Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW，其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内，Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割，导致带电荷的荧光染料停留在细胞内，并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时，该受体表明细胞内钙的释放，这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性，高灵敏度和100-250倍的荧光增加（当它与钙形成复合物时）使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法，用于监测G蛋白偶联受体（GPCR）和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液：向Calbryte 590 AM（组分A）的小瓶中加入20 µL（#36200）或200 µL（#36201和＃36202）DMSO。 注意：20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装，并在<-20℃下保存。 注意：避光，并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液（1X）：将9 mL的HHBS（组分C，试剂盒#36202中未包括）与1 mL的10XPluronic®F127 Plus（10X）（组分B）充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液：将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（1X）中，并充分混合。 注意：该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意：10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟，然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意：如果测定需要37°C，请立即进行实验，而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作，则在室温下孵育细胞板1小时（建议孵育时间不超过2小时）。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。

 

图示

图1.图表说明了信噪比（SNR）x 100％。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液，在37°C下孵育45分钟，在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP（50 µL /孔）以达到最终指示的浓度。

 

 

相关产品

Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
Authors: Wu, Yanjiao and Xu, Xiaoli and Ma, Lunkun and Yi, Qian and Sun, Weichao and Tang, Liling
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Liu, Jia and Du, Qing and Zhu, He and Li, Yu and Liu, Maodong and Yu, Shoushui and Wang, Shilei
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Lu, Jiang and Yao, Xue-qin and Luo, Xin and Wang, Yu and Chung, Sookja Kim and Tang, He-xin and Cheung, Chi Wai and Wang, Xian-yu and Meng, Chen and Li, Qing and others
Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
Authors: Yang, Gang and Xiao, Zhenghua and Ren, Xiaomei and Long, Haiyan and Ma, Kunlong and Qian, Hong and Guo, Yingqiang
Journal: Scientific Reports (2017): 41781

Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Sun, Xia and Lin, Yi and Huang, Qiansheng and Shi, Junpeng and Qiu, Ling and Kang, Mei and Chen, Yajie and Fang, Chao and Ye, Ting and Dong, Sijun
Journal: Journal of cellular and molecular medicine (2015): 581–594

The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Zhao, Lantao and Li, Shuhong and Wang, Shilei and Yu, Ning and Liu, Jia
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542

Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Peng, Xu-Dong and Zhao, Gui-Qiu and Lin, Jing and Jiang, Nan and Xu, Qiang and Zhu, Cheng-Cheng and Qu, Jain-Qiu and Cong, Lin and Li, Hui
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447

Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Li, Qing and Lu, Jiang and Wang, Xianyu and others
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Liang, Nan and Wang, Peng and Wang, Shilei and Li, Shuhong and Li, Yu and Wang, Jinying and Wang, Min
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: Hagiyama, M and Inoue, T and Furuno, T and Iino, T and Itami, S and Nakanishi, M and Asada, H and Hosokawa, Y and Ito, A
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW，其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内，Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割，导致带电荷的荧光染料停留在细胞内，并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时，该受体表明细胞内钙的释放，这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性，高灵敏度和100-250倍的荧光增加（当它与钙形成复合物时）使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法，用于监测G蛋白偶联受体（GPCR）和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液：向Calbryte 590 AM（组分A）的小瓶中加入20 µL（#36200）或200 µL（#36201和＃36202）DMSO。 注意：20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装，并在<-20℃下保存。 注意：避光，并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液（1X）：将9 mL的HHBS（组分C，试剂盒#36202中未包括）与1 mL的10XPluronic®F127 Plus（10X）（组分B）充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液：将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（1X）中，并充分混合。 注意：该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意：10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟，然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意：如果测定需要37°C，请立即进行实验，而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作，则在室温下孵育细胞板1小时（建议孵育时间不超过2小时）。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。
 

图示

图1.图表说明了信噪比（SNR）x 100％。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液，在37°C下孵育45分钟，在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP（50 µL /孔）以达到最终指示的浓度。

 

 

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Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

简要概述

Screen Quest Calbryte 590 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -590NW，其可以穿过细胞膜。 Calbryte -590 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内，Calbryte -590NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割，导致带电荷的荧光染料停留在细胞内，并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时，该受体表明细胞内钙的释放，这极大地增加了Calbryte -590NW的荧光。其优异的细胞保留特性，高灵敏度和100-250倍的荧光增加（当它与钙形成复合物时）使Calbryte -590NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -590NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-590不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法，用于监测G蛋白偶联受体（GPCR）和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 添加Calbryte 590 AM染料加载溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
3. 在室温或37°C下孵育45-60分钟
4. 在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Calbryte 590 AM储备溶液：向Calbryte 590 AM（组分A）的小瓶中加入20 µL（#36200）或200 µL（#36201和＃36202）DMSO。 注意：20 µL Calbryte 590 AM储备溶液足以装一板。 未用完的Calbryte 590 AM储备溶液可以等分分装，并在<-20℃下保存。 注意：避光，并避免重复的冻融循环。

2.分析缓冲液（1X）：将9 mL的HHBS（组分C，试剂盒#36202中未包括）与1 mL的10XPluronic®F127 Plus（10X）（组分B）充分混合。

 

工作溶液配制

Calbryte 590 AM工作溶液：将20 µL Calbryte 590 AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（1X）中，并充分混合。 注意：该工作溶液在室温下至少可稳定2小时。 注意：10 mL染料加载溶液足以用于一块96孔板。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Calbryte 590 AM染料加载溶液添加到细胞板中。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育60分钟，然后在室温下将板再孵育15-30分钟。 注意：如果测定需要37°C，请立即进行实验，而无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下能长时间正常工作，则在室温下孵育细胞板1小时（建议孵育时间不超过2小时）。

3.用HHBS或所需的缓冲液准备复合板。

4.通过检测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度。

 

图示

图1.图表说明了信噪比（SNR）x 100％。 使用Screen Quest Calbryte 590无丙磺舒和无洗涤钙测定试剂盒测量CHO-K1细胞中的ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在96孔黑色板上接种过夜。 加入100 µL的染料加载溶液，在37°C下孵育45分钟，在室温下孵育15分钟。 FlexStation 3添加了ATP（50 µL /孔）以达到最终指示的浓度。

 

 

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Authors: Wu, Yanjiao and Xu, Xiaoli and Ma, Lunkun and Yi, Qian and Sun, Weichao and Tang, Liling
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)

Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Liu, Jia and Du, Qing and Zhu, He and Li, Yu and Liu, Maodong and Yu, Shoushui and Wang, Shilei
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868

Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Lu, Jiang and Yao, Xue-qin and Luo, Xin and Wang, Yu and Chung, Sookja Kim and Tang, He-xin and Cheung, Chi Wai and Wang, Xian-yu and Meng, Chen and Li, Qing and others
Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945

Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
Authors: Yang, Gang and Xiao, Zhenghua and Ren, Xiaomei and Long, Haiyan and Ma, Kunlong and Qian, Hong and Guo, Yingqiang
Journal: Scientific Reports (2017): 41781

Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Sun, Xia and Lin, Yi and Huang, Qiansheng and Shi, Junpeng and Qiu, Ling and Kang, Mei and Chen, Yajie and Fang, Chao and Ye, Ting and Dong, Sijun
Journal: Journal of cellular and molecular medicine (2015): 581–594

The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Zhao, Lantao and Li, Shuhong and Wang, Shilei and Yu, Ning and Liu, Jia
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542

Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Peng, Xu-Dong and Zhao, Gui-Qiu and Lin, Jing and Jiang, Nan and Xu, Qiang and Zhu, Cheng-Cheng and Qu, Jain-Qiu and Cong, Lin and Li, Hui
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447

Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Li, Qing and Lu, Jiang and Wang, Xianyu and others
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002

Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Liang, Nan and Wang, Peng and Wang, Shilei and Li, Shuhong and Li, Yu and Wang, Jinying and Wang, Min
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600

Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: Hagiyama, M and Inoue, T and Furuno, T and Iino, T and Itami, S and Nakanishi, M and Asada, H and Hosokawa, Y and Ito, A
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778

Screen Quest 10X细胞染色缓冲液 *含酚红*

	货号	36300	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10 mL	价格	1272
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：36300

产品名称：Screen Quest 10X细胞染色缓冲液

规格：10ml

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品介绍

即用型缓冲液，针对荧光细胞成像进行了优化。 在某些情况下，此缓冲液可明显增强成像信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Screen Quest 10X细胞染色缓冲液。 

图示

图1.带有Phenol Red Plus 的Screen Quest 10X细胞染色缓冲液的图

图2.使用Cal-520 AM在CHO-M1细胞中测量了ATP剂量反应。 将CHO-M1细胞以50,000个细胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中过夜接种。 加入含1X Phenol Red Plus 细胞染色缓冲液的HH缓冲液中的100 µL 10ug / ml Cal-520 AM，并在37oC下孵育60分钟。 加入ATP（50µL /孔）以达到最终指示的浓度。

参考文献

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: J Neurosci Methods (2004): 247

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: Cell Calcium (2004): 509

Amplitude distribution of calcium sparks in confocal images: theory and studies with an automatic detection method
Authors: Cheng H, Song LS, Shirokova N, Gonzalez A, Lakatta EG, Rios E, Stern MD.
Journal: Biophys J (1999): 606

Flow cytometric kinetic assay of calcium mobilization in whole blood platelets using Fluo-3 and CD41
Authors: do Ceu Monteiro M, Sansonetty F, Goncalves MJ, O’Connor JE.
Journal: Cytometry (1999): 302

A simple numerical model of calcium spark formation and detection in cardiac myocytes
Authors: Smith GD, Keizer JE, Stern MD, Lederer WJ, Cheng H.
Journal: Biophys J (1998): 15

Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Loading and localization of Fluo-3 and Fluo-3/AM calcium indicators in sinapis alba root tissue
Authors: Tretyn A, Kado RT, Kendrick RE.
Journal: Folia Histochem Cytobiol (1997): 41

Nucleoplasmic and cytoplasmic differences in the fluorescence properties of the calcium indicator Fluo-3
Authors: Perez-Terzic C, Stehno-Bittel L, Clapham DE.
Journal: Cell Calcium (1997): 275

Detection of a trigger zone of bradykinin-induced fast calcium waves in PC12 neurites
Authors: Reber BF, Schindelholz B.
Journal: Pflugers Arch (1996): 893

Improved four-color flow cytometry method using fluo-3 and triple immunofluorescence for analysis of intracellular calcium ion ([Ca2+]i) fluxes among mouse lymph node B- and T-lymphocyte subsets
Authors: Greimers R, Trebak M, Moutschen M, Jacobs N, Boniver J.
Journal: Cytometry (1996): 205

Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液 *含酚红*

简要概述

产品基本信息

货号：36301

产品名称：Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液

规格：10ml

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品介绍

即用型缓冲液，针对钙分析进行了优化。 在某些情况下，该缓冲液会大大增加成像信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Screen Quest 10X钙离子检测缓冲液。 

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

图示

图1. Screen Quest 10X钙测定缓冲液和苯酚Red Plus 的曲线图。

参考文献

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: J Neurosci Methods (2004): 247

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: Cell Calcium (2004): 509

Amplitude distribution of calcium sparks in confocal images: theory and studies with an automatic detection method
Authors: Cheng H, Song LS, Shirokova N, Gonzalez A, Lakatta EG, Rios E, Stern MD.
Journal: Biophys J (1999): 606

Flow cytometric kinetic assay of calcium mobilization in whole blood platelets using Fluo-3 and CD41
Authors: do Ceu Monteiro M, Sansonetty F, Goncalves MJ, O’Connor JE.
Journal: Cytometry (1999): 302

A simple numerical model of calcium spark formation and detection in cardiac myocytes
Authors: Smith GD, Keizer JE, Stern MD, Lederer WJ, Cheng H.
Journal: Biophys J (1998): 15

Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Loading and localization of Fluo-3 and Fluo-3/AM calcium indicators in sinapis alba root tissue
Authors: Tretyn A, Kado RT, Kendrick RE.
Journal: Folia Histochem Cytobiol (1997): 41

Nucleoplasmic and cytoplasmic differences in the fluorescence properties of the calcium indicator Fluo-3
Authors: Perez-Terzic C, Stehno-Bittel L, Clapham DE.
Journal: Cell Calcium (1997): 275

Detection of a trigger zone of bradykinin-induced fast calcium waves in PC12 neurites
Authors: Reber BF, Schindelholz B.
Journal: Pflugers Arch (1996): 893

Improved four-color flow cytometry method using fluo-3 and triple immunofluorescence for analysis of intracellular calcium ion ([Ca2+]i) fluxes among mouse lymph node B- and T-lymphocyte subsets
Authors: Greimers R, Trebak M, Moutschen M, Jacobs N, Boniver J.
Journal: Cytometry (1996): 205

Screen Quest Fluo-8 去除培养基钙检测试剂盒*适合于难检测细胞系*

简要概述

产品说明书

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒

	货号	36314	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 Plate	价格	1272
	Ex (nm)	495	Em (nm)	516
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒，Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达通过钙发出信号的感兴趣的GPCR的细胞预加载有可以穿过细胞膜的Fluo-8 NW。一旦进入细胞内，Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被酯酶裂解，导致带电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后，其荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体发出细胞内钙的释放信号，这显着增加了Fluo-8 NW的荧光。 Fluo-8 NW具有长波长，高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性，是测量细胞钙的理想指标。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒为监测G蛋白偶联受体和钙通道提供了一种优化的检测方法。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

点击查看光谱

产品说明书

样品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加载溶液

在生长培养基中制备细胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室温下孵育1小时

监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

操作步骤

1.准备细胞：
1.1对于贴壁细胞：在生长培养基中将细胞过夜，对于96孔板，具有0.5-1％FBS，40,000至80,000个细胞/孔/100μL，或者对于384孔板，为10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

1.2对于非贴壁细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于等量的HHBS和Fluo-8 NW染料加载溶液中（参见下面的步骤2.4），125,000至250,000细胞/孔/100μL 用于96孔poly-D赖氨酸平板或30,000至60,000细胞/孔/25μL用于384孔聚-D赖氨酸平板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。
注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定细胞内钙动员的最佳细胞密度。

2.准备Fluo-8 NW染料加载溶液：
2.1在使用前，在室温下1小瓶Fluo-8 NW（组分A），1瓶10XPluronic®F127Plus（组分B）和HHBS（组分C）。

2.2Make Fluo-8 NW储备溶液::加入20μL（Cat＃36314）或200μL（Cat＃36315和＃36316）DMSO到Fluo-8 NW（A组分）小瓶中，混匀。
注意：20μLFluo-8 NW原液足以用于一个平板。如果管子密封，未使用的Fluo-8 NW储备溶液可以等分并在<-20摄氏度下储存超过一个月。避光，避免反复冻融循环。

2.3制备1X测定缓冲液：
A）。对于Cat＃36314（1个试剂盒）和＃36315（10个试剂盒试剂盒），通过将9mL HHBS（组分C）加入10X Pluronic F127 Plus（1mL，组分B）中制备1X测定缓冲液，并充分混合。

B）。对于Cat＃36316（100个试剂盒试剂盒），将整瓶10XPluronic®F127Plus（10 mL，组分B）加入90 mL HHBS缓冲液（不包括在试剂盒中）中，制成1X试剂缓冲液，并充分混合。
注意：对于一个平板，10 mL的1X测定缓冲液就足够了。在<-20℃下等分并储存未使用的1X测定缓冲液。避光，避免反复冻融循环。

2.4为一个细胞板制备Fluo-8 NW染料加载溶液：将20μLFluo-8 NW储备溶液（来自步骤2.2）加入10 mL 1X分析缓冲液（来自步骤2.3），并充分混合。该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

3.运行钙测定：
3.1将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Fluo-8 NW染料加载溶液（来自步骤2.4）加入到细胞板中。
注意：或者，在含有5-10％FBS的生长培养基中培养细胞以改善细胞生长。在这种情况下，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基以最小化背景荧光和化合物干扰血清。 [我们为那些喜欢保持培养基去除步骤的人提供2个独立的中等去除钙测定试剂盒（Cat＃36308和36309）]。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后将板在室温下再孵育30分钟。
注1：如果测定需要37℃，立即进行实验，无需进一步室温孵育。
注2：如果细胞在室温下运行时间较长，可在室温下孵育细胞板1-2小时（建议孵育时间不超过2小时。）

3.3用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

3.4通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来运行钙通量测定。
注意：在实验前进行信号测试非常重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10％至15％的水平。例如，FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000，因此应调整仪器设置以使信号测试强度在7,000到10,000左右。

参考文献

A Long-Acting PYY3–36 Analog Mediates Robust Anorectic Efficacy with Minimal Emesis in Nonhuman Primates
Authors: Shamina M Rangwala, Katharine D’Aquino, Yue-Mei Zhang, Lindsay Bader, Wilson Edwards, Songmao Zheng, Annette Eckardt, Ann Lacombe, Rebecca Pick, Veronica Moreno
Journal: Cell Metabolism (2019)

Oxidative Insults and Mitochondrial DNA Mutation Promote Enhanced Autophagy and Mitophagy Compromising Cell Viability in Pluripotent Cell Model of Mitochondrial Disease
Authors: Dar-Shong Lin, Yu-Wen Huang, Che-Sheng Ho, Pi-Lien Hung, Mei-Hsin Hsu, Tuan-Jen Wang, Tsu-Yen Wu, Tsung-Han Lee, Zo-Darr Huang, Po-Chun Chang
Journal: Cells (2019): 65

Prosocial effects of an oxytocin metabolite, but not synthetic oxytocin receptor agonists, in a mouse model of autism
Authors: Sheryl S Moy, Brian L Teng, Viktoriya D Nikolova, Natallia V Riddick, Catherine D Simpson, Amy Van Deusen, William P Janzen, Maria F Sassano, Cort A Pedersen, Michael B Jarstfer
Journal: Neuropharmacology (2019): 301–311

Human iPS cell-derived cardiac tissue sheets for functional restoration of infarcted porcine hearts
Authors: Masanosuke Ishigami, Hidetoshi Masumoto, Takeshi Ikuno, Takayuki Aoki, Masahide Kawatou, Kenji Minakata, Tadashi Ikeda, Ryuzo Sakata, Jun K Yamashita, Kenji Minatoya
Journal: PloS one (2018): e0201650

Structural characterization of agonist binding to protease-activated receptor 2 through mutagenesis and computational modeling
Authors: Amanda J Kennedy, Flavio Ballante, Johan R Johansson, Graeme Milligan, Linda Sundström, Anneli Nordqvist, Jens Carlsson
Journal: ACS Pharmacology & Translational Science (2018): 119–133

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

相关产品

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒

	货号	36315	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10 Plates	价格	4584
	Ex (nm)	495	Em (nm)	516
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒，Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达通过钙发出信号的感兴趣的GPCR的细胞预加载有可以穿过细胞膜的Fluo-8 NW。一旦进入细胞内，Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被酯酶裂解，导致带电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后，其荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体发出细胞内钙的释放信号，这显着增加了Fluo-8 NW的荧光。 Fluo-8 NW具有长波长，高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性，是测量细胞钙的理想指标。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒为监测G蛋白偶联受体和钙通道提供了一种优化的检测方法。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

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产品说明书

样品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加载溶液

在生长培养基中制备细胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室温下孵育1小时

监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

操作步骤

1.准备细胞：
1.1对于贴壁细胞：在生长培养基中将细胞过夜，对于96孔板，具有0.5-1％FBS，40,000至80,000个细胞/孔/100μL，或者对于384孔板，为10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

1.2对于非贴壁细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于等量的HHBS和Fluo-8 NW染料加载溶液中（参见下面的步骤2.4），125,000至250,000细胞/孔/100μL 用于96孔poly-D赖氨酸平板或30,000至60,000细胞/孔/25μL用于384孔聚-D赖氨酸平板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。
注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定细胞内钙动员的最佳细胞密度。

2.准备Fluo-8 NW染料加载溶液：
2.1在使用前，在室温下1小瓶Fluo-8 NW（组分A），1瓶10XPluronic®F127Plus（组分B）和HHBS（组分C）。

2.2Make Fluo-8 NW储备溶液::加入20μL（Cat＃36314）或200μL（Cat＃36315和＃36316）DMSO到Fluo-8 NW（A组分）小瓶中，混匀。
注意：20μLFluo-8 NW原液足以用于一个平板。如果管子密封，未使用的Fluo-8 NW储备溶液可以等分并在<-20摄氏度下储存超过一个月。避光，避免反复冻融循环。

2.3制备1X测定缓冲液：
一个）。对于Cat＃36314（1个试剂盒）和＃36315（10个试剂盒试剂盒），通过将9mL HHBS（组分C）加入10X Pluronic F127 Plus（1mL，组分B）中制备1X测定缓冲液，并充分混合。

B）。对于Cat＃36316（100个试剂盒试剂盒），将整瓶10XPluronic®F127Plus（10 mL，组分B）加入90 mL HHBS缓冲液（不包括在试剂盒中）中，制成1X试剂缓冲液，并充分混合。
注意：对于一个平板，10 mL的1X测定缓冲液就足够了。在<-20℃下等分并储存未使用的1X测定缓冲液。避光，避免反复冻融循环。

2.4为一个细胞板制备Fluo-8 NW染料加载溶液：将20μLFluo-8 NW储备溶液（来自步骤2.2）加入10 mL 1X分析缓冲液（来自步骤2.3），并充分混合。该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

3.运行钙测定：
3.1将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Fluo-8 NW染料加载溶液（来自步骤2.4）加入到细胞板中。
注意：或者，在含有5-10％FBS的生长培养基中培养细胞以改善细胞生长。在这种情况下，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基以最小化背景荧光和化合物干扰血清。 [我们为那些喜欢保持培养基去除步骤的人提供2个独立的中等去除钙测定试剂盒（Cat＃36308和36309）]。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后将板在室温下再孵育30分钟。
注1：如果测定需要37℃，立即进行实验，无需进一步室温孵育。
注2：如果细胞在室温下运行时间较长，可在室温下孵育细胞板1-2小时（建议孵育时间不超过2小时。）

3.3用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

3.4通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来运行钙通量测定。
注意：在实验前进行信号测试非常重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10％至15％的水平。例如，FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000，因此应调整仪器设置以使信号测试强度在7,000到10,000左右。

参考文献

A Long-Acting PYY3–36 Analog Mediates Robust Anorectic Efficacy with Minimal Emesis in Nonhuman Primates
Authors: Shamina M Rangwala, Katharine D’Aquino, Yue-Mei Zhang, Lindsay Bader, Wilson Edwards, Songmao Zheng, Annette Eckardt, Ann Lacombe, Rebecca Pick, Veronica Moreno
Journal: Cell Metabolism (2019)

Oxidative Insults and Mitochondrial DNA Mutation Promote Enhanced Autophagy and Mitophagy Compromising Cell Viability in Pluripotent Cell Model of Mitochondrial Disease
Authors: Dar-Shong Lin, Yu-Wen Huang, Che-Sheng Ho, Pi-Lien Hung, Mei-Hsin Hsu, Tuan-Jen Wang, Tsu-Yen Wu, Tsung-Han Lee, Zo-Darr Huang, Po-Chun Chang
Journal: Cells (2019): 65

Prosocial effects of an oxytocin metabolite, but not synthetic oxytocin receptor agonists, in a mouse model of autism
Authors: Sheryl S Moy, Brian L Teng, Viktoriya D Nikolova, Natallia V Riddick, Catherine D Simpson, Amy Van Deusen, William P Janzen, Maria F Sassano, Cort A Pedersen, Michael B Jarstfer
Journal: Neuropharmacology (2019): 301–311

Human iPS cell-derived cardiac tissue sheets for functional restoration of infarcted porcine hearts
Authors: Masanosuke Ishigami, Hidetoshi Masumoto, Takeshi Ikuno, Takayuki Aoki, Masahide Kawatou, Kenji Minakata, Tadashi Ikeda, Ryuzo Sakata, Jun K Yamashita, Kenji Minatoya
Journal: PloS one (2018): e0201650

Structural characterization of agonist binding to protease-activated receptor 2 through mutagenesis and computational modeling
Authors: Amanda J Kennedy, Flavio Ballante, Johan R Johansson, Graeme Milligan, Linda Sundström, Anneli Nordqvist, Jens Carlsson
Journal: ACS Pharmacology & Translational Science (2018): 119–133

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

相关产品

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒

	货号	36316	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 Plates	价格	39060
	Ex (nm)	495	Em (nm)	516
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒，Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达通过钙发出信号的感兴趣的GPCR的细胞预加载有可以穿过细胞膜的Fluo-8 NW。一旦进入细胞内，Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被酯酶裂解，导致带电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后，其荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体发出细胞内钙的释放信号，这显着增加了Fluo-8 NW的荧光。 Fluo-8 NW具有长波长，高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性，是测量细胞钙的理想指标。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒为监测G蛋白偶联受体和钙通道提供了一种优化的检测方法。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

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样品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加载溶液

在生长培养基中制备细胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室温下孵育1小时

监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

操作步骤

1.准备细胞：
1.1对于粘附细胞：在生长培养基中将细胞过夜，对于96孔板，具有0.5-1％FBS，40,000至80,000个细胞/孔/100μL，或者对于384孔板，为10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

1.2对于非粘附细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于等量的HHBS和Fluo-8 NW染料加载溶液中（参见下面的步骤2.4），125,000至250,000细胞/孔/100μL 用于96孔poly-D赖氨酸平板或30,000至60,000细胞/孔/25μL用于384孔聚-D赖氨酸平板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。
注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定细胞内钙动员的最佳细胞密度。

2.准备Fluo-8 NW染料加载溶液：
2.1在使用前，在室温下1小瓶Fluo-8 NW（组分A），1瓶10XPluronic®F127Plus（组分B）和HHBS（组分C）。

2.2Make Fluo-8 NW储备溶液::加入20μL（Cat＃36314）或200μL（Cat＃36315和＃36316）DMSO到Fluo-8 NW（A组分）小瓶中，混匀。
注意：20μLFluo-8 NW原液足以用于一个平板。如果管子密封，未使用的Fluo-8 NW储备溶液可以等分并在<-20摄氏度下储存超过一个月。避光，避免反复冻融循环。

2.3制备1X测定缓冲液：
一个）。对于Cat＃36314（1个试剂盒）和＃36315（10个试剂盒试剂盒），通过将9mL HHBS（组分C）加入10X Pluronic F127 Plus（1mL，组分B）中制备1X测定缓冲液，并充分混合。

B）。对于Cat＃36316（100个试剂盒试剂盒），将整瓶10XPluronic®F127Plus（10 mL，组分B）加入90 mL HHBS缓冲液（不包括在试剂盒中）中，制成1X试剂缓冲液，并充分混合。
注意：对于一个平板，10 mL的1X测定缓冲液就足够了。在<-20℃下等分并储存未使用的1X测定缓冲液。避光，避免反复冻融循环。

2.4为一个细胞板制备Fluo-8 NW染料加载溶液：将20μLFluo-8 NW储备溶液（来自步骤2.2）加入10 mL 1X分析缓冲液（来自步骤2.3），并充分混合。该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

3.运行钙测定：
3.1将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Fluo-8 NW染料加载溶液（来自步骤2.4）加入到细胞板中。
注意：或者，在含有5-10％FBS的生长培养基中培养细胞以改善细胞生长。在这种情况下，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基以最小化背景荧光和化合物干扰血清。 [我们为那些喜欢保持培养基去除步骤的人提供2个独立的中等去除钙测定试剂盒（Cat＃36308和36309）]。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后将板在室温下再孵育30分钟。
注1：如果测定需要37℃，立即进行实验，无需进一步室温孵育。
注2：如果细胞在室温下运行时间较长，可在室温下孵育细胞板1-2小时（建议孵育时间不超过2小时。）

3.3用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

3.4通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来运行钙通量测定。
注意：在实验前进行信号测试非常重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10％至15％的水平。例如，FLIPR-384的最大荧光强度计数为65,000，因此应调整仪器设置以使信号测试强度在7,000到10,000左右。

参考文献

A Long-Acting PYY3–36 Analog Mediates Robust Anorectic Efficacy with Minimal Emesis in Nonhuman Primates
Authors: Shamina M Rangwala, Katharine D’Aquino, Yue-Mei Zhang, Lindsay Bader, Wilson Edwards, Songmao Zheng, Annette Eckardt, Ann Lacombe, Rebecca Pick, Veronica Moreno
Journal: Cell Metabolism (2019)

Oxidative Insults and Mitochondrial DNA Mutation Promote Enhanced Autophagy and Mitophagy Compromising Cell Viability in Pluripotent Cell Model of Mitochondrial Disease
Authors: Dar-Shong Lin, Yu-Wen Huang, Che-Sheng Ho, Pi-Lien Hung, Mei-Hsin Hsu, Tuan-Jen Wang, Tsu-Yen Wu, Tsung-Han Lee, Zo-Darr Huang, Po-Chun Chang
Journal: Cells (2019): 65

Prosocial effects of an oxytocin metabolite, but not synthetic oxytocin receptor agonists, in a mouse model of autism
Authors: Sheryl S Moy, Brian L Teng, Viktoriya D Nikolova, Natallia V Riddick, Catherine D Simpson, Amy Van Deusen, William P Janzen, Maria F Sassano, Cort A Pedersen, Michael B Jarstfer
Journal: Neuropharmacology (2019): 301–311

Human iPS cell-derived cardiac tissue sheets for functional restoration of infarcted porcine hearts
Authors: Masanosuke Ishigami, Hidetoshi Masumoto, Takeshi Ikuno, Takayuki Aoki, Masahide Kawatou, Kenji Minakata, Tadashi Ikeda, Ryuzo Sakata, Jun K Yamashita, Kenji Minatoya
Journal: PloS one (2018): e0201650

Structural characterization of agonist binding to protease-activated receptor 2 through mutagenesis and computational modeling
Authors: Amanda J Kennedy, Flavio Ballante, Johan R Johansson, Graeme Milligan, Linda Sundström, Anneli Nordqvist, Jens Carlsson
Journal: ACS Pharmacology & Translational Science (2018): 119–133

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
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A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
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Screen Quest Calbryte 520 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒

简要概述

Screen Quest Calbryte 520 免丙磺舒和免洗钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的药物发现中的优选方法。 Screen Quest Calbryte-520不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供最强大的均相荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达感兴趣的GPCR的细胞通过钙预先加载我们专有的Calbryte -520NW，其可以穿过细胞膜。 Calbryte -520 NW是最适合HTS筛查的钙指示剂。一旦进入细胞内，Calbryte -520NW的亲脂性阻断基团被非特异性细胞酯酶切割，导致带电荷的荧光染料停留在细胞内，并且在与钙结合后其荧光大大增强。当用筛选化合物刺激细胞时，该受体表明细胞内钙的释放，这极大地增加了Calbryte -520NW的荧光。其优异的细胞保留特性，高灵敏度和100-250倍的荧光增加（当它与钙形成复合物时）使Calbryte -520NW成为测量细胞钙的理想指标.Calbryte -520NW是唯一的钙染料不需要丙磺舒以获得更好的细胞保留。这款Screen Quest Calbryte-520不含Probenecid和Wash-Free的钙测定试剂盒提供了最优化的检测方法，用于监测G蛋白偶联受体（GPCR）和钙通道与脆弱或困难的细胞系。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙检测试剂盒。

产品说明书

分析方案

概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.添加Calbryte 520 NW染料加载溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）

3.在室温或37°C孵育15-30分钟

4.在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光

注意：使用前在室温下解冻所有试剂盒组分

操作方法 

1.将20μL（Cat＃36317）或200μL（Cat＃36318和＃36319）DMSO加入到Calbryte 520 NW（组分A）的小瓶中并充分混合。

注意：20μLCalbryte 520 NW储备溶液足以用于一个平板。 如果管子密封，可以将未使用的Calbryte 520 NW储备溶液等分并在<-20℃下储存超过一个月。

注意：避光，避免反复冻融循环。

2.将9 mL HHBS（组分C，不包括在试剂盒Cat＃36319中）与1 mL 10X Pluronic F127 Plus（10X）（组分B）混合并充分混合。 

实验方案

1.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Calbryte 520NW染料加载溶液加入到细胞板中。

2.将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后将板在室温下再孵育15-30分钟。

注意：如果测定需要37°C，立即进行实验，无需进一步室温孵育。 如果细胞在室温下运行时间较长，可在室温下孵育细胞板1小时（建议孵育时间不超过2小时。）

3.用HHBS或所需缓冲液制备复合板

4.通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来进行钙通量测定。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算ATP样品。我们建议使用在线四参数物流计算器。

图1. CHO-K1细胞中内源性P2Y受体与ATP的荧光信号反应的比较。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/100μL/孔接种过夜，置于96孔黑色壁/透明底板中。 使用Screen Quest Calbryte 520不含Probenecid和WashFree钙测定试剂盒，FLIPR Calcium 4 Assay Kit和Fluo-4 Direct Calcium Assay试剂盒测量钙通量响应。 通过FlexStation 3添加ATP（50μL/孔）以达到最终指示的浓度。

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参考文献

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