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镍离子树脂-磁性 | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Clontech | 635693 | His60 Ni Magnetic Beads | 1 mL | ¥1,429 | ||
Clontech | 635692 | His60 Ni Magnetic Beads | 10 ml | ¥6,411 |
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■ 产品简介 | |||||||
该产品结合了His60 Ni Superflow Resin产品优势与磁珠分离方法的优势。当样品放置在磁珠分离器中时,磁珠中有磁性的微粒可以帮助我们快速方便地分离微小差异的蛋白。该产品属于改良型的Ni-IDA树脂,相比于其他Ni-NTA或者Ni-IDA树脂而言,容量高、金属离子泄漏少,纯度高。 | |||||||
■ 产品特点 | |||||||
·简便快速地纯化His标签蛋白 ·采用改良型的His60 Ni 树脂,获得的纯度相对更高 ·溶出的样品是小体积应用的理想选择 |
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■ 实验例 | |||||||
以上是在非变性条件下,使用His60 Ni磁珠从细胞裂解液中纯化带His标签的AcGFP1蛋白的实验例。首先向His60 Ni磁珠中添加400 μl在大肠杆菌中表达的AcGFP1-6xHis蛋白的澄清的裂解液,孵育30分钟。使用500 μl的清洗buffer清洗磁珠3次,之后使用100 μl的洗脱buffer(来自于His60 Ni Buffer Set,Code:635665)洗脱4次。 使用12%的SDS-PAGE进行电泳分析,每孔10 μl上样。 M:彩色宽范的蛋白ladder 1:起始样品 2: 流穿液 3:清洗样品① 4:清洗样品② 5:清洗样品③ 6:洗脱样品① 7:洗脱样品② 8:洗脱样品③ 9:洗脱样品④ |
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以上是在变性条件下,使用His60 Ni磁珠从细胞裂解液中纯化带His标签的AcGFP1 蛋白的实验例。首先向His60 Ni磁珠中添加500 μl在大肠杆菌中表达的AcGFP1-6xHis蛋白的澄清的裂解液,孵育30分钟。使用500 μl的平衡化buffer清洗磁珠3次,500 μl 1X的清洗buffer清洗1次,之后使用50 μl的洗脱buffer(来自于His60 Ni Buffer Set,Code:635665)洗脱3次。8M尿素已添加到以上所有的buffer当中。 使用4-20%的SDS-PAGE进行电泳分析,每孔10 μl上样。 M:彩色宽范的蛋白ladder 1:起始样品 2:流穿液 3:清洗样品① 4:清洗样品② 5:清洗样品③ 6:清洗样品④ 7:洗脱样品① 8:洗脱样品② 9:洗脱样品③ |
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