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■ 制品内容 (Code No.: RR250A : RT反应50次量、GⅠ反应50次量*1、GⅡ反应50次量*1) |
5×PrimeScript Buffer (NV)*2、*3 |
200 μl |
PrimeScript RT Enzyme Mix (NV)*2、*4 |
50 μl |
Random 6 mers (100 μM)*2 |
50 μl |
Premix Ex Taq (NV) (2×conc.)*5 |
625 μl × 2 |
GⅠPrimer Mix*6 |
50 μl |
GⅡ Primer Mix*6 |
50 μl |
GⅠProbe Mix*7 |
50 μl |
GⅡ Probe Mix*7 |
50 μl |
ROX Reference Dye (50×conc.)*8 |
50 μl |
ROX Reference Dye II (50×conc.)*8 |
50 μl |
RNase Free dH2O |
1 ml |
GⅠPositive Control DNA*9(4×106 Copies/μl) |
20 μl |
GⅡ Positive Control DNA*9(4×106 Copies/μl) |
20 μl |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*10 |
700 μl |
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*1 本制品以8个浓度梯度 (n=3) 的标准曲线,检测样品、阳性对照 (n=2) 进行检测时,可对12个检测样品进行检测。 *2 反转录反应用试剂。 *3 含有dNTP Mixture及Mg2+。 *4 含有RNase Inhibitor。 *5 含有TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, and Mg2+。 *6 碱基序列采用公定法中记载的碱基序列。 *7 含有荧光标记探针,应避光保存。 *8 用于Thermo Fisher Scientific的Real Time PCR扩增仪,用以校正孔与孔之间的荧光信号误差。 ◆ 使用ROX Reference Dye的PCR仪 ·Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific) ◆ 使用ROX Reference Dye II的PCR仪 ·Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific) ◆ 不使用ROX Reference Dye或ROX Reference Dye II的PCR仪 ·Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960:终卖) *9 用于制作标准曲线的标准品。阳性对照是质粒DNA,不需要进行反转录反应。使用方法可与公定法中GI、GII阳性质粒DNA的使用方法相同。 注意:反复冻融会影响PCR反应的定量。 *10 Positive Control DNA梯度稀释时使用的稀释液。 |
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■ 制品说明 |
本制品是使用GI 和GII 检测用引物与探针进行Real Time PCR 检测诺如病毒的试剂盒。制品中使用的引物和探针碱基序列与日本厚生劳动省 医药食品局 食品安全部 监视安全科下达的通知[有关诺如病毒检测方法](食安监发第1105001 号)(最终修订:2013 年10 月22 日食安监发1022 第1 号)(以下简称公定法)中记载的碱基序列相同。 利用荧光物质的Real Time PCR 检测方法因其简便性、快速性、高特异性,近年来用于食品中包括诺如病毒等各种病原体的检测。 制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是含抗Taq抗体的Hot Strat 型DNA 聚合酶,与适宜Buffer组合使用,可以在短时间内进行高效扩增、高灵敏度的检出,并能有效防止在热循环前由引物错配或引物二聚体产生的非特异性扩增。本制品适用于反应时间短的快速PCR,在宽广的动态范围内可准确对检测样品基因进行检出和定量,同时还可以进行重复性好、可信度高的Real Time PCR 解析。 |
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■ 保存 |
-20℃保存 Premix Ex Taq (NV) (2×conc.) 融解后4℃保存,6个月内性能稳定。 长期保存时,可-20℃保存。 制品开封后,为避免Positive Control DNA污染其它试剂,请将其分开保存。 |
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