细菌肝素酶 II                              收藏

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酪氨酸激酶 II（CK2）                              收藏

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概述

可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用，蛋白磷酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长，确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的氨基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法，这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。

 

由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构，这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构，因此把问题简单化了（见综述 1），没有考虑到二级及三级结构，也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素，此外，在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响，因此，使用这些序列时应该慎重。

 

另一方面，这些共有序列已经被证实是识别的关键序列，简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽，除了能预测磷酸化位点以外，往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。

 

下表列出了 NEB 提供的蛋白激酶特异性序列，磷酸基接受位点用红色标出，可以进行功能替换的氨基酸用斜杠（/）标出，对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。

 

蛋白去糖基化混合液II                              收藏

特性

概述

蛋白去糖基化混合液 II 中包含五种糖苷酶、试剂和对照，能切割所有 N-连接糖链及简单 O-连接糖链，也能切割部分复杂 O-连接糖链。试剂盒中的酶能用于 20 次反应，作用于 2 mg 糖蛋白。

 

 

小牛胎球蛋白在酶作用下去糖基化，非变性条件使用 10X 去糖基化混合液 1，变性条件使用 10X 去糖基化混合液 2。20 μg 反应产物上样于 10-20% Tris-glycineSDS-PAGE 胶上。泳道 1：彩色预染蛋白标准（11-245kDa）（NEB #P7712）；泳道 2：20 μg 未去糖基化的胎球蛋白对照；泳道 3：20 μg 胎球蛋白使用去糖基化混合液 1 在非变性条件下去糖基化；泳道 4：20 μg胎球蛋白使用去糖基化混合液 2 在变性条件下去糖基化；泳道 5：5 μl 蛋白去糖基化酶混合液 II。

随酶提供的试剂

去糖基化酶混合液II

参考文献

蛋白去糖基化混合液II                              收藏

特性

概述

蛋白去糖基化混合液 II 中包含五种糖苷酶、试剂和对照，能切割所有 N-连接糖链及简单 O-连接糖链，也能切割部分复杂 O-连接糖链。试剂盒中的酶能用于 20 次反应，作用于 2 mg 糖蛋白。

 

 

小牛胎球蛋白在酶作用下去糖基化，非变性条件使用 10X 去糖基化混合液 1，变性条件使用 10X 去糖基化混合液 2。20 μg 反应产物上样于 10-20% Tris-glycineSDS-PAGE 胶上。泳道 1：彩色预染蛋白标准（11-245kDa）（NEB #P7712）；泳道 2：20 μg 未去糖基化的胎球蛋白对照；泳道 3：20 μg 胎球蛋白使用去糖基化混合液 1 在非变性条件下去糖基化；泳道 4：20 μg胎球蛋白使用去糖基化混合液 2 在变性条件下去糖基化；泳道 5：5 μl 蛋白去糖基化酶混合液 II。

随酶提供的试剂

去糖基化酶混合液II

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