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Takara 3019 λ DNA (dam-, dcm-) 400 μg酶试剂盒

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λ DNA (dam–, dcm–)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 3019 λ DNA (dam–, dcm–) 400 μg ￥171 Takara 3019 λ DNA (dam-, dcm-) 400 μg Takara 3019 λ DNA (dam-, dcm-) 400 μg Takara 3019 λ DNA (dam-, dcm-) 400 μg
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□ 浓度 300-500 μg/ml
□ 包装量 400 μg
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Bacteriophage λcI857 Sam7 (from a heat-inducible E. coli (dam–, dcm–) lambda lysogen)
 
■ 链长
48,502 bp
 
■ 纯 度
1) OD260 nm/OD280 nm＞1.8。
2) 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 在Mbo I 酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 用Mbo I 酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现十余条清晰的DNA电泳带。
 

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶

dam 甲基转移酶                              收藏

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M0222L
2,500 units
3,589.00
无
无
无
无
无

#M0222S
500 units
889.00
有
有
有
无
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识别位点

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L

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概述

dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 pTP166 载体，该载体含有从 E. coli（M. Marinus）克隆的 dam 修饰基因。 

反应条件

1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

8,000 units/ml。 

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞 货 号 #C2925H-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#C2925H
20 x 0.05 ml
4,119.00
无
无
无
无
无

#C2925I
6 x 0.2 ml
3,169.00
无
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相关产品

 
 

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939

优点

 适用于培养无 Dam 和 Dcm 甲基化的质粒
 无动物来源产品

概述

甲基转移酶缺失的 E. coli 感受态细胞，适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的生长。

基因型

ara-14 leuB6 fhuA31 lacY1 tsx78 glnV44 galK2 galT22 mcrA dcm-6 hisG4 rfbD1 R(zgb210::Tn10) Tet S  endA1 rspL136 (Str R) dam13::Tn9 (CamR) xylA-5 mtl-1 thi-1 mcrB1 hsdR2

特性

• 适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的培养
• 缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒

转化效率

1–3 x 106 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA31）、氯霉素、呋喃妥因、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9129 E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10 ￥407 E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
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■ 制品内容E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Ttryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×106 cfu/μg。
E.coli HST04 dam–/dcm–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA+菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST04 dam–/dcm–： F–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。