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Human Cell-Free Protein Expression System
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3281	Human Cell-Free Protein Expression System	10 Rxns	￥2,237
Takara	3290	pT7-IRES His-N DNA	20 μg	￥1,502
Takara	3291	pT7-IRES His-C DNA	20 μg	￥1,502
Takara	3292	pT7-IRES Myc-N DNA	20 μg	￥1,502

■ 制品内容(Code No. 3281)

Cell Lysate＊1 100 μl Mixture-1  60 μl Mixture-2＊2 10 μl Mixture-3＊2 20 μl T7 RNA Polymerase (200 U/μl)  10 μl pT7-IRES Vector (0.5 μg/μl) 20 μl Control Vector＊3 (0.3 μg/μl) 5 μl

*1 现用现融解，使用微量移液器轻轻混合均匀并迅速使用，使用完毕立即置于-80℃保存。 注：虽然5次反复冻融基本不会造成产品性能下降，但建议小量分装保存。 *2 Mixture-2和Mixture-3中均含有蛋白质，其中Mixture-2中含有HN标签蛋白质，因此应避免剧烈搅拌或振荡。 *3 该质粒在pT7-IRES中插入了β-半乳糖苷酶基因。

■ 制品说明

Human Cell-Free Protein Expression System是利用人源细胞提取物的无细胞蛋白质合成系统。本系统中的Cell Lysate包含了所有体外蛋白质合成的必需因子(核糖体、翻译起始/延伸因子和tRNA等)。只需将携带靶基因的pT7-IRES Vector、T7 RNA Polymerase、Mixture-3(氨基酸和ATP等)和Mixture-2(翻译增强因子)加入到Cell Lysate中，就可以在一个反应管中完成从RNA转录到蛋白质合成的反应，操作十分简单。本制品具有反应体系小、反应速度快、可合成无细胞蛋白质的优点。 pT7-IRES Vector转录得到的目的RNA含有IRES序列，这段序列能够增强蛋白质翻译的起始。反应液中添加了翻译增强因子，在蛋白质合成过程中，它能够活化Cell Lysate中无活性的翻译起始因子，从而维持了稳定的翻译水平。本系统不仅提高了蛋白质合成的效率，弥补了哺乳类无细胞蛋白质合成系统翻译水平低的缺陷，而且能够合成超过150 kDa的高分子量蛋白质。 本系统适用于高通量的蛋白质合成反应，只需一步即可完成。由于毒性蛋白会抑制宿主细胞生长和功能，导致很难利用活细胞表达系统来合成毒性蛋白质，所以本系统尤其适用于合成毒性蛋白质。   * 3290/3291/3292与3281搭配使用，可表达带有His标签或Myc标签的蛋白质。   ■ 保存 3281：-80℃；3290、3291、3292：-20℃。

■ pT7-IRES Vector 的结构