Taq DNA 连接酶 货 号 #M0208L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

Taq DNA 连接酶                              收藏

Taq DNA 连接酶                货   号                  #M0208L Taq DNA 连接酶                货   号                  #M0208L Taq DNA 连接酶                货   号                  #M0208L Taq DNA 连接酶                货   号                  #M0208L

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#M0208L
10,000 units
3,549.00

#M0208S
2,000 units
889.00

#M0208V
1,000 units
469.00

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特性

 耐热性好
 dsDNA 切刻修复
 用于 Gibson 组装方法 
 可用连接酶链式反应和连接酶检测反应对等位基因进行特异性检测

概述

相邻 DNA 链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 37-75℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性。

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,含有自 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因。 

反应条件

1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100],45℃ 温育。 

该酶需 NAD+ 作辅因子,在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD+为了延长 NAD+ 的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。

质保声明

Taq DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义(粘性末端活性单位)

1 单位指 50 μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

Taq DNA 连接酶可以有效连接 12 bp 的互补片段,但却无法连接 4 bp 的互补片段(典型限制酶消化产物)。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1) 货 号 #M0230L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                              收藏

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

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#M0230L
250 units
5,499.00

#M0230S
50 units
1,379.00

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识别位点

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

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停产通知

 停产通知:该产品于2021年12月15日停产。

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。 

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。 

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5% 甘油],加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。热失活:65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸(SAM)

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。 

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中,37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚 dI.dC 底物上所需要的酶量。 

浓度

2,000 units/ml 

注意事项

议选用 M.Sssl(NEB #M0226)修饰和保护DNA,因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物 DNA 进行甲基化。 

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请联系我们。 www.neb-china.com,www.neb.com。 

9°N™ DNA 连接酶 货 号 #M0238S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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9°N™ DNA 连接酶                              收藏

9°N™ DNA 连接酶                货   号                  #M0238S 9°N™ DNA 连接酶                货   号                  #M0238S 9°N™ DNA 连接酶                货   号                  #M0238S 9°N™ DNA 连接酶                货   号                  #M0238S

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#M0238S
2,500 units
909.00

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特性

 可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点
 耐热性好
 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测

概述

9°N™ DNA 连接酶耐热性好,能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。9°N™DNA 连接酶以 ATP 为辅因子。该酶在 45-70℃ 范围内均有活性。 

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,其携带有从极度耐热的海底超嗜热古菌(Thermococcus sp.)9°N 菌株中克隆的连接酶基因。 

反应条件

1X 9°N DNA 连接酶反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl,600 μM ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM DTT,0.1% Triton X-100(pH 7.5 @ 25℃)],45℃ 温育。 

质保声明

9°N DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.neb.com 或www.neb-china.com。 

单位定义(粘性末端活性单位)

1 单位指 50 μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切刻封闭单位。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段,但却无法连接 4 bp 的互补片段(典型限制酶消化产物)。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg) 货 号 #M0240L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                              收藏

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                 货   号                  #M0240L 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                 货   号                  #M0240L 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                 货   号                  #M0240L 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                 货   号                  #M0240L 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(Fpg)                 货   号                  #M0240L

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#M0240L
2,500 units
3,779.00

#M0240S
500 units
939.00

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特性

 单细胞凝胶电泳(彗星试验)
 碱性析出
 碱解旋 

概述

Fpg(甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶)也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶,既有 N-端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3´ 或 5´ 端,因此可以除去 AP 位点,产生一个具有 3´ 和 5´ 磷酸的碱基缺口。
被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括:7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤)、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。 

来源

克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 1
[10 mM Bis Tris 丙烷-HCl,10 mM MgCl2 ,1mM DTT(pH 7.0 @ 25℃)] 加入 100 μg/ml BSA,37℃ 温育。
热失活:60℃ 加热 10 分钟。

质保声明

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情登陆  

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃条件下, 1 小时内能够切割 10 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。  

彗星试验的推荐稀释倍数

1:103~1:104。详细步骤见  

浓度

8,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG) 货 号 #M0280L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                              收藏

尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                 货   号                  #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                 货   号                  #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                 货   号                  #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                 货   号                  #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)                 货   号                  #M0280L

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#M0280L
5,000 units
3,179.00

#M0280S
1,000 units
789.00

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相关产品

尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
 

特性

 去除 PCR 残存污染
 去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基
 

概述

E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。 

来源

克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。 

应用

在 37℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。 

反应条件

1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1 mM DTT(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 

质保声明

尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA(104~105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。单位活性检测条件请联系我们。  

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

UDG 在较广的 pH 范围均内有活性,最适 pH 为 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(> 200 mM)所抑制。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG) 货 号 #M0313S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                              收藏

人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                 货   号                  #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                 货   号                  #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                 货   号                  #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                 货   号                  #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)                 货   号                  #M0313S

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#M0313S
500 units
889.00

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特性

 单细胞凝胶电泳(彗星试验)
 碱洗脱
 碱解旋 

概述

人类烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶(hAAG)作用于烷基化和氧化了的 DNA 损伤位点,包括 3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙烯基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG 催化 N-糖苷键的水解断裂,释放受损碱基。hAAG 也被称作甲基嘌呤 DNA 糖基化酶(MPG)或 3-甲基腺嘌呤-DNA 糖基化酶(ANPG)。 

来源

克隆有截短型人类 AAG 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,20 mM Tris-HCl,2 mM MgS04,0.1% Triton X-100(pH 8.8 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

人类烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 1 pmol 含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的 34 mer 寡核苷酸双链产生一个 AP 位点所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

T3 DNA 连接酶 货 号 #M0317L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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T3 DNA 连接酶                              收藏

T3 DNA 连接酶                 货   号                  #M0317L T3 DNA 连接酶                 货   号                  #M0317L T3 DNA 连接酶                 货   号                  #M0317L T3 DNA 连接酶                 货   号                  #M0317L T3 DNA 连接酶                 货   号                  #M0317L

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#M0317L
750,000 units
3,469.00

#M0317S
100,000 units
859.00

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特性

 连接粘性末端或平末端
 高盐耐受力
 dsDNA 切刻修复 

概述

T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶,可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍,因此,当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时,就多了一个选择。 

来源

重组 E. coli 质粒,含有 T3 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液
[66 mM Tris-HCl,1 mM ATP,10 mM MgCl2,1 mM DTT,7.5% PEG 6000(pH 7.6 @ 25℃)],25℃ 温育。 

质保声明

T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中,1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下,25℃ 温育 1 分钟,能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时,可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液,但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验,建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。
65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG,该酶不能加热失活,否则会抑制后续转化实验。 

参考文献

T7 DNA 连接酶 货 号 #M0318L-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

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T7 DNA 连接酶                              收藏

T7 DNA 连接酶                 货   号                  #M0318L T7 DNA 连接酶                 货   号                  #M0318L T7 DNA 连接酶                 货   号                  #M0318L T7 DNA 连接酶                 货   号                  #M0318L T7 DNA 连接酶                 货   号                  #M0318L

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成都库存
苏州库存

#M0318L
750,000 units
3,319.00

#M0318S
100,000 units
829.00

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特性

 仅用于连接粘性末端
 dsDNA 切刻修复 

概述

T7 DNA 连接酶来源于 T7 噬菌体,它是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶,该酶可催化双链 DNA 相邻 5´ 磷酸末端和 3´ 羟基基团之间形成磷酸二酯键。T7 DNA 连接酶可以有效地催化粘性末端和切刻的连接。与 T4 和 T3 DNA 连接酶不同,T7 DNA 连接酶不能有效地催化平末端连接。因此,在实验过程中,当平末端和粘性末端同时存在时,仅需粘性末端发生连接,T7 DNA 连接酶是理想的选择。 

来源

重组 E. coli 质粒,含有 T7 DNA 连接酶编码基因。 

反应条件

 1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液

[66 mM Tris-HCl,1 mM ATP,10 mM MgCl2,1 mM DTT,7.5% PEG 6000 (pH 7.6 @ 25℃)],25℃ 温育。

质保声明

T7 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 20 μl 总反应体系中,1 X T7 DNA 连接酶反应缓冲液条件下,25℃ 温育 30 分钟,能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 片段连接所需的酶量。 

浓度

3,000,000 units/ml。 

注意事项

ATP 是必需的辅助因子。
当某些实验不能用 PEG 6000 时,可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液,但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。
65℃ 加热 10 分钟可使 T7 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG,该酶不能加热失活,否则会抑制后续转化实验。 

参考文献

Clontech 631962 EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit 20 Rxns酶试剂盒

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甲基化DNA富集
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631962 EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit 20 Rxns ¥5,089 Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns
Clontech 631963 EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit 10 Rxns ¥2,578 Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns
Clontech 631964 Magnetic Stand 2 x 1.5 ml ¥624 Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns Clontech                      631962           EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit            20 Rxns
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Dna – 修饰性PEG – Page 7

 
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631962   EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit
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Takara 6137 DNA Fragmentation Kit 20 Rxns酶试剂盒

上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

DNA Fragmentation Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6137 DNA Fragmentation Kit 20 Rxns ¥1,502 Takara                      6137           DNA Fragmentation Kit            20 Rxns Takara                      6137           DNA Fragmentation Kit            20 Rxns Takara                      6137           DNA Fragmentation Kit            20 Rxns
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■ 制品内容 (20 次量)Takara                      6137           DNA Fragmentation Kit            20 Rxns
1. Enzyme-1 20 μl
2. Dilution Buffer-1 1,040 μl
3. A solution 20 μl
4. B solution 50 μl
5. Stop solution 400 μl
6. 150 mM MgCl2 40 μl
7. Dilution Buffer-2 200 μl
8. Enzyme-2 20 μl
9. 0.5 M EDTA 50 μl
10.dH2O 1 ml×10 支
 
■ 制品说明
本制品是不需使用超声波破碎仪等特殊仪器、在酶的作用下对基因组DNA等长链DNA随机片段化、并对DNA片段进行末端平滑化处理的试剂盒。使用本试剂盒处理的DNA片段可直接与平滑末端载体进行连接。如不需要进行末端平滑化处理,可以在DNA片段化反应后终止反应。本制品还适用于甲基化DNA的浓缩和快速DNA序列分析的预处理。
 
■ 保存
-20℃。注意:组份3、4、6、9、10可于4℃存放。
 
■ 注意事项
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前请一定认真阅读。
1. 使用的试剂要在冰上放置,混合液的配制也须在冰上操作,避免反应管内温度上升。
2. 使用的DNA必须是经RNaseA、酚/氯仿等精制的高纯度DNA。如有RNA污染,不能正确判断片段化DNA的分布。可使用NucleoSpin®Tissue (Code No. 740901.50) 或NucleoSpin Blood (Code No. 740951.50) 等试剂盒制备基因组DNA。
3. 使用的DNA溶液中所含EDTA的浓度不要超过1 mM。