Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

	货号	11304	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒，XO（黄嘌呤氧化酶）是一种能催化次黄嘌呤到黄嘌呤或者更进一步催化黄嘌呤到尿酸的酶。在嘌呤的分解代谢扮演着重要角色。XO通常能在肝脏或者空肠检测到。在重度肝损伤，XO释放到血液中，因此血液中XO检测试验可以用来确定肝脏损伤的发生。黄嘌呤尿是一种少见遗传病，缺少XO导致血中高浓度黄嘌呤引起肾衰竭等健康疾病。Amplite XO检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法，来检测XO的活性。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。在实验分析种，XO氧化嘌呤碱基，次黄嘌呤、黄嘌呤转变成尿酸或者超氧化物，后者又自发的降解为双氧水。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测到或者被酶标仪（576nm）检测。Amplite黄嘌呤氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到0.15mU／ml的XO。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.XO标准品或测试样品（50μL）
2.添加XO工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育15-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度（截止570 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH = 7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH = 7.4。

2. HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

3.黄嘌呤氧化酶（XO）标准溶液（1 U / mL）
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。

2.标准溶液

XO标准
将10μL1U/ mL XO标准溶液加入990μL测定缓冲液（组分B）中以制备10mU / mL XO标准溶液（XO7）。 进行1：3连续稀释，得到剩余的连续稀释的XO标准品（XO6-XO1）。

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备溶液（250X），10μLHRP储备溶液（500X）和50μL黄嘌呤（100X，组分D）加入5mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为 5.08mL黄嘌呤氧化酶（XO）工作溶液,避光。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中XO标准品和测试样品的布局

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2中提供的布局，将XO标准品（XO），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备成固体黑色96孔微孔板。对于384孔板，使用25μL 每孔试剂代替50μL。

2.向XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLXO工作溶液，使总XO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLXO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm），截止= 570nm监测荧光强度。

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

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Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒

	货号	11307	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤氧化酶（XO）是一种催化次黄嘌呤氧化成黄嘌呤的酶，可以进一步催化黄嘌呤氧化成尿酸。它在嘌呤的分解代谢中起重要作用。黄嘌呤氧化酶通常存在于肝脏和空肠中。在严重肝损伤期间，黄嘌呤氧化酶被释放到血液中，因此XO的血液测定是确定肝脏损伤是否已经发生的一种方法。Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒为黄嘌呤氧化酶活性的测量提供了一种快速，超灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。在该测定中，黄嘌呤氧化酶催化嘌呤碱基，次黄嘌呤或黄嘌呤氧化成尿酸和超氧化物，其自发降解为过氧化氢（H₂O₂）。该试剂盒使用我们的Amplite Red基板，使用吸光度酶标仪可以在~570 nm处轻松读取颜色信号。使用Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至0.3 mU / mL的黄嘌呤氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加XO标准品和/或测试样品（50μL）
2.准备并添加XO Assay工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在OD比为570 / 610nm时读取吸光度增加

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意：避免反复冻融循环。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液（pH 7.4）。

1.2 HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入HRP小瓶（组分C）中。注意：未使用的HRP储备溶液（500X）应分成一次性使用的等分试样并储存在-20 oC。

1.3 黄嘌呤氧化酶（XO）原液：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。注意：未使用的XO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

2.标准溶液

黄嘌呤氧化酶标准
将10μL1U/ mL XO储备液加入990μL分析缓冲液（组分B）中，制成10 mU / mL XO标准溶液。进行1：3连续稀释，得到约10,3,1,0.3,0.1， 0.03,0.01和0mU / mL连续稀释的XO标准品。

3.工作溶液

表1.一个透明底96孔微孔板的XO分析工作溶液（2X）

样品分析

表2.在透明底96孔微孔板中的黄嘌呤氧化酶标准品和测试样品的布局。 XOS =黄嘌呤氧化酶标准品（XOS1-XOS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表3.每个孔的试剂组成

注意：黄嘌呤氧化酶标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。

1.如表2和3中所述，将XO标准品和含有XO的测试样品加入白色透明底部微孔板中。

2.将50μLXOAssay工作溶液加入XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（表2），使总XO测定体积为100μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用吸光度读数器监测信号强度，OD比为570 / 610nm。

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

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Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒

	货号	13843	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	571	Em (nm)	585
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测黄嘌呤的试剂盒，黄嘌呤是在大多数人体组织和液体中发现的嘌呤碱。 许多兴奋剂来源于黄嘌呤，包括咖啡因，氨茶碱，IBMX，旁黄嘌呤，己酮可可碱，可可碱和茶碱，它们可以刺激心率，收缩力，高浓度的心律失常。 因此，检测生物样品中的黄嘌呤变化对于疾病诊断和治疗监测是重要的。 Amplite 荧光黄嘌呤测定试剂盒为黄嘌呤的测量提供了快速且超灵敏的方法。 它可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。 黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶存在下氧化成尿酸以释放过氧化氢，其可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 540nm / 590nm下用Amplite Red特别测量。 使用Amplite 荧光黄嘌呤测定试剂盒，在100μL反应体积中检测到低至0.4μM的黄嘌呤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备黄嘌呤标准品或测试样品（50 µL）
2.添加黄嘌呤工作溶液（50 µL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm时读取荧光强度

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite Red底物储备液（250X）：
在Amplite Red底物（组分A）的小瓶中加入40 µL DMSO（组分F）。 注意：Amplite Red底物在硫醇（例如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇）的存在下不稳定。 反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10 µM。 由于Amplite Red在pH> 8.5时不稳定，因此应在pH 7-8（建议pH 7.4）下进行测定。

1.2 HRP储备溶液（500X）：
将100 µL测定缓冲液（组分B）加到辣根过氧化物酶（组分C）小瓶中。

1.3 黄嘌呤氧化酶（XO）储备溶液（100X）：
向小瓶黄嘌呤氧化酶（组分E）中加入100 µL测定缓冲液（组分B）制成黄嘌呤氧化酶（XO）储备液（100X）。

2.标准溶液配制

黄嘌呤标准品
将5 µL黄嘌呤标准品（组分D）添加到995 µL测定缓冲液（组分B）中，得到100 µM黄嘌呤标准溶液。 取200 µL 100 µM黄嘌呤标准溶液进行1：3连续稀释，以得到连续稀释的黄嘌呤标准液（X1-X7）。

3.工作溶液配制

将20μL的Amplite Red底物储备液（250X），10μL的HRP储备液（500X）和50μL的黄嘌呤氧化酶储备液（100X）加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，制成总体积 5.08毫升。 注意：避免直接暴露在光线下并立即使用。

样品操作及实验分析

表1.黑色壁/实心底部96孔微孔板中黄嘌呤标准品和测试样品的布局。 X =黄嘌呤标准品（X1-X7，0.137至100 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，准备黄嘌呤标准品（X），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.在黄嘌呤标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL黄嘌呤工作溶液，使总黄嘌呤测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。

3.在避光条件下，于室温下孵育反应30至60分钟。

4.使用酶标仪在激发= 530-570 nm（最佳540 nm），发射= 590-600 nm（最佳590 nm），截止= 570 nm的条件下监控荧光的增加。

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

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Journal: Analyst (2013): 434

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Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

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Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

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Journal: Molecules (2013): 1638

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Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

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