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钙离子荧光探针Fura Red, AM *CAS 149732-62-7*
货号 | 21048 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 10×50 ug | 价格 | 3264 | |
Ex (nm) | 435 | Em (nm) | 639 | |
分子量 | 1088.99 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
钙离子荧光探针Fura Red, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,Fura Red是一种可见光可激发的fura-2类似物,当与单激发,绿色荧光钙指示剂一起使用时,通过显微光度法,成像或流式细胞术为单细胞中的钙离子比率测量提供了独特的可能性。 Fura Red AM是用于非侵入性细胞内负载的Fura Red的细胞渗透型。 Fura Red AM可以同时装入Fluo-3 AM,Fluo-8 AM或Cal-520 AM的细胞中。 组合两种钙染料的优点是可以使用具有较长激发波长的染料。 与使用用UV或近紫外光(例如Fura-2)激发的比率染料相比,这通常对细胞造成的伤害更小,因为可见光波长的光具有较低的光毒性。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针。
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钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 435,470nm |
发射: | 630,650nm |
cutoff: | Ex/Em = 435/630, cutoff 610. Ex/Em = 470/650, cut off 630 |
推荐孔板: | 黑色透明 |
读取模式: | 底读模式 |
产品说明书
参考文献
1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura Red,AM * CAS 149732-62-7 *储备液。
2.1Fura Red的量,AM * CAS 149732-62-7 *使用量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Fura Red,AM * CAS 149732-62-7 *与459.14μL无水DMSO混合。
3.用含有10μMFuraRed的HHBS制备2X工作溶液,AM * CAS 149732-62-7 * 4,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1Fura Red的最终孔内浓度,AM * CAS 149732-62-7 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度:0.04%
3.3最终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μL的Fura Red,AM * CAS 149732-62-7 *,25.6μL的10%Pluronic®F-127和256μL的25 mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议Fura Red的最终浓度,AM * CAS 149732-62-7 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的最终浓度调节至以下:5μM的Fura Red,AM * CAS 149732-62-7 *,0.04%Pluronic?F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 458/597 nm运行实验。
参考文献
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Journal: J Immunol Methods (2006): 220
Use of co-loaded Fluo-3 and Fura Red fluorescent indicators for studying the cytosolic Ca(2+)concentrations distribution in living plant tissue
Authors: Walczysko P, Wagner E, Albrechtova JT.
Journal: Cell Calcium (2000): 23
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Calcium transient alternans in blood-perfused ischemic hearts: observations with fluorescent indicator fura red
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IgG-induced Ca2+ oscillations in differentiated U937 cells; a study using laser scanning confocal microscopy and co-loaded fluo-3 and fura-red fluorescent probes
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Improved sensitivity in flow cytometric intracellular ionized calcium measurement using fluo-3/Fura Red fluorescence ratios
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Journal: Cytometry (1994): 135
Localization of calcium entry through calcium channels in olfactory receptor neurones using a laser scanning microscope and the calcium indicator dyes Fluo-3 and Fura-Red
Authors: Schild D, Jung A, Schultens HA.
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The distribution of intracellular calcium chelator (fura-2) in a population of intact human red cells
Authors: Lew VL, Etzion Z, Bookchin RM, daCosta R, Vaananen H, Sassaroli M, Eisinger J.
Journal: Biochim Biophys Acta (1993): 152