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BCECF, AM ester（pH荧光探针） 货号: B3006 规格: 1 mg

发表于由

BCECF, AM ester（pH荧光探针）

产品货号: B3006

产品规格: 1 mg

目录价（元）:1350

推荐仪器：荧光显微镜

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产品概述：
产品参数
外观：可溶于DMSO或DMF的白色固体
Ex/Em：505/520 nm
CAS号：117464-70-7
分子式：混合物（C30H20O11, C35H28O15, C40H36O19）
分子量：平均分子量 688.6

分子结构图：

BCECF, AM ester（pH荧光探针） 货号: B3006 规格: 1 mg

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
BCECF, AM是一种可以穿透细胞膜检测细胞内pH的荧光染料。BCECF, AM没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值条件下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503 nm左右，最大发射波长在520 nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为488 nm，发射波长为535 nm。
BCECF, AM 不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的体内 pH 水平检测。此外，在细胞内有 pH 变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中 BCECF, AM 也被广泛应用。

注意事项
1. BCECF, AM可能对人体有害，请注意适当防护。
2. BCECF, AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书：

BCECF, AM ester（pH荧光探针） 货号: B3006 规格: 1 mg B3006    
使用本产品的文献：

参考文献
1.1,25-dihydroxyvitamin D3 inhibits Na(+)-H+ exchange by stimulating membrane phosphoinositide turnover and increasing cytosolic calcium in CaCo-2 cells
应用方向：细胞PH检测

2.Intracellular pH determination of pristinamycin-producing Streptomyces pristinaespiralis by image analysis.
应用方向：细菌PH检测

Calcein AM（钙黄绿素 AM） 货号: C4041 规格: 1 mg

发表于由

Calcein AM（钙黄绿素 AM）

产品货号: C4041

产品规格: 1 mg

目录价（元）:1500

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪

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产品概述：
产品参数
外观：可溶于DMSO 的灰白色固体
CAS号：148504-34-1
Ex/Em：494/517 nm (pH =8)
分子式：C46H46N2O23
分子量：994.9
分子结构图：
Calcein AM（钙黄绿素 AM） 货号: C4041 规格: 1 mg

储存条件
-20℃ 避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Calcein AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它可以穿透细胞膜进入细胞，被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF, AM 和 CFDA）相比，Calcein AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。Calcein AM 仅对活细胞染色。可与 PI 联用，用于区别活细胞和死细胞。由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议根据实际情况确定 Calcein AM 的最适浓度。

注意事项
1. Calcein AM 的酯键遇到湿气会分解，使用后请在 -20℃ 下密闭冷冻保存，防止水分进入。
2. Calcein AM 储备液稀释后请及时使用，尽量现配现用。
说明书：

Calcein AM（钙黄绿素 AM） 货号: C4041 规格: 1 mg C4041    
MSDS：
MSDS C4041 Calcein AM
常见问题解答：

◆细胞追踪有很多产品，该如何选择？
首先确定追踪细胞的时间，然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料（C4041）标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳，但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料，如DiI（D4010），DIO（D4007），DiA(D4059)，DiD(D4019)，DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间，但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外，它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料（C4060）更有利于长期标记，其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE（C4070）也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中，细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性（主动外排，膜和蛋白质的周转率等）。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间

◆用Calcein，AM标记了细胞，但是第二天成像时，没有来自Calcein的荧光，为什么？

Calcein，AM是细胞追踪和普通细胞质染色的良好选择，然而，它不与任何东西结合，可能会在几个小时内被主动抽出细胞，钙黄绿素在活细胞内的保留取决于细胞类型和培养条件的固有特性
对于长期成像，您可能希望考虑反应性细胞质染色，如CFDA，SE染料

◆我想在活细胞中加入一种染料，使其在高浓度下自猝灭，但如果细胞死亡，染料将被释放并取消猝灭。有这样的吗？
可以的，这通常是通过钙黄绿素AM或FDA（荧光素二乙酸酯）完成的。这些染料在被酯酶分解之前不会发出荧光。经酯酶修饰后，在非常高的浓度下，它们会自我猝灭。一旦质膜破裂或细胞死亡，染料将被释放到细胞外介质中，并变得不猝灭。必须优化浓度和培养时间，以获得足够的淬火效果

◆当我用钙黄绿素 AM对细胞进行染色时，细胞经过固定处理后信号就消失了，为什么？
Calcein AM扩散到细胞中，“AM”部分由细胞酯酶裂解，随后染料分子的荧光信号可以在细胞质中被观测到，但其不结合到细胞组分。这意味着它们能够为“整个细胞”染色。这也意味着染料不能通过醛类固定剂进行交联，因此染料会在固定时丢失。此外，质膜的任何干扰（例如去垢剂或胰蛋白酶处理）都会导致染料从细胞中渗漏。

◆想做一个细胞迁移研究大约4个小时，需要用染料荧光标记细胞，您有什么推荐的吗？
Calcein AM和FDA（荧光素二乙酸盐）是用于该应用的一些染料的实例，由于这些染料不与任何细胞组分结合或共价连接，它们可能具有短的保留时间，因为一些细胞类型可能主动将染料从细胞中流出


使用本产品的文献：

引用文献
1.Methods for the assessment of mitochondrial membrane permeabilization in apoptosis
应用方向：活细胞染色

2.A fluorometric assay for the quantitation of cell adherence to endothelial cells
应用方向：细胞增殖和功能

3.Localization and activity of multidrug resistance protein 1 in the secretory pathway of Leishmania parasites
应用方向：细胞示踪

4.Viability assessment of turkey sperm using fluorescent staining and flow cytometry
应用方向：细胞流式

5.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
应用方向：组织切片染色

6.An accurate, precise method for general labeling of extracellular vesicles
应用方向：外泌体完整性检测。如果外泌体完整性很好，绿色荧光就可以保留在外泌体中，反之，则会从外泌体中泄漏出来

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3013S 规格: 50 µg

发表于由

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针）

产品货号: F3013S

产品规格: 50 µg

目录价（元）:400

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述：
产品参数
外观：可溶于 DMSO 的橙红色粉末
Ex/Em：494/516 nm（结合Ca2＋后）
CAS号：273221-67-3
分子式：C51H50F2N2O23
分子量：1097.0
Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3013S 规格: 50 µg

储存条件
-20℃ 干燥避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Fluo-4 是一种将 Fluo-3 结构中的 Cl 离子替换成F离子的钙荧光探针。由于将 Cl 离子替换成了电子吸引力更强的 F 离子，它的最大激发波长会向短波长方向偏离 10nm 左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo-4 的荧光强度比 Fluo-3 更强。
Fluo-4, AM ester 穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-4，从而被滞留在细胞内。Fluo-4 以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解 AM ester 体，从而降低 Fluo-4, AM ester 进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，加工作液前应尽量去除残留培养基。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光。
3. Fluo-4, AM ester 容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后开封。由于试剂极微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。
4. Fluo-4, AM ester 遇水极易分解，如果不能一次用完，建议将储液小量分装保存。
说明书：

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3013S 规格: 50 µg F3013S    
MSDS：
MSDS F3013S Fluo-4, AM ester（Calcium Ion fluorescence probe）

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3015 规格: 50 μL

发表于由

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM）

产品货号: F3015

产品规格: 50 μL

目录价（元）:650

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述：
产品参数
Ex/Em：506/526 nm（结合 Ca 2＋后）
CAS 号：121714-22-5
分子式：C51H50Cl2N2O23
分子量：1129.9
Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3015 规格: 50 μL

储存条件

-20℃ 干燥避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Fluo-3, AM ester 是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。 Fluo-3, AM ester 进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3 可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光。

注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解 AM ester 体，从而降低 Fluo-3, AM ester 进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，加工作液前应尽量去除残留培养基。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. Fluo-3, AM ester 容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后开封。由于试剂极微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。
4. Fluo-3, AM ester 遇水极易分解，如果不能一次用完，建议将储液小量分装保存。

说明书：

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3015 规格: 50 μL F3015    
MSDS：
MSDS F3015 Fluo-3, AM ester（Calcium Ion fluorescence probe, 2mM）
使用本产品的文献：

参考文献
1.Connexins regulate calcium signaling by controlling ATP release
应用方向：细胞钙离子检测：C6胶质瘤，HeLa和U373胶质母细胞瘤

2.Calreticulin reveals a critical Ca2+ checkpoint in cardiac myofibrillogenesis
应用方向：细胞钙离子检测：胚胎干（ES）细胞

3.Membrane proximal lysosomes are the major vesicles responsible for calcium-dependent exocytosis in nonsecretory cells
应用方向：细胞钙离子检测：CHO细胞

4.Conformational and biochemical differences in the TCR.CD3 complex of CD8(+) versus CD4(+) mature lymphocytes revealed in the absence of CD3gamma
应用方向：细胞钙离子检测：淋巴细胞

5.Repetitive calcium transients and the role of calcium in exocytosis and cell cycle activation in the mouse egg
应用方向：细胞钙离子检测：卵细胞

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3014 规格: 50 μL

发表于由

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM）

产品货号: F3014

产品规格: 50 μL

目录价（元）:900

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述：
产品参数
Ex/Em：494/516 nm（结合Ca2＋后）
CAS号：273221-67-3
分子式：C51H50F2N2O23
分子量：1097.0
Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3014 规格: 50 μL

储存条件
-20℃干燥避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl离子替换成F离子的钙荧光探针。由于将Cl离子替换成了电子吸引力更强的F离子，它的最大激发波长会向短波长方向偏离10 nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo-4的荧光强度比Fluo-3更强。
Fluo-4, AM ester穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内。Fluo-4以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解AM ester体，从而降低Fluo-4, AM ester进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，加工作液前应尽量去除残留培养基。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. Fluo-4, AM ester容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后开封。由于试剂极微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。
4. Fluo-4, AM ester遇水极易分解，如果不能一次用完，建议将储液小量分装保存。
说明书：

Fluo-4, AM ester（钙离子荧光探针, 2mM） 货号: F3014 规格: 50 μL F3014    
MSDS：
MSDS F3014 Fluo-4, AM ester（Calcium Ion fluorescence probe, 2mM）
使用本产品的文献：

1.Autophagic LC3 + calcified extracellular vesicles initiate cartilage calcification in osteoarthritisJ
ianfei Yan, Minjuan Shen, Bingdong Sui, Weicheng Lu, Xiaoxiao Han, Qianqian Wan, Yingying Liu, Junjun Kang, Wenpin Qin, Zibing Zhang, Da Chen, Yuan Cao, Siqi Ying, Franklin R Tay, Li-Na Niu, Kai Jiao 
SCIENCE ADVANCES

参考文献:

1.Calibration of Fluorescent Calcium Indicators
应用方向：细胞钙离子检测

2.A calcium-induced calcium influx factor, nitric oxide, modulates the refilling of calcium stores in astrocytes
应用方向：细胞钙离子检测：鼠皮质星形胶质细胞

3.Opposing actions of inositol 1,4,5-trisphosphate and ryanodine receptors on nuclear factor of activated T-cells regulation in smooth muscle
应用方向：钙离子检测：平滑肌细胞

4.Transdifferentiation of blood-derived human adult endothelial progenitor cells into functionally active cardiomyocytes
应用方向：钙离子检测：心肌细胞

5.Calcium imaging of individual erythrocytes: problems and approaches
应用方向：钙离子检测：血红细胞

Calcein AM 细胞活力检测试剂盒 货号: C6003S/C6003L 规格: 50T/1000T

发表于由

Calcein AM 细胞活力检测试剂盒

产品货号: C6003S/C6003L

产品规格: 50T/1000T

目录价（元）:180/2500

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪

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产品概述：

产品内容：

组分

C6003S（50T）

C6003L（1000T）

2 mM Calcein AM（无水DMSO）

25 μL

500 μL

应用范围：活细胞荧光示踪探针。

产品参数

Ex/Em：494/517 nm (pH 8)

储存条件

-20°C避光保存，有效期见外包装。

产品介绍

Calcein AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它可以穿透细胞膜进入细胞，被细胞内的酯酶剪切为Calcein。Calcein 带高度负电荷，被滞留在正常细胞的胞质内，发出明亮的绿色荧光。由于其低毒性，Calcein AM 可以用于研究细胞膜的完整性和长期细胞示踪实验。此外，它也可被用于定量活细胞数。Calcein AM 细胞活力检测试剂盒是在细胞活力检测中，用来定量活细胞数的终点检测法。测定所产生的荧光信号与样品中的活细胞数成正比（图1）。

Calcein AM 细胞活力检测试剂盒 货号: C6003S/C6003L 规格: 50T/1000T

图 1. 用 Calcein AM Cell Viability Assay Kit 定量 HeLa 细胞数。细胞在检测前 24 h 接种于 96 孔板内。

注意事项
1. Calcein , AM 遇到湿气会分解，使用后请在-20℃下密闭冷冻保存，防止水分进入。


说明书：

Calcein AM 细胞活力检测试剂盒 货号: C6003S/C6003L 规格: 50T/1000T C6003S/C6003L    
使用本产品的文献：

参考文献
1.A rapid fluorometric assay to measure neuronal survival in vitro
应用方向：量化活细胞的相对数量

2.A precise, rapid and sensitive in vitro assay to measure the adhesion of ovarian tumour cells to peritoneal mesothelial cells
应用方向：研究卵巢肿瘤细胞粘附力

BCECF AM（pH荧光探针, 5mM） 货号: B3016 规格: 50 μL

发表于由

BCECF AM（pH荧光探针, 5mM）

产品货号: B3016

产品规格: 50 μL

目录价（元）:520

推荐仪器：荧光显微镜

大包装询价


产品概述：

产品参数
Ex/Em：505/520 nm
CAS号：117464-70-7
分子式：混合物（C30H20O11, C35H28O15, C40H36O19）
分子量：平均分子量688.6
分子结构图：
BCECF AM（pH荧光探针, 5mM） 货号: B3016 规格: 50 μL

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
BCECF, AM是一种可以穿透细胞膜检测细胞内pH的荧光染料。BCECF, AM没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当的pH值条件下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503 nm左右，最大发射波长在520 nm左右，实际检测时推荐使用的激发波长为488 nm，发射波长为535 nm。
BCECF, AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的体内pH水平检测。此外，在细胞内有pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF, AM也被广泛应用。BCECF在不同pH条件下的发射光谱参考下图。

BCECF AM（pH荧光探针, 5mM） 货号: B3016 规格: 50 μL

注意事项
1. BCECF, AM可能对人体有害，请注意适当防护。
2. BCECF, AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

BCECF AM（pH荧光探针, 5mM） 货号: B3016 规格: 50 μL B3016    
使用本产品的文献：

参考文献
1.1,25-dihydroxyvitamin D3 inhibits Na(+)-H+ exchange by stimulating membrane phosphoinositide turnover and increasing cytosolic calcium in CaCo-2 cells
应用方向：细胞pH检测：CaCo-2细胞

2.14-3-3 Binding to Na+/H+ Exchanger Isoform-1 Is Associated with Serum-dependent Activation of Na+/H+ Exchange
应用方向：细胞pH检测：PS127A cells /PS120 cells 

3.Intracellular pH determination of pristinamycin-producing Streptomyces pristinaespiralis by image analysis.
应用方向：细菌pH检测：链霉菌

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3005 规格: 1 mg

发表于由

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针）

产品货号: F3005

产品规格: 1 mg

目录价（元）:1400

大包装询价


产品概述：
产品参数
外观：可溶于 DMSO 的橙红色固体
Ex/Em：506/526 nm（结合 Ca 2＋后）
CAS 号：121714-22-5
分子式：C51H50Cl2N2O23
分子量：1129.9
分子结构图：

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3005 规格: 1 mg

储存条件
-20℃ 干燥避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Fluo-3, AM ester 是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。 Fluo-3, AM ester 进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3 可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光。

注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解 AM este r体，从而降低 Fluo-3, AM ester 进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，加工作液前应尽量去除残留培养基。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. Fluo-3, AM ester 容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后开封。由于试剂极微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。
4. Fluo-3, AM ester 遇水极易分解，如果不能一次用完，建议将储液小量分装保存。

说明书：

Fluo-3, AM ester（钙离子荧光探针） 货号: F3005 规格: 1 mg F3005    

环磷酸腺苷-AM cAMP-AM（停产） 货号20300-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

环磷酸腺苷-AM cAMP-AM（停产）

环磷酸腺苷-AM cAMP-AM（停产）

环磷酸腺苷-AM cAMP-AM（停产） 货号20300 货号 20300 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 0
Ex (nm) Em (nm)
分子量 401.27 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20300

产品名称：环磷酸腺苷-AM cAMP-AM

规格：1mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：401.27

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：N/A

发射波长(nm)：N/A

 

产品介绍

cAMP-AM是可透过细胞的cAMP。经过酯酶的渗透和代谢激活后，极性cAMP释放出来，并被困在细胞内，随后迅速代谢，产生脉冲型信号。cAMP是第二种信使，用于细胞内信号转导，例如将无法通过质膜的激素（如胰高血糖素和肾上腺素）转移到细胞中。它参与蛋白激酶的活化并调节肾上腺素和胰高血糖素的作用。cAMP还结合并调节离子通道（例如HCN通道）和一些其他环状核苷酸结合蛋白（例如Epac1和RAPGEF2）的功能。

点击查看实验方案

 

参考文献

Induction of miR-132 and miR-212 Expression by Glucagon-Like Peptide 1 (GLP-1) in Rodent and Human Pancreatic beta-Cells
Authors: Shang J, Li J, Keller MP, Hohmeier HE, Wang Y, Feng Y, Zhou HH, Shen X, Rabaglia M, Soni M, Attie AD, Newgard CB, Thornberry NA, Howard AD, Zhou YP.
Journal: Mol Endocrinol (2015): 1243

Mechanisms of hydrogen sulfide (H2S) action on synaptic transmission at the mouse neuromuscular junction
Authors: Gerasimova E, Lebedeva J, Yakovlev A, Zefirov A, Giniatullin R, Sitdikova G.
Journal: Neuroscience (2015): 577

Store-operated cAMP signaling contributes to Ca2+-activated Cl- secretion in T84 colonic cells
Authors: Nichols JM, Maiellaro I, Abi-Jaoude J, Curci S, Hofer AM.
Journal: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol (2015): G670

Exchange protein directly activated by cAMP mediates slow delayed-rectifier current remodeling by sustained beta-adrenergic activation in guinea pig hearts
Authors: Aflaki M, Qi XY, Xiao L, Ordog B, Tadevosyan A, Luo X, Maguy A, Shi Y, Tardif JC, Nattel S.
Journal: Circ Res (2014): 993

Prostaglandin E2 induces chloride secretion through crosstalk between cAMP and calcium signaling in mouse inner medullary collecting duct cells
Authors: Rajagopal M, Thomas SV, Kathpalia PP, Chen Y, Pao AC.
Journal: Am J Physiol Cell Physiol (2014): C263

Serotonin triggers cAMP and PKA-mediated intracellular calcium waves in Malpighian tubules of Rhodnius prolixus
Authors: Gioino P, Murray BG, Ianowski JP.
Journal: Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (2014): R828

The nephrotoxic Ifosfamide-metabolite chloroacetaldehyde interferes with renal extracellular matrix homeostasis
Authors: Benesic A, Schwerdt G, Hennemeier I, Sauvant C, Mildenberger S, Gekle M.
Journal: Cell Physiol Biochem (2014): 1106

The secretogranin II gene is a signal integrator of glutamate and dopamine inputs
Authors: Iwase K, Ishihara A, Yoshimura S, Andoh Y, Kato M, Seki N, Matsumoto E, Hiwasa T, Muller D, Fukunaga K, Takiguchi M.
Journal: J Neurochem (2014): 233

Epac activator critically regulates action potential duration by decreasing potassium current in rat adult ventricle
Authors: Brette F, Blandin E, Simard C, Guinamard R, Salle L.
Journal: J Mol Cell Cardiol (2013): 96

Exchange protein activated by cAMP (Epac) induces vascular relaxation by activating Ca2+-sensitive K+ channels in rat mesenteric artery
Authors: Roberts OL, Kamishima T, Barrett-Jolley R, Quayle JM, Dart C.
Journal: J Physiol (2013): 5107

说明书
环磷酸腺苷-AM cAMP-AM（停产）.pdf

钙离子荧光探针Cal-630 AM 货号20530-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Cal-630 AM

钙离子荧光探针Cal-630 AM

钙离子荧光探针Cal-630 AM 货号20530 货号 20530 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5×50 ug 价格 3924
Ex (nm) 609 Em (nm) 626
分子量 1282.89 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Cal-630 AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630提供最强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，这些钙敏感染料明显更亮，并提供更高的信噪比，大大提高了细胞内保留和负载效率。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM。一旦进入细胞内，Cal520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM的亲脂性阻断AM基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光Calbryte 染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Calbryte 520 AM， Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM是测量细胞内钙的最强大指标。

除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Calbryte 590和Calbryte 630的长Ex / Em波长使这些染料成为完美的钙指示剂，可与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系进行多色检测。 此外，Calbryte 520，Calbryte 590或Calbryte 630钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Calbryte 520可在488 nm处激发，并与FITC滤光片组配合使用。 Calbryte 590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Calbryte 630经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Texas Red
发射： Texas Red
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 600nm
发射： 640nm
cutoff: 630nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

使用Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯类

1.操作步骤

        Calbryte AM酯应在使用前在无水DMSO中重新配制。 DMSO储备溶液可以在-20℃下储存（干燥）并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定三个月。 以下是我们推荐的将Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯加入活细胞的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的特定需求进行修改。

a）在无水DMSO中制备2至5mM Calbryte 520AM，Calbryte 590AM或Calbryte 630AM酯的储备溶液。

b）将Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。 在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。 细胞加载所需指示剂的确切浓度必须根据经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Calbryte 520 AM，Calbryte 590 AM或Calbryte 630 AM酯的水溶性。 各种Pluronic®F-127可从金畔购买。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）添加到染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）

注意：各种ReadiUse 丙磺舒（包括水溶性钠盐和稳定溶液）均可从金畔购买。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育约60分钟，然后将板在室温下再孵育15分钟。

f）用HHBS或您选择的含有阴离子转运蛋白抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）对于Calbryte 520 AM，在Ex / Em = 490 / 525nm处进行钙测试，对于Calbryte 590 AM，使用540/590nm进行钙测试，对于Calbryte 630 AM，使用610/640nm进行钙测试。

 

2.测量细胞内钙响应

钙离子荧光探针Cal-630 AM 货号20530

图1. CHO-K1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。 将CHO-K1细胞以每孔100μL每孔40,000个细胞接种过夜，在96孔黑色壁/透明底板中。 将含有丙磺舒的HHBS中的100μLFluo-4AM或Calbryte 520AM加入孔中，并将细胞在37℃下孵育45分钟。 用200μLHHBS替换染料加载培养基，加入50μL50μMATP，并使用FITC通道用荧光显微镜（Keyence）成像。

钙离子荧光探针Cal-630 AM 货号20530

图2.用Calbryte 520或Fluo-4 AM测量的CHO-M1细胞中外源M1受体的卡巴胆碱刺激的钙响应。 在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-M1细胞以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。 将100μLFluo-4AM或不含丙磺舒的Calbryte 520AM加入细胞中，并将细胞在37℃下孵育45分钟。 通过FlexStation 3（Molecular Devices）添加Carbachol（50μL/孔）以达到最终指示的浓度。

钙离子荧光探针Cal-630 AM 货号20530

图3. CHO-K细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。 在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-K细胞以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。 将100μL具有2mM丙磺舒的HbBS中的Calbryte 590AM或Calbryte  630 AM加入孔中，并将细胞在37℃下孵育1小时。 将染料加载培养基替换为200μLHHBS，用50μL50μMATP处理，并使用TRITC通道（Calbryte  590）和Texas Red Channel（Calbryte 630）用荧光显微镜（Keyence）成像。

 

结论

        由于Ca 2+在生物学中的重要性，已经建立了许多用于分析细胞和/或亚细胞Ca 2+活性机制的技术/方法。 尽管用于分析Ca 2+活性的每种方法都具有优于其他方法的某些优点，但每种方法也存在缺点。 凭借上述出色的性能，我们相信Calbryte 520，Calbryte 590和Calbryte 630钙检测试剂为各种生物系统中的细胞内钙分析和监测提供了新的强大工具。

        正如可能预测的那样，Ca2 +分析中许多研究人员的兴趣从细胞水平转移到亚细胞水平。 已经发现Ca2 +在整个细胞中均匀分布，并且在多种细胞（例如，卵母细胞，心肌细胞，肝细胞和外分泌细胞）中观察到Ca2 +的细胞内异质性（例如Ca2+ waves and Ca2+ sparks）。 随着20世纪80年代共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）和2000年代先进的酶标仪（如FLIPR，FDSS和NOVOStar专用于细胞内Ca2 +检测）的出现，细胞内Ca2 +的测量显着加速。 共聚焦激光扫描显微镜和最近的多光子显微镜除了测量其浓度外，还允许在亚细胞水平上对细胞内Ca 2+信号传导进行精确的空间和时间分析。

 

参考文献

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Journal: Journal of Neuroinflammation (2017): 194

 

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产品名称 货号
新型钙离子荧光探针Calbryte 530, AM *细胞渗透性* Cat#20720

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