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Takara 6140 in vitro Transcription T7 Kit(for siRNA Synthesis) 50 Rxns酶试剂盒 – 修饰性PEG
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■ 制品内容 (50次量,20 μl反应体系) |
10×Transcription Buffer |
100 μl |
T7 RNA Polymerase (50 U/μl) |
100 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) |
25 μl |
ATP Solution (50 mM) |
100 μl |
GTP Solution (50 mM) |
100 μl |
CTP Solution (50 mM) |
100 μl |
UTP Solution (50 mM) |
100 μl |
RNase free DNase I (5 U/μl) |
200 μl |
Control Template (50 ng/μl) |
20 μl |
RNase T1 (100 U/μl) |
25 μl |
RNase T1 Dilution Buffer |
700 μl |
RNase free dH2O |
1 ml |
10×Annealing Buffer* |
500 μl |
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* 二条Oligo DNA退火时使用。 |
Buffer组成:100 mM Tris-HCl (pH8.0),500 mM CH3COOK,10 mM EDTA。 |
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■ 制品说明 |
本制品是利用T7 RNA Polymerase进行体外转录 (in vitro transcription),大量合成siRNA的试剂盒。试剂盒使用了T7 RNA Polymerase,以含有T7 Promoter序列的线型双链DNA为模板,可以对Promoter下游的DNA序列进行转录,高效合成单链RNA。试剂盒中附带有Control Template (线型Plasmid DNA),以20 ng的Control Template为模板,在20 μl的转录反应体系中,可以合成约10 μg的2 kb单链RNA。 另外,本试剂盒含有RNase T1,该酶可特异性切断单链RNA的鸟苷酸3’端的磷酸。体外转录反应后可以合成siRNA。 (注意) 本试剂盒适用于合成大量RNA,不推荐用于制作高比活性的RNA probe。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 实验操作注意 |
1. 反应体系中须严格注意不要混入RNase。 2. 实验器材 (如:枪头、Microtube等) 注意严格使用RNase Free用品。 3. 实验操作时请注意戴一次性手套,防止RNase污染。 |
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