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TaKaRa Competent Cells BL21
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9126	TaKaRa Competent Cell BL21	100 μl x 10	￥347

■ 制品内容

TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl SOC Medium* 10 × 1 ml

*SOC Medium:          2%   Tryptone  0.5%   Yeast extract  10 mM   NaCl  2.5 mM   KCl  10 mM   MgSO4  10 mM   MgCl2  20 mM   Glucose

■ 制品说明

E.coli BL21来源于B株，为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。 本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达，但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外，不建议使用此菌株构建或制备质粒，因为它不是recA基因缺失型菌株。 注意：本制品不可用于电击法转化。   ■ 保存 -80℃。 注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。   ■ 质量控制 转入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。 转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA   ■ Genotype E.coli BL21: F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm   ■ 注意事项 1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。 2. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。 3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。 4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高，可能会降低转化效率。 5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。   ·L-broth : Ingredient per liter water     Tryptone 10 g     Yeast extract 5 g     NaCl 5 g     用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。   ·φb-broth: Ingredient per liter water     Tryptone 20 g     Yeast extract 5 g     MgSO4·7H2O 5 g       用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。 6. 稀释时，使用SOC培养基。 7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。