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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于Illumina测序平台: 模块和酶
NEBNext DNA 双链片段化酶® 收藏
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#M0348L
250 次反应
4,829.00
有
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无
有
#M0348S
50 次反应
1,229.00
有
有
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相关产品
NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2
特性
为二代测序制备双链 DNA
为构建文库制备双链 DNA 片段
为构建文库制备双链 DNA 片段
概述
NEBNext DNA 双链片段化酶是时间依赖型酶，能根据不同作用时间将 dsDNA 切割成 50 – 1,000 bp 片段。NEBNext DNA 双链片段化酶由两种酶组成，一种酶随机的在 dsDNA 上产生切刻，另一种酶识别切刻处并在对链进行切割，产生 dsDNA 片段。所得 DNA 片段含有极短突出末端，5´ 含磷酸基，3´ 含羟基。经过文库制备及测序验证，NEBNext DNA 双链片段化酶具有随机切割特性。比较使用该酶与使用机械法制备的基因组 DNA 文库，测序结果没有显示偏嗜性，测序覆盖也无区别。
图 1：大肠杆菌基因组 DNA 的片段化。用 NEBNext DNA 双链片段化酶将大肠杆菌基因组 DNA 在对应的时间内进行片段化，再用 MinElute ® 柱纯化。
来源
NEBNext DNA 双链片段化酶来源于两种不同 E. coli：一种融合表达有 MBP 和创伤弧菌核酸酶突变蛋白质（Vibrio vulnificus nuclease mutant protein），另一种融合表达有 MBP 和 T7 核酸内切酶突变蛋白质。
反应条件
1X NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2，需要时可以加入 100 μM MgCl2，37℃ 温育。
1X NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2
20 mM Tris-HCl
15 mM MgCl2
50 mM NaCl
0.1 mg/ml BSA
0.15% Triton® X-100
pH 7.5@25°C
15 mM MgCl2
50 mM NaCl
0.1 mg/ml BSA
0.15% Triton® X-100
pH 7.5@25°C
随酶提供
10X NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2
200 mM MgCl2
200 mM MgCl2
热失活
在有 50 mM DTT 的条件下，65℃ 加热 15 分钟。