Amplite 比色法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒

	货号	13830	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量	N/A	溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测羟基丁酸的试剂盒，酮体由肝脏产生，并在血糖水平下降时用作外周能量源。两种主要的酮体是β-羟基丁酸酯（β-HB）和乙酰乙酸酯（AcAc），而丙酮是第三种丰富的酮体。通常这两种主要的酮体在禁食期间（低食量摄入）和长时间运动期间少量存在于血液中。在患有糖尿病，酒精或水杨酸盐中毒，激素缺乏症，儿童低血糖症和其他急性疾病状态的患者中，在血液中发现大量酮体。酮体在血液中的过量生成和积聚（酮病）可导致病理性代谢性酸中毒（酮症酸中毒）。在极端情况下，酮症酸中毒可能是致命的。量化血液中主要酮体β-HB（约75％）的血酮测试方法已用于诊断和监测酮症酸中毒的治疗。 Amplite 比色法β-羟基丁酸酯检测试剂盒提供了一种灵敏的荧光检测方法，用于测量生物样品中的β-HB水平。该测定基于β-HB的酶偶联反应，其中产物NADH可以通过荧光NADH传感器特别监测。荧光信号可以通过具有在570nm至610nm的波长处的OD比率的吸光度酶标仪来测量。使用此比色法β-羟基丁酸酯测定试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至4μM的β-HB。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备β-HB工作溶液（50 µL）
2.添加β-HB标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.OD比为570/610 nm时监测吸光度的增加

溶液制备 

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NAD储备溶液（100X）：
将100 µL H2O加入NAD小瓶（组分C）中，制成100X NAD储备溶液。

1.2 β-HB标准溶液（100 mM）：
将1 mL H2O或1X PBS缓冲液添加到小瓶β-HB标准溶液（组分D）中，制成100 mMβ-HB标准溶液。

2.标准溶液

β-HB标准
向990 µL 1X PBS缓冲液中加入10 µL 100 mMβ-HB标准储备液，以生成1000 µMβ-HB标准溶液（HB7）。 取1000 µMβ-HB标准溶液（HB7），并在PBS中进行1：3系列稀释，以得到系列稀释的β-HB标准溶液（HB6-HB1）。 注意：稀释的β-HB标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶混合物（组分A）中。

3.2 将50 µL 100X NAD储备溶液添加到组分A + B的瓶子中，并充分混合以制成β-HB工作溶液（组分A + B + C）。 注意：此β-HB工作溶液不稳定，请立即使用，并避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.底部透明的96孔微孔板中β-HB标准品和测试样品的布局。 HB =β-HB标准（HB1-HB7，1至1000 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，准备β-HB标准液（HB），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µLβ-HB工作溶液添加到β-HB标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µLβ-HB工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.用吸光度板读数器以OD比570/610 nm监测吸光度的增加。

参考文献

Gamma-hydroxybutyrate (GHB) induces cognitive deficits and affects GABAB receptors and IGF-1 receptors in male rats
Authors: Johansson J, Gronbladh A, Hallberg M.
Journal: Behav Brain Res (2014): 164

Protective effects of exogenous beta-hydroxybutyrate on paraquat toxicity in rat kidney
Authors: Wei T, Tian W, Liu F, Xie G.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2014): 666

Surface glycosylation of poly(3-hydroxybutyrate-co-4-hydroxybutyrate) membrane for selective adsorption of low-density lipoprotein
Authors: Wang W, Lan P.
Journal: J Biomater Sci Polym Ed (2014): 2094

[Biocompatibility of electrospun poly(3-hydroxybutyrate) and its composites scaffoldsfor tissue engineering.]
Authors: Zharkova, II, Staroverova OV, Voinova VV, Andreeva NV, Shushckevich AM, Sklyanchuk ED, Kuzmicheva GM, Bespalova AE, Akulina EA, Shaitan KV, Olkhov AA.
Journal: Biomed Khim (2014): 553

Biocompatibility studies and characterization of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate)/polycaprolactone blends
Authors: Lim J, Chong MS, Teo EY, Chen GQ, Chan JK, Teoh SH.
Journal: J Biomed Mater Res B Appl Biomater (2013): 752

Cell attachment on poly(3-hydroxybutyrate)-poly(ethylene glycol) copolymer produced by Azotobacter chroococcum 7B
Authors: Bonartsev AP, Yakovlev SG, Zharkova, II, Boskhomdzhiev AP, Bagrov DV, Myshkina VL, Makhina TK, Kharitonova EP, Samsonova OV, Feofanov AV, Voinova VV, Zernov AL, Efremov YM, Bonartseva GA, Shaitan KV, Kirpichnikov MP.
Journal: BMC Biochem (2013): 12

d-beta-Hydroxybutyrate inhibited the apoptosis of PC12 cells induced by H2O2 via inhibiting oxidative stress
Authors: Cheng B, Lu H, Bai B, Chen J.
Journal: Neurochem Int (2013): 620

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Authors: Zheng J, Li D, Yuan L, Liu X, Chen H.
Journal: ACS Appl Mater Interfaces (2013): 5882

New synthesis and tritium labeling of a selective ligand for studying high-affinity gamma-hydroxybutyrate (GHB) binding sites
Authors: Vogensen SB, Marek A, Bay T, Wellendorph P, Kehler J, Bundgaard C, Frolund B, Pedersen MH, Clausen RP.
Journal: J Med Chem (2013): 8201

Poly (3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate)/collagen hybrid scaffolds for tissue engineering applications
Authors: Lomas AJ, Webb WR, Han J, Chen GQ, Sun X, Zhang Z, El Haj AJ, Forsyth NR.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2013): 577

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	货号	13831	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	571	Em (nm)	585
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测羟基丁酸的试剂盒，当血糖水平下降时，酮体由肝脏产生并在外周用作能量来源。两个主要的酮体是 β-羟基丁酸酯 (Beta-HB) 和乙酰乙酸酯，而丙酮是第三丰富的酮体。正常情况下，这两种主要的酮体在禁食和长时间运动时少量存在于血液中。在患有糖尿病、酒精或水杨酸中毒、激素缺乏、儿童低血糖等急性疾病状态的患者中，血液中会发现大量的酮体。血液中酮体的过度产生和积累（酮症）可导致病理性代谢性酸中毒（酮症酸中毒）。在极端情况下，酮症酸中毒可能是致命的。量化 Beta-HB 的血酮测试方法，血液中的主要酮体（约 75%）已被用于诊断和监测酮症酸中毒的治疗。 Amplite 荧光法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒提供灵敏的荧光分析，用于测量生物样品中的 Beta-HB 水平。该测定基于 Beta-HB 的酶偶联反应，其中产物 NADH 可以通过荧光 NADH 传感器进行特异性监测。荧光信号可以通过荧光酶标仪测量。使用此荧光β-羟基丁酸检测试剂盒，我们能够在 100 µL 反应体积中检测低至 1.4 µM 的 Beta-HB。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法β-羟基丁酸（酮体）检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备β-HB工作溶液（50 µL）
2.添加β-HB标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm时的荧光增加

溶液制备 

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. NAD储备溶液（100X）：
将100 µL H₂O加入NAD小瓶（组分C）中，制成100X NAD储备溶液。

2.β-HB标准溶液（100 mM）：
将1 mL H₂O或1X PBS缓冲液添加到小瓶β-HB标准溶液（组分D）中，制成100 mMβ-HB标准溶液。

2.标准溶液

β-HB标准
向990 µL 1X PBS缓冲液中加入10 µL 100 mMβ-HB标准储备液，以生成1000 µMβ-HB标准溶液（HB7）。取1000 µMβ-HB标准溶液（HB7），并在PBS中进行1：3系列稀释，以得到系列稀释的β-HB标准溶液（HB6-HB1）。 注意：稀释的β-HB标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶混合物（组分A）中。

3.2 将50 µL NAD储备溶液添加到组分A + B的瓶子中，并充分混合以制成β-HB工作溶液（组分A + B + C）。 注意：此β-HB工作溶液不稳定，请立即使用，并避免直接暴露在光线下。

样品操作及实验分析

表1.底部透明的96孔微孔板中β-HB标准品和测试样品的布局。 HB =β-HB标准（HB1-HB7，1至1000 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2提供的布局，将β-HB标准品（HB），空白对照（BL）和测试样品（TS）制成黑色96孔微孔板。对于384孔板，请使用25 µL 每孔试剂，而不是50 µL。

2.将50 µLβ-HB工作溶液添加到β-HB标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µLβ-HB工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光板读数器在激发= 530-570 nm，发射= 590-600 nm（最佳Ex / Em = 540/590 nm，在570 nm截止）下监测荧光的增加。

参考文献

A platform for assessing outer segment fate in primary human fetal RPE cultures
Authors: Qitao Zhang, Feriel Presswalla, Kecia Feathers, Xu Cao, Bret A Hughes, David N Zacks, Debra A Thompson, Jason ML Miller
Journal: Experimental eye research (2018)

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