上海金畔生物科技有限公司代理Takara Clontech酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
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| ■ 制品内容 (20 次量) |
| A-Tailing Enzyme (5 U/μl) |
10 μl |
| 10×A-Tailing Buffer |
100 μl |
| dNTP Mixture (each 2.5 mM) |
80 μl |
| A-Tailing Control Insert* (50 ng/μl) |
10 μl |
| Blunting Control Insert* (50 ng/μl) |
50 μl |
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| * A-Tailing Control Insert 和Blunting Control Insert各为5次使用量。 |
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| ■ 制品说明 |
| TaKaRa DNA A-Tailing Kit 是在平滑末端DNA片段的3’末端添加一个“A”尾的试剂盒，使用本制品可以使平滑末端的DNA片段进行TA克隆成为可能。与平滑末端的DNA片段克隆相比，TA克隆具有较高的克隆效率，可以大大提高实验的成功率。此外，本试剂盒中还含有A-Tailing Control Insert (500 bp) 和Blunting Control Insert (500 bp)，可以方便进行Control实验。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 用途 |
| 在平滑末端DNA片段的3’末端添加“A”尾后进行TA克隆。 |
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| ■ 注意事项 |
1. 为了提高加“A”反应效率，用于加“A”反应的末端平滑DNA片段应进行切胶回收的纯化处理，尽量避免引物等其它杂质的存在。切胶回收时可使用Takara凝胶回收试剂盒 (Code No.: 9762)。
2. 使用A-Tailing Control Insert进行TA克隆时，可以检测使用的T载体是否质量可靠；使用Blunting Control Insert进行TA克隆实验时，可以检测本试剂盒的加“A”反应性能。
3. 按照本实验操作进行连接后，直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时，需对连接液进行乙醇沉淀，纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 使用高效连接液Solution I 进行连接反应时请在25℃以下进行，温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时，可适当延长连接反应时间至数小时。 |
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