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EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211S

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概述

EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli RY 13（R.N. Yoshimori）克隆 EcoRI 修饰基因。 

反应条件

1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温
育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下，酶活只保留 50%。 

HpaII 甲基转移酶 货 号 #M0214S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

HpaII 甲基转移酶与 MspI 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧序列中的内侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从副流感嗜血杆菌（Haemophilus parainfluenzae）（ATCC 49669）克隆的 HpaII 修饰基因。 

反应条件

1X HpaII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HpaII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

MspI 甲基转移酶 货 号 #M0215S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

MspI 甲基转移酶与 HpaII 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧识别序列外侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从莫拉氏菌属（Moraxella species）（ATCC 49670）克隆的 MspI 修饰基因。 

反应条件

1X MspI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MspI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

HhaI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从溶血嗜血杆菌（Haemophilus haemolyticus） （ATCC 10014）克隆的 HhaI 修饰基因。 

反应条件

1X HhaI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HhaI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

25,000 units/ml。 

TaqI 甲基转移酶 货 号 #M0219S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

Taq I 甲基转移酶对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从水栖高温菌（Thermus aquatics）克隆的 Taq I 修饰基因。 

反应条件

1X CutSmart Buffer + SAM
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 80 μM SAM（随酶提供），65℃ 温育。 

注意事项

37℃ 条件下的活性为 25%。 

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 Taq I 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

AluI 甲基转移酶能对左侧序列中的胞嘧啶残基（C5）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus）（ATCC 21606）克隆的 AluI 修饰基因。 

反应条件

1X AluI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 AluI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 pTP166 载体，该载体含有从 E. coli（M. Marinus）克隆的 dam 修饰基因。 

反应条件

1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

8,000 units/ml。 

BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

BamHI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（N4）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从解淀粉芽孢杆菌 H（Bacillus amyloliquefaciens）（ATCC 49763）克隆的 BamHI 修饰基因。 

反应条件

1X BamHI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM DTT]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BamHI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

HaeIII 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（C5）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从埃及嗜血杆菌（Haemophilus aegyptius）（ATCC 11116）克隆的 HaeIII 修饰基因。 

反应条件

1X HaeIII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.5 @ 25℃），10 mM DTT]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

HaeIII 甲基转移酶能保护 DNA 不被 NotI切割。 

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                              收藏

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L

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#M0226L
500 units
3,409.00
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#M0226M
（高浓度5X）500 units
3,409.00
无
无
无
无
无

#M0226S
100 units
849.00
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有
有
无
无

#M0226V
50 units
449.00
有
有
有
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CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L

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特性

 阻止限制性内切酶的切割
 CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
 研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
 减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性 

概述

CpG 甲基转移酶（M.SssI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ …CG…3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株克隆有桑皱褶螺原体（Spiroplasma sp.）MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时，M.SssI 更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，会出现具有拓扑异构酶的活性。 

质保声明

CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

4,000 units/ml 和 20,000 units/ml（通过 λDNA检测）。 

注意事项

CpG 甲基转移酶（M.SssI）可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化，而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响（详见 315-317 页），故应使用 Mcr–、Mrr– 的 E. coli 菌株（例如，NEB #C2925）作为转化的宿主菌。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。