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■ 产品简介 |
Capturem™ Streptavidin——利用链霉亲和素快速富集和纯化生物素化物质。 链霉亲和素是一种来源于链霉菌Streptomyces avidinii的细胞壁蛋白质,与生物素有非常强的亲和力,这一互作特性在生命科学领域被广泛应用于富集等相关研究。Capturem™ Streptavidin mini 纯化柱和96-well 纯化板是将链霉亲和素固定在高容量的Capturem膜上,从而在室温条件下就可以对生物素化的靶标实现快速、高质量的纯化和富集,整个操作从上样到洗脱仅需5~15分钟。此外,还可以利用Capturem™ Streptavidin来捕获或pull down靶标分子或复合物。 |
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■ 产品特点 |
· 简单、快速的操作流程:室温下操作即可,小量纯化仅需5 min,96-well板仅需15 min · 产物浓度高:少量的洗脱液即可实现高浓度洗脱 · 高质量:样品停留时间短,从而有效地防止了样品聚集、失活,或者样品中复合物解离 · 高重复性:每个纯化柱的纯化结果有高度的一致性 · 一次性使用:新型膜技术搭配一次性离心柱有效降低了污染和残留的风险 |
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■ 应用 |
· 生物素化蛋白质的纯化或富集 · Pull down与生物素化的配体相结合的蛋白质或oligo |
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Capturem Streptavidin对不同样品的载量和操作时间 |
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生物素标记的抗体 |
生物素标记的BSA |
生物素标记的ssDNA |
游离的生物素 |
纯化时间 |
Capturem Streptavidin mini纯化柱和96-well 纯化板 |
20-40 μg |
>15 μg |
1,000-1,500 ng |
>4,000 pmol |
15 分钟 |
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实验例 |
例1 |
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使用Capturem Streptavidin连续三次捕获抗体。图A–C.首先将含48 μg生物素化兔IgG的Binding Buffer上样至平衡好的Capturem Streptavidin spin column中,这时32.0 ± 1.4 μg (图B)的抗体被成功固定在膜上。然后洗涤一次,再将使用Binding Buffer稀释的含20%小鼠血清且同时加入spiked-in靶抗体(约100 μg山羊抗兔抗体)的杂交瘤培养基加入到Capturem Streptavidin spin column中,分别使用Binding Buffer和PBS先后洗涤两次,最后使用1.0 M甘氨酸洗脱3次,从生物素化的捕捉抗体上洗脱获得高纯度的靶抗体,收量约为42 ± 5 μg (图C)。 |
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例2 |
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Capturem Streptavidin 96-well纯化板具有高度重复性。分别对生物素化oligo(图A)和生物素化BSA(图B)进行8次技术重复上样,并使用离心的方法进行靶标捕获。通过测定样品上样前后的OD值来对结合的分子进行定量。捕获操作按照标准的流程进行,15 min之内完成。 |
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