PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6215A PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix 50 Rxns ¥1,500
¥1,050
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
Takara 6215B (A × 4) PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix 50 Rxns x 4 ¥5,400
¥3,780
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix

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PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix  
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
 
■ 制品内容 (20 μl 反应×50次量)PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
5×PrimeScript IV cDNA Synthesis Mix*1 200 μl
Random 6 mers (50 μM)*2 100 μl
RNase Free H2O 1 ml × 2
*1:含有PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer
    (含Mg+2)。
*2:不含polyA的 RNA起始cDNA的合成及Real Time PCR用的cDNA的合成,RNA全部区域cDNA的
    均匀合成等情况下添加至反应液中。
 
■ 制品说明
PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix是从total RNA或polyA+ RNA起始合成1st strand cDNA的试剂盒。合成1st strand cDNA所需的反转录酶PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、 Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer已预混成premix型试剂,反应时,只需要添加模板RNA及水即可简单快速开始反应。
本制品通过添加辅助蛋白质改良了Buffer的组成,省去了以往进行反转录反应前的RNA变性操作。此外,PrimeScript IV RTase相比于以往制品,能在更短时间内合成cDNA。
通过提高耐热性使反转录反应可以在高温下进行,在使用Gene Specific Primer合成cDNA的效率和特异性的提升上发挥了重要作用。
本制品合成的1st strand cDNA适用于2nd strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增,全长cDNA文库的制备等需要高品质全长cDNA的应用。另外,通过试剂盒中附带的Random 6 mers,可以从不含有polyA+ 的RNA起始合成cDNA,同时也适用于利用Real Time PCR方法进行基因表达分析的cDNA合成。
 
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■ 关联资料
6215资料: 点击图片下载 PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
 

PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6210A PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥1,372
¥823
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6210B (A × 4) PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥4,937
¥2,962
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

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PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript II RTase (200 U/μl) 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase Free H2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript II RTase从Total RNA或Poly (A)+ RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒。含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。
以结构复杂的RNA或长链RNA为模板进行cDNA合成时,cDNA合成受到抑制的主要原因是RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。并且,由于反转录酶的错配引起的非特异性延伸,对RT-PCR或全长cDNA的合成非常不利。PrimeScript II RTase是对PrimeScript RTase进行进一步改良的反转录酶,本反转录酶可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。
本制品使用了PrimeScript II RTase,利用Oligo dT从PolyA开始进行延伸反应,使用标准反转录温度42℃,不仅能维持PrimeScript RTase原有的卓越的cDNA合成效率和cDNA合成速度,同时可以合成本底低、纯度高、完整性好的cDNA。另外,反转录反应液配制时所产生的非特异性延伸是抑制cDNA合成的主要原因,本制品能有效控制这一现象。反应液配制后,冰上放置直至反转录反应开始,不会发生抑制cDNA合成的现象。
合成的1st Strand cDNA可广泛应用于2nd Strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA合成等。
 
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PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6110A PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥1,261
¥757
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6110B (A × 4) PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥4,546
¥2,728
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

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PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)
PrimeScript RTase (200 U/ μl) 50 μl
5X PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase free dH2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript RTase从Total RNA或PolyA+RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒,含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。 PrimeScript Reverse Transcriptase是一种MMLV (Moloney Murine Leukemia virus) 由来的新型反转录酶。本酶能够有效合成长达12 kb的1st Strand cDNA,即使对富含GC的片段或者具有复杂二级结构的RNA,在常规的反转录温度42℃条件下也能得到良好的反转录效果,无需进行高温反转录反应 (高温反转录反应会导致RNA的降解)。合成的1st Strand cDNA 可广泛应用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列
       Random 6 mers        pd(N)6
       Oligo dT Primer        Takara特别开发的dT区域的序列*
* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0 (Code No. RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同,不含有M13 Primer M4的序列。
 
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PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6111A PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ¥1,582 PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
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■ 制品内容 (10 次量)
PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl
Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl
5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl
E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl
E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl
5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl
T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl
RNase free dH2O 600 μl × 2
Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl
 
*【Control RNA】
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中,如果确实为全长的cDNA,那这种质粒便可获得四环素抗性。
 
■ 制品说明
以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆,是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。
一般来说,cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是:在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后,将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组,再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA,然后再对cDNA进行解析,或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。
本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。
本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的,其原理见图1、图2,简要说明如下:
1. 在PrimeScript RTase的作用下,利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。
2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下,RNA链被DNA链置换,合成cDNA的第二条链。
3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。
 
■ cDNA合成原理图
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成
 
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图2 使用Random Primer时的cDNA合成
 
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-20℃。
 
■ Troubleshooting
如果实验不能正常进行,请按照说明书内容确认实验操作,检验以下几点:
1. Control RNA的使用
本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验,并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。
2. mRNA的纯度检测
为了能够获得更高的cDNA合成效率,尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前,可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8~2.1是理想值) ,或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。
3. RNase的污染
实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。
 
 

PrimeScript™ II Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript II Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2690S PrimeScript II Reverse Transcriptase 2,000 U ¥300 PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690A PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,282
¥769
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690B (A × 4) PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ¥4,617
¥2,770
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690C (A × 10) PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ¥10,895
¥6,537
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase

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Primescript – 修饰性PEG

 
 
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2690A)
PrimeScript II Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript II Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript II Reverse Transcriptase在42℃条件下能够有效地合成低背景、高质量的cDNA,无需进行高温反转录反应,高温的反转录反应会导致RNA的降解,且由于引物的有效使用和辅助蛋白质的添加,避免了因RNA二级结构对cDNA合成的抑制及RT引物错配引起的非特异性延伸。辅助蛋白质完全抑制了由于反转录酶冰上放置引起的非特异性延伸反应,因此,即便是反应液配制到反转录反应开始要间隔一段时间,也不会抑制长链cDNA的合成。合成的cDNA可以广泛应用于2nd-strand合成、杂交、终点PCR和定量PCR,而且本酶特别适用于全长cDNA文库构建用的高质量cDNA合成等。
 
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-20℃。
 
起源
Purified from an E. coli strain expressing a recombinant enzyme.
 
活性定义
以poly (rA) ·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1st-Strand cDNA的合成。
·cDNA Probe的制备。
·RT-PCR。
 
 

PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2680Q PrimeScript Reverse Transcriptase 2,000 U ¥271 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680A PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,162 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680B (A × 4) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ¥4,165 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680C (A × 10) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ¥9,833 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
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Primescript – 修饰性PEG

 
 
PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
PrimeScript™ Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2680A)
PrimeScript Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力,能够有效地合成1st-strand cDNA,即使对有复杂二级结构的RNA,在42℃条件下也能得到良好的反应效果,无需进行高温反转录反应,高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。
 
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-20℃。
 
起源
E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.
 
活性定义
以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1. 1st-Strand cDNA的合成。
2. cDNA Probe的制备。
3. RT-PCR。
 
 

PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR047Q PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 10 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047A PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

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Primescript – 修饰性PEG

 
 
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR047A: 20 μl反应×100次量)
1. gDNA Eraser 100 μl
2. 5X gDNA Eraser Buffer*1
200 μl
3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
4. 5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)*3 400 μl
5. RT Primer Mix*4 400 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml×2
7. EASY Dilution (for Real Time PCR)*5 1 ml
 
*1 5X gDNA Eraser Buffer在反转录反应前使用,请务必进行基因组DNA的除去反应。
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 含有dNTP Mixture。
*4 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*5 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code No. 9160/9160Q) 也可以单独购买。
注意:EASY Dilution (for Real Time PCR) 请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
为了准确地进行基因表达量分析,必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件,但Total RNA中常常混有基因组DNA,并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增,因此会造成解析结果不准确。为了避免这种情况发生,通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上,使基因组DNA得不到扩增。但是,此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因,同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。在这种情况下,我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理,以除去残存的基因组DNA。而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作,同时会造成RNA的降解和损失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser,通过42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分,经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA,因此,20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。
使用本制品合成的cDNA适用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的,选择与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 组合使用。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
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■ 试剂盒特长
1. 含有去除基因组DNA的gDNA Eraser,只需2 min即可除去基因组DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反应用模板cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 反转录引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,可以均匀合成样品中的各种cDNA。
4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法区别如下:
(1) 反转录反应中RT Primer Mix的用量。
(2) 反转录反应中总RNA的用量。
5. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1.使用本制品合成的cDNA与TB Green关联制品组合使用时,建议使用:
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
以上制品与本制品组合使用,可以得到可信度高的结果。
本制品与TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 组合使用时,有时反应性能不好,不推荐使用。
2. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)在使用前需Vortex振荡混匀,轻轻离心后使用。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR036Q PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036A PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036B (A × 4) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR036A: 10 μl反应×200次量) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
5X PrimeScript RT Master Mix (for Real Time)*1 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml ×2 支
EASY Dilution (for Real Time PCR)*2 1 ml
 
*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer (含有Mg2+) 。
*2 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买 (Code No.: 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase,与制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量试剂配合使用,能够进行高性能的基因表达分析。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 制品为预先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以开始反应。
2. 可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2种反转录引物,可以合成适合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5X PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
2. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
3. 本制品中已经加入了反转录Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应,则不能使用本制品。
 
 
Technote:
  An efficient method for quantification of human gene expression
  levels using PrimeScript reverse transcriptase
   
 
  Monitoring siRNA knockdown: Quantifying transient knockdown of
  LEDGF/p75 in docetaxel-resistant prostate cancer PC-3-DR cells
 

PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR037Q PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037A PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Primescript – 修饰性PEG

 
 
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR037A)
5X PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 400 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 100 μl
Random 6 mers (100 μM) 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 1 ml
 
*1 含有dNTP Mixture 和 Mg2+
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 用于制作标准曲线时梯度稀释total RNA和cDNA。EASY Dilution (for Real Time PCR) 可以将其稀释至很低浓度也能够得到准确地稀释。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买(Code No. 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA。操作简单,适合进行高通量分析。进行2 Step Real Time RT-PCR反应时,与TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* , TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)* 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 试剂配合使用,能进行高性能的基因表达分析。 本制品提供了TB Green分析法和探针分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒特长
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同时使用。只扩增一种目的基因时,也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
3. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
    注意:以下是TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法进行反转录实验的区别
    ① 用于反转录实验RT Primer Mix添加量。
    ② 用于反转录实验total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 用PrimeScript RT Enzyme Mix I 时使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失。
3. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 
Technote:
  Fast reverse transcription from mouse blood samples using
  PrimeScript Reverse Transcriptase
   
 
  Fast synthesis of cDNA templates for real-time RT-PCR
 

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (or with UNG)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR600A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns ¥2,878
¥1,439
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR600B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns × 5 ¥13,670
¥6,835
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns ¥3,118
¥1,559
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns × 5 ¥14,810
¥7,405
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Primescript – 修饰性PEG

 
 
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
 
 
· 完全premix型、操作简单、probe法One Step RT-qPCR。
· 卓越的抗反应阻碍物能力、粗提样品可以使用本产品
· 新增UNG版本,可防止假阳性产生
 
■ 制品内容
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(2×)
625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG(2×) 625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR仪器等,需要进行孔与孔之间的荧光信号校正时添加该试剂。
 
◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
Thermal Cycler Dice Real Time System系列
LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
 
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行1 Step Real Time RT-PCR的专用premix试剂。本制品将反转录酶和PCR酶及反应用buffer预先配制成premix形式,由于RT-PCR反应在单个反应管中连续进行,因而,操作更简便,同时降低了污染的风险。反转录酶采用了耐热性高的PrimeScript III RTase,且即使在反应阻害物存在的情况下也能够有效合成cDNA。此外,使用该试剂,也可以实现多个反应同时进行的多重qPCR。为防止PCR反应时的【carryover contamination】,可以使用添加有UNG的One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG (Code No. RR601A/B)。通过使用该制品,能够更简便、准确地实现RNA/DNA病毒的快速检出及mRNA的表达分析。
 
本制品适用于Takara公司Thermal Cycler Dice Real Time System仪器,已确认以下Real Time PCR仪器都适用。
· Thermal Cycler Dice Real Time System III(Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
· Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
· LightCycler 96 System(Roche Diagnostics)
· CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad)等
 
注:采用嵌合荧光法(TB Green)进行1 Step Real Time RT-PCR时,
请使用:One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR096A)
或:One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A)
 
■ 特点
1. 通过One Step RT-qPCR可快速且准确地进行RNA病毒等的分析
2. 由于本制品对各种反应阻害物有很高的耐受性,多数情况下简易提取的粗提RNA起始也能够检出。但是,需要注意的是如果出现不能检出的情况或需要更高准确度及更稳定的分析结果时,需要使用纯度更高的RNA样品。培养细胞及组织样品起始的高纯度total RNA的制备推荐以下kit:TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit(Code No. 9767)、RNAiso Plus(Code No. 9108/9109)、TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0(Code No. 9766)等