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Klenow 片段（3’→5’exo-） 货 号 #M0212L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

Klenow 片段（3’→5’exo-）                              收藏

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货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M0212L
1,000 units
2,699.00
有
有
有
有
无

#M0212M
高浓度（10X）1,000 units
2,699.00
有
有
有
无
有

#M0212S
200 units
679.00
有
有
有
有
有

#M0212V
100 units
359.00
有
有
有
有
无

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特性

 用随机引物制备探针
 随机引物法标记

 cDNA 第二条链的合成 

概述

Klenow 片段（3´→5´ exo–）是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物，它保留了 DNA 聚合酶活性，但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变（D355A，E357A）去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性（1）。 

来源

重组 E. coli 菌株，其携带的质粒上含有 E.coli polA (D355A，E357A)基因的片段，片段起始位置在密码子 324 处。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

Klenow 片段（3´→5´ exo–）因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性，故不适用于生成平末端的反应。 

参考文献

 

Klenow Fragment酶试剂盒Takara Clontech

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上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Klenow Fragment
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2140A Klenow Fragment (Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) 200 U ￥220 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140B (A × 5) Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I） 200 U × 5 ￥1,005 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140AK Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl） 200 U ￥171 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
Takara 2140BK (AK × 5) Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl） 200 U × 5 ￥771 Klenow Fragment Klenow Fragment Klenow Fragment
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■ 制品内容
Code No.: 2140A
Klenow Fragment (5 U/μl) 200 U
10X Klenow Fragment Buffer 1 ml
 
Code No.: 2140AK Klenow Fragment
Klenow Fragment (2 U/μl) 200 U
 
■ 制品说明
本酶在DNA模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物dNTP沿5’→3’方向合成与模板互补的DNA。本酶是从大肠杆菌中纯化得到，其中克隆了2/3的E.coli DNA polymerase I基因片段 (3’端计算) 。因此具有3’→5’外切酶活性但是没有5’→3’外切酶活性。2140AK/BK制品是Kilo-Sequencing Deletion Kit（Code No.: 6030）的组份之一。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 用途
1. 双脱氧法DNA序列测定 (Sanger法)。
2. 双链DNA 5’突出末端的平滑化。
3. 寡核苷酸定向诱变 (Oligonucleotide directed mutagenesis) 中双链DNA的合成。
4. 使用随机引物进行DNA标记。
 
■ 使用注意
1. 本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2. 由于不含有5’→3’的外切核酸酶活性，因此不表现切口平移活性。适合双链DNA末端以及缺口 (Gap) 的修复。
3. 与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
4. 由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用 (Aggregation) 从而抑制反应进行。
5. 若用于5’突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
6. 与E.coli DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物抑制。