6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液 货号395-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液

6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液

6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液    货号395 货号 395 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 ml 价格 2604
Ex (nm) 578 Em (nm) 604
分子量 591.65 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:395

产品名称:6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液

规格:5ml

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:591.65

外观:紫色溶液

溶剂:20 mM Tris (pH 8.4)

激发波长(nm):578

发射波长(nm):602

 

产品介绍

6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液是美国AAT Bioquest生产的ROX系列染料。6-ROX主要用作进行PCR检测的参照染料。 然而,与其他罗丹明染料相比,6-ROX非常不稳定,但6-ROX甘氨酸具有改善的稳定性,并且6-ROX甘氨酸具有与6-ROX相似的光谱特性。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液。 

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参考文献

Four-color DNA sequencing by synthesis on a chip using photocleavable fluorescent nucleotides
Authors: Seo TS, Bai X, Kim DH, Meng Q, Shi S, Ruparel H, Li Z, Turro NJ, Ju J.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2005): 5926

Adsorption of oligonucleotides on PMMA/PNIPAM core-shell latexes: polarity of the PNIPAM shell probed by fluorescence
Authors: Prazeres TJ, Santos AM, Martinho JM, Elaissari A, Pichot C.
Journal: Langmuir (2004): 6834

Evaluation of surface-enhanced resonance Raman scattering for quantitative DNA analysis
Authors: Faulds K, Smith WE, Graham D.
Journal: Anal Chem (2004): 412

Photocleavable fluorescent nucleotides for DNA sequencing on a chip constructed by site-specific coupling chemistry
Authors: Seo TS, Bai X, Ruparel H, Li Z, Turro NJ, Ju J.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2004): 5488

Blue light-induced generation of reactive oxygen species in photoreceptor ellipsoids requires mitochondrial electron transport
Authors: Yang JH, Basinger SF, Gross RL, Wu SM.
Journal: Invest Ophthalmol Vis Sci (2003): 1312

HLA-DRB fluorotyping by dark quenching and automated analysis
Authors: Slateva K, Elsner HA, Albis-Camps M, Blasczyk R.
Journal: Tissue Antigens (2001): 250

Influence of fluorophor dye labels on the migration behavior of polymerase chain reaction–amplified short tandem repeats during denaturing capillary electrophoresis
Authors: Hahn M, Wilhelm J, Pingoud A.
Journal: Electrophoresis (2001): 2691

Design, synthesis, and spectroscopic properties of peptide-bridged fluorescence energy-transfer cassettes
Authors: Li Y, Glazer AN.
Journal: Bioconjug Chem (1999): 241

Comparison of fluorescence energy transfer primers with different donor-acceptor dye combinations
Authors: Hung SC, Mathies RA, Glazer AN.
Journal: Anal Biochem (1998): 32

Differential display with carboxy-X-rhodamine-labeled primers and the selection of differentially amplified cDNA fragments without cloning
Authors: Yoshikawa Y, Mukai H, Asada K, Hino F, Kato I.
Journal: Anal Biochem (1998): 82

 

相关产品

产品名称 货号
6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液 Cat#398

说明书
6-ROX甘氨酸 25 uM荧光法PCR检测参照液.pdf

6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液 货号398-AAT Bioquest荧光染料

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6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液

6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液

6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液    货号398 货号 398 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 ml 价格 3924
Ex (nm) 578 Em (nm) 595
分子量 844.80 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:398

产品名称:6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液

规格:5ml

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:844.80

溶剂:水

激发波长(nm):578

发射波长(nm):595

 

产品介绍

6-ROXtra,SE是美国AAT Bioquest生产的ROX系列染料。6-ROX主要用于进行PCR检测的参照染料。 然而,与其他罗丹明染料相比,6-ROX非常不稳定。而6-ROXtra 大大提高了稳定性和水溶性且具有与6-ROX几乎相同的光谱特性。 6-ROXtra 染料在室温下可以稳定数周,使这种荧光染料非常出色的替代6-ROX PCR参照染料。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的6-ROXtra,SE 25uM荧光法PCR检测参照液。 

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参考文献

Four-color DNA sequencing by synthesis on a chip using photocleavable fluorescent nucleotides
Authors: Seo TS, Bai X, Kim DH, Meng Q, Shi S, Ruparel H, Li Z, Turro NJ, Ju J.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2005): 5926

Adsorption of oligonucleotides on PMMA/PNIPAM core-shell latexes: polarity of the PNIPAM shell probed by fluorescence
Authors: Prazeres TJ, Santos AM, Martinho JM, Elaissari A, Pichot C.
Journal: Langmuir (2004): 6834

Evaluation of surface-enhanced resonance Raman scattering for quantitative DNA analysis
Authors: Faulds K, Smith WE, Graham D.
Journal: Anal Chem (2004): 412

Photocleavable fluorescent nucleotides for DNA sequencing on a chip constructed by site-specific coupling chemistry
Authors: Seo TS, Bai X, Ruparel H, Li Z, Turro NJ, Ju J.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2004): 5488

Blue light-induced generation of reactive oxygen species in photoreceptor ellipsoids requires mitochondrial electron transport
Authors: Yang JH, Basinger SF, Gross RL, Wu SM.
Journal: Invest Ophthalmol Vis Sci (2003): 1312

HLA-DRB fluorotyping by dark quenching and automated analysis
Authors: Slateva K, Elsner HA, Albis-Camps M, Blasczyk R.
Journal: Tissue Antigens (2001): 250

Influence of fluorophor dye labels on the migration behavior of polymerase chain reaction–amplified short tandem repeats during denaturing capillary electrophoresis
Authors: Hahn M, Wilhelm J, Pingoud A.
Journal: Electrophoresis (2001): 2691

Design, synthesis, and spectroscopic properties of peptide-bridged fluorescence energy-transfer cassettes
Authors: Li Y, Glazer AN.
Journal: Bioconjug Chem (1999): 241

Comparison of fluorescence energy transfer primers with different donor-acceptor dye combinations
Authors: Hung SC, Mathies RA, Glazer AN.
Journal: Anal Biochem (1998): 32

Differential display with carboxy-X-rhodamine-labeled primers and the selection of differentially amplified cDNA fragments without cloning
Authors: Yoshikawa Y, Mukai H, Asada K, Hino F, Kato I.
Journal: Anal Biochem (1998): 82

说明书
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Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光 货号11300-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光     货号11300 货号 11300 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的葡萄糖检测的试剂盒,葡萄糖氧化酶是二聚体蛋白质,其催化β-D-葡萄糖氧化成过氧化氢和D-葡糖酸-1,5-内酯,其被水解成葡萄糖酸。它广泛用于测定体液中的葡萄糖以及从饮料,食品和其他农产品中去除残留的葡萄糖和氧气。此外,葡萄糖氧化酶通常用于生物传感器中以检测葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶检测试剂盒为溶液中葡萄糖氧化酶的测量提供了一种快速而灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。该套件使用我们的Amplite Red基板,可实现双重可录制模式。荧光信号可以通过荧光酶标仪或吸光度酶标仪轻松读取。使用Amplite 荧光葡萄糖氧化酶检测试剂盒,我们在100μL反应体积中检测到低至0.05 mU / mL的葡萄糖氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GO工作溶液(50μL)
2.添加葡萄糖氧化酶标准品或测试样品(50μL)
3.在37°C孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将100μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液(pH 7.4)。

2. HRP库存解决方案(50X):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶标准溶液(100 U / mL):
将1mL测定缓冲液加入葡萄糖氧化酶小瓶(组分D)中。

4.葡萄糖原液(10X):
将5mL测定缓冲液加入葡萄糖小瓶(组分F)中。

 

2.标准溶液

葡萄糖氧化酶标准
通过将2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶标准溶液稀释到200μL的测定缓冲液(组分B)中来制备葡萄糖氧化酶标准品,以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液。 然后取10μL1000mU/ mL葡萄糖氧化酶标准溶液,进行1:100稀释,得到10mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液(GOS7)。然后进行1:3连续稀释以获得剩余的连续稀释的葡萄糖氧化酶标准品(GOS6-GOS1)。包括非葡萄糖氧化酶缓冲液作为空白对照。 最终的葡萄糖氧化酶浓度应低两倍(即0至5mU / mL)。注意:高浓度的葡萄糖氧化酶可能会因Amplite Red(非荧光产物)的过氧化而导致荧光信号降低。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液(250X),100μLHRP储备液(50X)和500μL葡萄糖储备液(10X)加入4.3 mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为5 mL葡萄糖氧化酶(GO)工作溶液。 避光。

 

样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖氧化酶标准品和测试样品的布局。 GOS =葡萄糖氧化酶标准品(GOS1-GOS7,0.01至10mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
GOS1 GOS1
GOS2 GOS2
GOS3 GOS3    
GOS4 GOS4    
GOS5 GOS5    
GOS6 GOS6    
GOS7 GOS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
GOS1-GOS7 50ul 连续稀释(0.01至10 miU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 样品

1.根据表1和表2中提供的布局制备葡萄糖氧化酶标准品(GOS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.在葡萄糖氧化酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液,使总葡萄糖氧化酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.将反应在37°C孵育10至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm)监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 然而,与荧光读数相比,吸收检测具有更低的灵敏度。

 

参考文献

A reassessment of the carnivorous status of salmonids: Hepatic glucokinase is expressed in wild fish in Kerguelen Islands
Authors: Lucie Marandel, Philippe Gaudin, Frančois Guéraud, Stéphane Glise, Alexandre Herman, Elisabeth Plagnes-Juan, Vincent Véron, Stéphane Panserat, Jacques Labonne
Journal: Science of The Total Environment (2018): 276–285

Overcoming 5-Fu resistance in human non-small cell lung cancer cells by the combination of 5-Fu and cisplatin through the inhibition of glucose metabolism
Authors: Jun-gang Zhao, Kai-ming Ren, Jun Tang
Journal: Tumor Biology (2014): 12305–12315

 

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产品名称 货号
Amplite 荧光法赖氨酰氧化酶(LOX)检测试剂盒 Cat#15255
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说明书
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Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光 货号11301-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光     货号11301 货号 11301 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的葡萄糖检测的试剂盒,髓过氧化物酶(MPO)是一类具有过氧化物酶活性的绿色血红素蛋白,大量存在于中性粒细胞和单核细胞中。它可以催化来自细胞毒素酸或者其他中间产物的双氧水或者卤化物反应,在氧依赖性杀死肿瘤细胞和微生物过程扮演着重要的角色。MPO的缺乏症是一种遗传性的酶缺乏,诱发免疫缺陷。因此治疗MPO的抑制剂具有很大的发展前景。Amplite髓过氧化物酶检测试剂盒能提供一种快速灵敏的检测方法来测定溶解状态或者细胞裂解液中的MPO。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。这个试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测到或者被吸收酶标仪(576nm)检测到。通过Amplite 荧光髓过氧化物酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到5ng/ml的髓过氧化物酶。本试剂盒可以自动的高通量筛选MPO的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.MPO标准品或测试样品(50μL)
2.添加MPO工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度(截止570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液,pH7.4。

1.2 H2O2储备溶液(500X,10 mM):
将10μL的3%H2O2(0.88M,组分C)加入870μL的测定缓冲液(组分B)中。注意:稀释的H2O2溶液不稳定。应丢弃未使用的部分。

1.3 髓过氧化物酶(MPO)标准溶液(200 mU / mL):
将50μL测定缓冲液(组分B)加入到髓过氧化物酶标准品(组分D)的小瓶中。注意:一个小瓶含有约5 – 10 mU的髓过氧化物酶。

2. HRP库存解决方案(50X):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶标准溶液(100 U / mL):
将1mL测定缓冲液加入葡萄糖氧化酶小瓶(组分D)中。

4.葡萄糖原液(10X):
将5mL测定缓冲液加入葡萄糖小瓶(组分F)中。

 

2.标准溶液

MPO标准
将20μL200mU / mL MPO标准溶液加入380μL测定缓冲液(组分B)中,得到10 mU / mL MPO标准溶液(MPO7)。 取10 mU / mL MPO标准溶液进行1:3连续稀释,得到剩余的系列稀释MPO标准品(MPO6 – MPO1)。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite 红色储备液(250X)和10μLH2O2(500X)加入5mL测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.03mL MPO工作溶液。 避光。

 

样品分析

表1. 96孔固体黑色微孔板中MPO标准品和测试样品的布局。 MPO =髓过氧化物酶标准品(MPO1-MPO7,0.01至10mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
MPO1 MPO1
MPO2 MPO2
MPO3 MPO3    
MPO4 MPO4    
MPO5 MPO5    
MPO6 MPO6    
MPO7 MPO7    

表2.每个孔的试剂组成。 注意,由于Amplite Red底物(非荧光产物)的过度氧化,高浓度的MPO可能导致荧光信号降低。

容积 试剂
MPO1-MPO7 50ul 连续稀释(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备髓过氧化物酶标准品(MPO),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向髓过氧化物酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMPO工作溶液,使总MPO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLMPO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm,截止= 570nm)监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有更低的灵敏度。

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光 Cat#15280
Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光 Cat#15281
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11306

说明书
Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光 .pdf

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光 货号11302-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光     货号11302 货号 11302 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒,谷氨酸氧化酶属于氧化还原酶的一类,特别能对带有CH-NH2基团供氧受体起反应。它是一种能特异催化水中或者氧气中的L-谷氨酸的酶,可以通过氧化脱氨形成酮戊二酸,氨和过氧化氢。Amplite谷氨酸氧化酶荧光检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法,来检测溶解状态下或者细胞裂解液中的谷氨酸氧化酶。在分析中,L-谷氨酸可以通过谷氨酸氧化酶被氧化成酮戊二酸、氨或者过氧化氢。L-丙氨酸和L-谷氨酸-丙酮酸也参与了这个转氨酶反应,导致多次循环反应,因此显著的增加双氧水的产出。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测,或者使用酶标仪(576nm)检测。Amplite荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到40U/ml的谷氨酸氧化酶。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.谷氨酸氧化酶标准品或测试样品(50μL)
2.添加谷氨酸氧化酶工作液(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540 / 590nm处读取荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分F)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液,pH7.4。

1.2 HRP库存解决方案(400X):
将200μL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

1.3 谷氨酸储备溶液(400X):
将1.0mL ddH 2 O加入到谷氨酸小瓶(组分D)中以制备400X谷氨酸储备溶液。

1.4 谷氨酸氧化酶(GO)标准溶液(150 mU / mL):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入到谷氨酸氧化酶标准品(冻干,组分E)的小瓶中以制备150mU / mL谷氨酸氧化酶(GO)标准溶液。

 

2.标准溶液

谷氨酸氧化酶标准
将30μL150mU/ mL GO标准溶液加入420μL测定缓冲液(组分B)中,得到10mU / mL GO标准溶液(GO7)。 取10 mU / mL GO标准溶液进行1:3连续稀释,得到剩余的连续稀释的GO标准品(GO6-GO1)。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液(250X),12.5μLHRP储备溶液(400X)和12.5μL谷氨酸储备溶液(400X)加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为5.07 mL谷氨酸氧化酶工作溶液(GO工作溶液),避光。

 

样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中GO标准品和测试样品的布局。 GO =谷氨酸氧化酶标准品(GO1-GO7,0.01至10mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
GO1 GO1
GO2 GO2
GO3 GO3    
GO4 GO4    
GO5 GO5    
GO6 GO6    
GO7 GO7    

表2.每个孔的试剂组成。 较高浓度的GO可能由于Amplite Red(对非荧光产物)的过度氧化而导致荧光信号降低

容积 试剂
GO1-GO7 50ul 连续稀释(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GO标准品(GO),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向GO标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液,使总GO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm),截止= 570nm监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake
Authors: Feng Li, Yangduo Kuang, Na Liu, Fei Ge
Journal: Science of The Total Environment (2019)

 

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说明书
Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光 .pdf

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光 货号11304-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 红色荧光     货号11304 货号 11304 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒,XO(黄嘌呤氧化酶)是一种能催化次黄嘌呤到黄嘌呤或者更进一步催化黄嘌呤到尿酸的酶。在嘌呤的分解代谢扮演着重要角色。XO通常能在肝脏或者空肠检测到。在重度肝损伤,XO释放到血液中,因此血液中XO检测试验可以用来确定肝脏损伤的发生。黄嘌呤尿是一种少见遗传病,缺少XO导致血中高浓度黄嘌呤引起肾衰竭等健康疾病。Amplite XO检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法,来检测XO的活性。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。在实验分析种,XO氧化嘌呤碱基,次黄嘌呤、黄嘌呤转变成尿酸或者超氧化物,后者又自发的降解为双氧水。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测到或者被酶标仪(576nm)检测。Amplite黄嘌呤氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到0.15mU/ml的XO。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.XO标准品或测试样品(50μL)
2.添加XO工作溶液(50μL)
3.在室温下孵育15-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度(截止570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分F)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH = 7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液,pH = 7.4。

2. HRP库存解决方案(500X):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

3.黄嘌呤氧化酶(XO)标准溶液(1 U / mL)
将200μL测定缓冲液(组分B)加入黄嘌呤氧化酶标准品(组分E)的小瓶中。

 

2.标准溶液

XO标准
将10μL1U/ mL XO标准溶液加入990μL测定缓冲液(组分B)中以制备10mU / mL XO标准溶液(XO7)。 进行1:3连续稀释,得到剩余的连续稀释的XO标准品(XO6-XO1)。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备溶液(250X),10μLHRP储备溶液(500X)和50μL黄嘌呤(100X,组分D)加入5mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为 5.08mL黄嘌呤氧化酶(XO)工作溶液,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中XO标准品和测试样品的布局

BL BL TS TS
XO1 XO1
XO2 XO2
XO3 XO3    
XO4 XO4    
XO5 XO5    
XO6 XO6    
XO7 XO7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
XO1-XO7 50ul 连续稀释(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 样品

1.根据表1和表2中提供的布局,将XO标准品(XO),空白对照(BL)和测试样品(TS)制备成固体黑色96孔微孔板。对于384孔板,使用25μL 每孔试剂代替50μL。

2.向XO标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLXO工作溶液,使总XO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLXO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应15至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm),截止= 570nm监测荧光强度。

 

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

 

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Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光 货号11403-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光     货号11403 货号 11403 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒,胆碱是一种强有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中,是机体可变甲基的一个来源而作用于合成甲基的产物,同时又是乙酰胆碱的前体。乙酰胆碱(AcetylCholine,ACh)是一种神经递质,能特异性的作用于各类胆碱受体,在组织内迅速被胆碱酯酶破坏,其作用广泛,选择性不高。在神经细胞中,乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶(胆碱乙酰化酶)的催化作用下合成的。胆碱和乙酰胆碱在许多生物学过程中发挥重要的作用。Amplite乙酰胆碱检测试剂盒 *红色荧光* 为定量检测胆碱提供了一种最灵敏的方法。本试剂盒使用Amplite Red对氧化酶介导的酶偶联反应产物胆碱进行定量检测。Amplite Red的红色荧光强度与胆碱的量成比例关系。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒。

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ACh工作溶液(50μL)
2.添加ACh标准品或ACh测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中以制备250X Amplite Red原液。

2.乙酰胆碱标准溶液(50 mM):
将200μLddH2O加入到乙酰胆碱标准品(组分C)的小瓶中以制备50mM乙酰胆碱标准溶液。

 

2.标准溶液

乙酰胆碱标准
将20μL50mM乙酰胆碱标准溶液加入到980μL测定缓冲液(组分D)中以产生1000μM乙酰胆碱标准溶液。 取1000μM乙酰胆碱标准品,在分析缓冲液(组分D)中进行1:10,得到100μM乙酰胆碱标准品(AS7)。 取100μM乙酰胆碱标准品(AS7)和1:3连续稀释液,用分析缓冲液(组分D)连续稀释乙酰胆碱标准品(AS6-AS1)。 注意:稀释的乙酰胆碱标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

1.将5mL测定缓冲液(组分D)加入乙酰胆碱探针(组分B)瓶中并充分混合。

2.将20μL250XAmplite Red 储备溶液加入乙酰胆碱探针溶液瓶中,制成乙酰胆碱(ACh)工作溶液。 注意:应立即使用乙酰胆碱(ACh)工作溶液并避光。 测定背景将随着更长的储存时间而增加。

点击查看样品制备方案

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中乙酰胆碱标准品和测试样品的布局。 AS =乙酰胆碱标准品(AS1-AS7,0.14至100μM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(0.14至100μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备乙酰胆碱标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意:根据需要处理细胞或组织样本。

2.向乙酰胆碱标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,使总乙酰胆碱测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL乙酰胆碱(ACh)工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)的荧光酶标仪监测荧光增加。

 

参考文献

Effect of Royal Jelly on Mouse Isolated Ileum and Gastrointestinal Motility
Authors: Shino Miyauchi-Wakuda, Satomi Kagota, Kana Maruyama-Fumoto, Hirokazu Wakuda, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Journal of Medicinal Food (2019)

Fermented rice peptides attenuate scopolamine-induced memory impairment in mice by regulating neurotrophic signaling pathways in the hippocampus
Authors: Henry M Corpuz, Hiroshi Fujii, Soichiro Nakamura, Shigeru Katayama
Journal: Brain Research (2019): 146322

Royal jelly increases peripheral circulation by inducing vasorelaxation through nitric oxide production under healthy conditions
Authors: Yaoyue Liang, Satomi Kagota, Kana Maruyama, Yuri Oonishi, Shino Miyauchi-Wakuda, Yoshihiko Ito, Shizuo Yamada, Kazumasa Shinozuka
Journal: Biomedicine & Pharmacotherapy (2018): 1210–1219

Hepatic vagus nerve regulates Kupffer cell activation via α7 nicotinic acetylcholine receptor in nonalcoholic steatohepatitis
Authors: Takahiro Nishio, Kojiro Taura, Keiko Iwaisako, Yukinori Koyama, Kazutaka Tanabe, Gen Yamamoto, Yukihiro Okuda, Yoshinobu Ikeno, Kenji Yoshino, Yosuke Kasai
Journal: Journal of Gastroenterology (2017): 1–12

Protective Effect of α-Lipoic Acid against α-Cypermethrin-Induced Changes in Rat Cerebellum
Authors: H Elsawy, MA Al-Omair, A Sedky, L Al-Otaibi
Journal: Journal of Chemical Neuroanatomy (2017)

Spirulina maxima Extract Ameliorates Learning and Memory Impairments via Inhibiting GSK-3β Phosphorylation Induced by Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β 1–42 in Mice
Authors: Eun-Jeong Koh, Kui-Jin Kim, Ji-Hyeon Song, Jia Choi, Hyeon Yong Lee, Do-Hyung Kang, Ho Jin Heo, Boo-Yong Lee
Journal: International Journal of Molecular Sciences (2017): 2401

Anethole restores delayed gastric emptying and impaired gastric accommodation in rodents
Authors: Teita Asano, Shuji Aida, Shintaro Suemasu, Tohru Mizushima
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 125–130

Dietary and donepezil modulation of mTOR signaling and neuroinflammation in the brain
Authors: Kalavathi Dasuri, Le Zhang, Sun OK Fernandez Kim, Annadora J Bruce-Keller, Jeffrey N Keller
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease (2016): 274–283

Dissolved organic matter or salts change the bioavailability processes and toxicity of the nanoscale tetravalent lead corrosion product PbO2 to medaka fish
Authors: Chun-Wei Chiang, Ding-Quan Ng, Yi-Pin Lin, Pei-Jen Chen
Journal: Environmental Science & Technology (2016): 11292–11301

Functionalised dihydroazo pyrimidine derivatives from Morita–Baylis–Hillman acetates: synthesis and studies against acetylcholinesterase as its inhibitors
Authors: Eeda Koti Reddy, C Remya, Ayyiliath M Sajith, KV Dileep, C Sadasivan, Shaik Anwar
Journal: RSC Advances (2016): 77431–77439

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光 货号11503-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光    货号11503 货号 11503 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3264
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物,是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多与哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学最有趣的方面是最近的报告,即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力,有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性,当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式,与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H2O2反应混合物(50μL)

2.加入H2O2标准品或测试样品(50μL)

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm (cutoff=515nm)处检测荧光强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

 

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO(组分 D)加入 OxiVision Green 过氧化氢探针(组分 A)的小瓶中,制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液,注意避光。

2. H2O2 标准溶液(20 mM)
将 22.7 μL 的 3% H2O2(0.88 M,组分 B)加入 977 μL 的 Assay Buffer(组分 C)中,制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer(组分 C)中,得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释,以得到含有测定缓冲液(组分 C)的系列稀释的 H2O2 标准品(HS1 – HS7)。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

 

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品(HS1 – HS7,300 至 0.3 μM); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
HS1 HS1
HS2 HS2
HS3 HS3    
HS4 HS4    
HS5 HS5    
HS6 HS6    
HS7 HS7    

表2. 每孔试剂组成

容积 试剂
HS1-HS7 50ul 连续稀释(300至0.3μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板,将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中,总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟,避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10,Em= 520 ± 10 nm(最佳 Ex/Em = 490/525 nm,截止 = 515 nm)检测荧光强度。

 

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞,用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板,添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

 

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

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Journal: PloS one (2018): e0203466

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Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

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Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

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Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

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说明书
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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光 货号11553-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光     货号11553 货号 11553 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 3924
Ex (nm) 648 Em (nm) 668
分子量 溶剂
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简要概述

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒,过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比,过氧化酶也更便宜;其主要缺点是在保护剂(例如叠氮化钠)存在的条件下溶解性低;而在低浓度下,过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析检测方案。本试剂盒使用Amplite IR,HRP近红外荧光底物。Amplite IR是过氧化酶的显色底物,它比H2O2和过氧化酶,及其它的过氧化酶的显色底物(例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue)具有更高的灵敏度。Amplite IR可产生在647 nm具有最大吸收光,在670 nM处具有最大激发光的底物,这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小,在600nm处几乎没有光吸收。本试剂盒可以用于ELISAs,酶促反应动力学分析,氧化酶抑制剂高通量筛选等。本试剂盒经过最优化处理,并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。 

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适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 647 ± 5 nm
推荐孔板: 透明底板
荧光酶标仪  
激发: 640nm
发射: 680nm
cutoff: 665nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备过氧化物酶工作溶液(50μL)
2.添加HRP标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 640/680 nm处的荧光强度(截止= 665 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Amplite IR过氧化物酶底物储备液(100X):
将250μLDMSO(组分E)加入到Amplite IR过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中以制备100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液。

1.2 HRP标准溶液(20 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分C)加入到辣根过氧化物酶(组分D)的小瓶中以制备20U / mL HRP标准溶液。

1.3 H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中以制备20mM H2O2储备溶液。 注意:稀释的H2O2溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

HRP标准
将15μL20U / mL HRP标准溶液加入985μL测定缓冲液(组分C)中,得到300 mU / mL HRP标准溶液(SD7)。 取300 mU / mL HRP标准溶液(SD7),进行1:3连续稀释,得到连续稀释的HRP标准品(SD6 – SD1)和分析缓冲液(组分C)。

 

3.工作溶液

将50μL的100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H2O2储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液(组分C)中以制备过氧化物酶工作溶液,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品(SD1-SD7,0.41至300mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.41至300 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL过氧化物酶工作溶液,使总过氧化物酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL过氧化物酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 600-650nm,发射= 650-690nm(最佳Ex / Em = 640 / 680nm,截止= 665nm)监测荧光增加。 注意:也可将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在647±5nm波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216

Horseradish peroxidase-driven fluorescent labeling of nanotubes with quantum dots
Authors: Didenko VV, Baskin DS.
Journal: Biotechniques (2006): 295

Recent advances in catalytic peroxidase histochemistry
Authors: Krieg R, Halbhuber KJ.
Journal: Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) (2003): 547

Vesicular transport route of horseradish C1a peroxidase is regulated by N- and C-terminal propeptides in tobacco cells
Authors: Matsui T, Nakayama H, Yoshida K, Shinmyo A.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2003): 517

Development of a novel enzyme/prodrug combination for gene therapy of cancer: horseradish peroxidase/indole-3-acetic acid
Authors: Greco O, Folkes LK, Wardman P, Tozer GM, Dachs GU.
Journal: Cancer Gene Ther (2000): 1414

Preparation, morphological characterization, and activity of thin films of horseradish peroxidase
Authors: Vianello F, Zennaro L, Di Paolo ML, Rigo A, Malacarne C, Scarpa M.
Journal: Biotechnol Bioeng (2000): 488

Synthesis and purification of horseradish peroxidase-labeled oligonucleotides for tyramide-based fluorescence in situ hybridization
Authors: van Gijlswijk RP, van de Corput MP, Bezrookove V, Wiegant J, Tanke HJ, Raap AK.
Journal: Histochem Cell Biol (2000): 175

Evidence for free radical formation during the oxidation of 2′-7′-dichlorofluorescin to the fluorescent dye 2′-7′-dichlorofluorescein by horseradish peroxidase: possible implications for oxidative stress measurements
Authors: Rota C, Chignell CF, Mason RP.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 873

In situ identification of cyanobacteria with horseradish peroxidase-labeled, rRNA-targeted oligonucleotide probes
Authors: Schonhuber W, Zarda B, Eix S, Rippka R, Herdman M, Ludwig W, Amann R.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 1259

Relative number of cells projecting from contralateral and ipsilateral nucleus isthmi to loci in the optic tectum is dependent on visuotopic location: horseradish peroxidase study in the leopard frog
Authors: Dudkin EA, Gruberg ER.
Journal: J Comp Neurol (1999): 212

 

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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11552
Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11551
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说明书
Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光 .pdf

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 货号11953-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

货号 11953 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为最多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *绿色荧光* 用FDP,一种灵敏的碱性磷酸酶绿色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必需组分,包括我们最佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度(Cutfoff = 515 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 FDP(250X):
将100μLDMSO(组分D)加入到FDP小瓶(组分A)中以制备250X FDF储备溶液。 应立即使用FDP储备溶液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液(100 U / mL):
将100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水加入碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位)中,得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,进行1:10(AS7),然后在H2O-0.1%BSA中进行1:3连续稀释,得到碱性磷酸酶标准品(AS6-AS1)的连续稀释液。

 

3.工作溶液

将20μL250XFDP储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。

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样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1至100 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:根据需要准备细胞或组织样本。应丢弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。可选:在30分钟孵育结束时,加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

1.4用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意:由于生长培养基与FDP的干扰,重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。 可选:在30分钟孵育结束时加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

2.6用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

参考文献

Development and validation of bioengineered intestinal tubules for translational research aimed at safety and efficacy testing of drugs and nutrients
Authors: Paulus GM Jochems, Jeroen van Bergenhenegouwen, Anne Metje van Genderen, Sophie T Eis, Livia JF Wilod Versprille, Harry J Wichers, Prescilla V Jeurink, Johan Garssen, Rosalinde Masereeuw
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Rapid detection of Escherichia coli in beverages using genetically engineered bacteriophage T7
Authors: Nicharee Wisuthiphaet, Xu Yang, Glenn M Young, Nitin Nitin
Journal: AMB Express (2019): 55

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

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Journal: (2012)

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Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

 

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11954
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说明书
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 .pdf