NEBNext® 文库定量试剂盒 货 号 #E7630L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/文库定量

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#E7630L
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NEBNext 文库稀释缓冲液

产品特性

   提供更精准可靠的定量结果

   适用于不同方法制备的多种插入片段大小及 GC 含量的文库

   只需要 4 个标准样品,每个试剂盒可定量的文库更多

   提供使用方便的文库稀释缓冲液

   NEBNext 文库定量预混液只需要加入引物

   无论插入片段大小,所有的文库均可使用同一延伸时间

   文库定量结果可以通过 NEB 线上工具 NEBioCalculator.neb.com 轻松计算

   试剂盒中包含 ROX,方便需要参照染料的 qPCR 仪器进行标准化

概述

二代测序文库的精确定量对于每次测序得 到 的 数 据 量 及 数 据 的 质 量 至 关 重 要 。 特 别是  Illumina 平台,精确的文库定量对于优化簇密度,从而得到最好的测序结果非常重要。实时定量  PCR(qPCR) 是最精确及有效的文库定量方法,与测量总核苷酸浓度的电泳法和分光光度计法相比,qPCR 有更高的一致性和重复性。基于扩增的定量方法只测量包含两个接头序列的分子,从而提供更为精准的可测序文库分子的浓度。

NEBNext  文库定量试剂盒对二代测序中基于 qPCR 的文库定量提供了显着的提升。NEBNext  文库定量试剂盒优化了针对 Illumina 平台基于 qPCR 定量组分。NEBNext  文库定量试剂盒包含 P5 和 P7 Illumina 接头序列的引物,以及一组高质量预稀释的 DNA 标准品,对 150-1000 bp 之间稀释的 DNA 文库进行可靠的定量。

 

图 1. 使用 NEBNext 文库定量试剂盒定量文库大小浓度,实现最佳簇密度。

NEBNext® 文库定量试剂盒            货   号                  #E7630L

使用 NEBNext,可以从具有广泛的文库大小 和 GC 含量的量化文库获得最佳簇密度。 使用 NEBNext 文库定量试剂盒定量来自指定来源的 310-963bp 的文库,然后稀释至8pM 并加载到 MiSeq(v2 化学; MCS v2.4.1.3) 上。文库浓度范围为 7-120 nM,文库的原始簇密度为 965-1300 k / mm 2(ave。= 1199)。 
 
图 2.  使用 NEBNext 文库定量试剂盒,文库定量结果一致性更好。
NEBNext® 文库定量试剂盒            货   号                  #E7630L
 文库定量试剂盒(通用),对 3 个 340-400 bp 的文库进行定量重复 2 – 4 次。 如图所示NEBNext 试剂盒(橙色)比 Kapa 试剂盒 (灰色)对文库浓度定量的一致性有显著改善。
 

操作流程图

NEBNext® 文库定量试剂盒            货   号                  #E7630L

 

文库定量试剂盒组份

 –  NEBNext 文库定量预混液 

–  NEBNext 文库定量引物预混液 
–  NEBNext 文库定量 DNA 标准品 1–4 
–  ROX (低) 和 ROX (高) 
–  NEBNext 文库稀释缓冲液

NEBNext® 文库定量 DNA 标准品 货 号 #E7642S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E7642S
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NEBNext® 文库定量试剂盒

产品特点

与 NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)中的标准样品相同,为补充试剂

基于四个或六个标准样品的 qPCR 法文库定量
 

概述

 NEBNext® 文库定量 DNA 标准品包含六个标准样品,与 NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)一起使用,可建立从 100 pM 到 0.001 pM 的标准曲线。该标准品可作为 NEB #E7630L 中所含标准曲线试剂的补充装。NEB #E7630 产品说明书中包含了使用四个或六个标准样品设置标准曲线的详细步骤说明,从而为实验流程增添了灵活性。相较于同类型文库定量试剂盒,NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)提供了更简化的操作流程,并减少了批间差。

NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)的典型扩增和标准曲线
 NEBNext® 文库定量 DNA 标准品            货   号                  #E7642S
 
图 A 是 NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)在 Bio-Rad CFX96 Touch 上的典型结果,图 B 是 NEBNext® 文库定量试剂盒(Illumina®)在 Applied Biosystems 7500 Fast real-time qPCR instrument 上的典型结果。图左显示的是扩增曲线,图右显示的是标准曲线。两个仪器都使用了默认设置。ABI 7500 快速分析包含 1X ROX(低浓度)和 ROX 标准化。
 

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1 货 号 #E7300L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 (检索引物 1-48)
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概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化,在保证制备高产量和多样性的文库的同时,能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物,且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1            货   号                  #E7300L

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包含检索引物,且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 (检索引物 1-48)
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接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
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除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2            货   号                  #E7580L

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NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 货 号 #E7760L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E7760L
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38,099.00

#E7760S
24次反应
11,219.00

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NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒

NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠

 

概述

 在您的 RNA 测序实验中,是否对灵敏度和特异性有更高的要求?您的测序反应中是否有起始 RNA样本量非常低的情况?为了应对这些挑战,我们的二代测序 RNA 文库制备试剂盒在流程的每一步上都进行了配方的优化,使文库产量得到成倍的增长、起始样本量要求更低、PCR 循环数更少。这些试剂盒工作流程经过改进,更加适合于自动化操作。既有定向(链特异性,使用“dUTP 方法”)文库制备,又有非定向文库制备,还可提供 SPRISelect 磁珠进行片段筛选和纯化。

NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒            货   号                  #E7760L

NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠 货 号 #E7765L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E7765L
96次反应
42,299.00

#E7765S
24次反应
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NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 - 含纯化磁珠            货   号                  #E7765L