Amplite 荧光法单胺氧化酶检测试剂盒 红色荧光

	货号	11303	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法单胺氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒，单胺氧化酶（MAO）属于核黄素含氨氧化酶，它可以催化单氨的氧化。它存在于许多组织包括肝脏，肠粘膜和神经所含线粒体的外膜上。在人体内有两种类型的MAO：MAO-A和MAO-B。MAO-A在摄取的食物中单氨的代谢过程中非常重要。MAOs在神经递质失活过程扮演者主要角色。在抑郁症，精神分裂症，药物滥用，注意力不集中，偏头疼或者性早熟疾病中，都伴随着MAO的功能紊乱。Amplite单胺氧化酶检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法，来检测血液样本或者其他生物样本内的单胺氧化酶或者氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)的活性。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测到或者被酶标仪（576nm）检测。Amplite 单胺氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到10U／ml的单胺氧化酶。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法单胺氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.MAO标准品或测试样品（50μL）
2.添加MAO工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度（截止570 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite TM Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH7.4。

2. HRP股票解决方案（200X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

3.血浆胺氧化酶（PAO）标准溶液（20 U / mL）：
将125μL测定缓冲液（组分B）加入等离子体胺氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。

2.标准溶液

谷氨酸氧化酶标准
将30μL150mU/ mL GO标准溶液加入420μL测定缓冲液（组分B）中，得到10mU / mL GO标准溶液（GO7）。 取10 mU / mL GO标准溶液进行1：3连续稀释，得到剩余的连续稀释的GO标准品（GO6-GO1）。

3.工作溶液

将20μLDelterite Red原液（250X），25μLHRP储备液（200X）和25μLMAO底物（组分D）加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为5.07 mL 单胺氧化酶（MAO）工作溶液,避光。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中PAO标准品和测试样品的布局。 PAO =血浆胺氧化酶标准品（PAO1-PAO7,1至1000mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表2中提供的布局，将血浆胺氧化酶标准品（PAO），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备到96孔固体黑色微孔板中。对于384孔板，使用25每孔μL试剂代替50μL。

2.在PAO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMAO工作溶液，使总PAO测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μLMAO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570，发射= 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm，截止= 570nm）监测荧光强度。注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。然而，与荧光读数相比，吸收检测具有更低的灵敏度。

参考文献

An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults on an Energy Restricted Diet in a Randomized Controlled Trial
Authors: Idoia Ibero-Baraibar, Aurora Perez-Cornago, Maria J Ramirez, J Alfredo Martínez, M Angeles Zulet
Journal: The Journal of nutrition (2016): 897S–904S

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	Ex (nm)	571	Em (nm)	584
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤氧化酶（XO）是一种催化次黄嘌呤氧化成黄嘌呤的酶，可以进一步催化黄嘌呤氧化成尿酸。它在嘌呤的分解代谢中起重要作用。黄嘌呤氧化酶通常存在于肝脏和空肠中。在严重肝损伤期间，黄嘌呤氧化酶被释放到血液中，因此XO的血液测定是确定肝脏损伤是否已经发生的一种方法。Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒为黄嘌呤氧化酶活性的测量提供了一种快速，超灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。在该测定中，黄嘌呤氧化酶催化嘌呤碱基，次黄嘌呤或黄嘌呤氧化成尿酸和超氧化物，其自发降解为过氧化氢（H₂O₂）。该试剂盒使用我们的Amplite Red基板，使用吸光度酶标仪可以在~570 nm处轻松读取颜色信号。使用Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至0.3 mU / mL的黄嘌呤氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加XO标准品和/或测试样品（50μL）
2.准备并添加XO Assay工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在OD比为570 / 610nm时读取吸光度增加

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意：避免反复冻融循环。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液（pH 7.4）。

1.2 HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入HRP小瓶（组分C）中。注意：未使用的HRP储备溶液（500X）应分成一次性使用的等分试样并储存在-20 oC。

1.3 黄嘌呤氧化酶（XO）原液：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。注意：未使用的XO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

2.标准溶液

黄嘌呤氧化酶标准
将10μL1U/ mL XO储备液加入990μL分析缓冲液（组分B）中，制成10 mU / mL XO标准溶液。进行1：3连续稀释，得到约10,3,1,0.3,0.1， 0.03,0.01和0mU / mL连续稀释的XO标准品。

3.工作溶液

表1.一个透明底96孔微孔板的XO分析工作溶液（2X）

样品分析

表2.在透明底96孔微孔板中的黄嘌呤氧化酶标准品和测试样品的布局。 XOS =黄嘌呤氧化酶标准品（XOS1-XOS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

表3.每个孔的试剂组成

注意：黄嘌呤氧化酶标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。

1.如表2和3中所述，将XO标准品和含有XO的测试样品加入白色透明底部微孔板中。

2.将50μLXOAssay工作溶液加入XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（表2），使总XO测定体积为100μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用吸光度读数器监测信号强度，OD比为570 / 610nm。

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

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简要概述

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒，过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小，因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比，过氧化酶也更便宜；其主要缺点是在保护剂（例如叠氮化钠）存在的条件下溶解性低；而在低浓度下，过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA（酶联免疫吸附实验）、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析检测方案。本试剂盒使用Amplite IR，HRP近红外荧光底物。Amplite IR是过氧化酶的显色底物，它比H2O2和过氧化酶，及其它的过氧化酶的显色底物（例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue）具有更高的灵敏度。Amplite IR可产生在647 nm具有最大吸收光，在670 nM处具有最大激发光的底物，这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小，在600nm处几乎没有光吸收。本试剂盒可以用于ELISAs，酶促反应动力学分析，氧化酶抑制剂高通量筛选等。本试剂盒经过最优化处理，并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备过氧化物酶工作溶液（50μL）
2.添加HRP标准品和/或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 640/680 nm处的荧光强度（截止= 665 nm）

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Amplite IR过氧化物酶底物储备液（100X）：
将250μLDMSO（组分E）加入到Amplite IR过氧化物酶底物（组分A）的小瓶中以制备100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液。

1.2 HRP标准溶液（20 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分C）加入到辣根过氧化物酶（组分D）的小瓶中以制备20U / mL HRP标准溶液。

1.3 H₂O₂储备溶液（20 mM）：
将22.7μL的3％H₂O₂（0.88M，组分B）加入977μL的测定缓冲液（组分C）中以制备20mM H₂O₂储备溶液。 注意：稀释的H₂O₂溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

2.标准溶液

HRP标准
将15μL20U / mL HRP标准溶液加入985μL测定缓冲液（组分C）中，得到300 mU / mL HRP标准溶液（SD7）。 取300 mU / mL HRP标准溶液（SD7），进行1：3连续稀释，得到连续稀释的HRP标准品（SD6 – SD1）和分析缓冲液（组分C）。

3.工作溶液

将50μL的100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H₂O₂储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液（组分C）中以制备过氧化物酶工作溶液,避光。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品（SD1-SD7,0.41至300mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品（SD），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL过氧化物酶工作溶液，使总过氧化物酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μL过氧化物酶工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 600-650nm，发射= 650-690nm（最佳Ex / Em = 640 / 680nm，截止= 665nm）监测荧光增加。 注意：也可将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在647±5nm波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

参考文献

Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216

Horseradish peroxidase-driven fluorescent labeling of nanotubes with quantum dots
Authors: Didenko VV, Baskin DS.
Journal: Biotechniques (2006): 295

Recent advances in catalytic peroxidase histochemistry
Authors: Krieg R, Halbhuber KJ.
Journal: Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) (2003): 547

Vesicular transport route of horseradish C1a peroxidase is regulated by N- and C-terminal propeptides in tobacco cells
Authors: Matsui T, Nakayama H, Yoshida K, Shinmyo A.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2003): 517

Development of a novel enzyme/prodrug combination for gene therapy of cancer: horseradish peroxidase/indole-3-acetic acid
Authors: Greco O, Folkes LK, Wardman P, Tozer GM, Dachs GU.
Journal: Cancer Gene Ther (2000): 1414

Preparation, morphological characterization, and activity of thin films of horseradish peroxidase
Authors: Vianello F, Zennaro L, Di Paolo ML, Rigo A, Malacarne C, Scarpa M.
Journal: Biotechnol Bioeng (2000): 488

Synthesis and purification of horseradish peroxidase-labeled oligonucleotides for tyramide-based fluorescence in situ hybridization
Authors: van Gijlswijk RP, van de Corput MP, Bezrookove V, Wiegant J, Tanke HJ, Raap AK.
Journal: Histochem Cell Biol (2000): 175

Evidence for free radical formation during the oxidation of 2′-7′-dichlorofluorescin to the fluorescent dye 2′-7′-dichlorofluorescein by horseradish peroxidase: possible implications for oxidative stress measurements
Authors: Rota C, Chignell CF, Mason RP.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 873

In situ identification of cyanobacteria with horseradish peroxidase-labeled, rRNA-targeted oligonucleotide probes
Authors: Schonhuber W, Zarda B, Eix S, Rippka R, Herdman M, Ludwig W, Amann R.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 1259

Relative number of cells projecting from contralateral and ipsilateral nucleus isthmi to loci in the optic tectum is dependent on visuotopic location: horseradish peroxidase study in the leopard frog
Authors: Dudkin EA, Gruberg ER.
Journal: J Comp Neurol (1999): 212

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