FDSS, FLIPR, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.去除生长培养基
3.添加Fluo-8 NW染料工作溶液
4.在室温下孵育1小时
5.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

 

溶液配制

1.储存溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Fluo-8 NW配制:
对于Cat No.36307,将10μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。
对于Cat No.36308和36309,将100μLDMSO加入Fluo-8 NW(组分A)中,并充分混合。 注意:10μLFluo-8 NW原液足以容纳1个平板。

1.2分析缓冲液储备液(1X):
对于Cat No.36307和36308,将9mL HHBS(组分C)加入10X Pluronic F127 Plus(1mL,组分B)中并充分混合。
对于Cat No.36309,将整瓶10XPluronic®F127Plus(10 mL,组分B)加入90 mL HHBS缓冲液(不包括在试剂盒中)中并充分混合。 注意:对于一个平板,10 mL的1X分析缓冲液就足够了。

 

2.工作溶液配制

将10μLFluo-8 NW DMSO储备溶液加入10mL 1X测定缓冲液中并充分混合。 该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

操作步骤

1.有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

2.从细胞板上除去生长培养基。注意:重要的是去除生长培养基,以最大限度地减少背景荧光和化合物对血清或培养基的干扰。注意:或者,在含有0.5%至1%FBS的生长培养基中培养细胞,以避免培养基去除步骤。在这种情况下,需要在HHBS缓冲液中加入2X染料。 [我们为那些在生长培养基中使用0.5%至1%FBS以避免培养基去除步骤的人提供2个独立的无洗涤钙测定试剂盒(目录号36315和目录号36316)。

3.将100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的Fluo-8NW染料工作溶液加入到细胞板中。

4.将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟,然后在室温下将板孵育另外30分钟。注意:如果测定需要37°C,立即进行实验,无需进一步室温孵育。注意:如果细胞在室温下运行时间较长,可在室温下孵育细胞培养板1-2小时(建议培养时间不超过2小时。)

5.用HHBS或所需缓冲液制备复合板。

6.通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来进行钙通量测定。注意:在实验之前运行信号测试很重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大强度计数的10%至15%的水平。例如,FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000,因此应调整仪器设置以使其信号测试强度在7,000到10,000左右。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU(Max-Min))用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算卡巴胆碱剂量样品。 

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*   货号36309

图1.使用Screen Quest Fluo-8 NW Assay Kit和Fluo-4 NW Assay Kit在HEK-293细胞中测量Carbachol剂量反应。 将HEK-293细胞以40,000个细胞/100μL/孔接种在Costar黑壁/透明底96孔板中过夜。 除去生长培养基,使用Screen Quest Fluo 8-NW钙测定试剂盒或Fluo-4 NW试剂盒(根据制造商的说明书)将细胞与100μL染料上样溶液一起在室温下孵育1小时 温度。 通过NOVOstar(BMG Labtech)添加卡巴胆碱(25μL/孔)以达到最终指示的浓度。 Fluo8 NW的EC50约为1.2μM。

 

参考文献

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Masaaki Ishii, Bärbel Rohrer
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Cells smell on a CMOS: A portable odorant detection system using cell-laden collagen pillars
Authors: Yusuke Hirata, Yuya Morimoto, Eunryel Nam, Shotaro Yoshida, Shoji Takeuchi
Journal: (2017): 13–16

Ex vivo replication of phenotypic functions of osteocytes through biomimetic 3D bone tissue construction
Authors: Qiaoling Sun, Saba Choudhary, Ciaran Mannion, Yair Kissin, Jenny Zilberberg, Woo Y Lee
Journal: Bone (2017)

High Glucose Enhances Isoflurane-Induced Neurotoxicity by Regulating TRPC-Dependent Calcium Influx
Authors: ZhongJie Liu, ChangQing Ma, Wei Zhao, QingGuo Zhang, Rui Xu, HongFei Zhang, HongYi Lei, ShiYuan Xu
Journal: Neurochemical Research (2017): 1–14

说明书
Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*.pdf