活细胞染色 CytoTell 绿色

活细胞染色 CytoTell 绿色

	货号	22253	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	1272
	Ex (nm)	510	Em (nm)	525
	分子量	419.24	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

活细胞染色 CytoTell 绿色是美国AAT Bioquest生产的活细胞染色探针，流式细胞术结合荧光染色是分析异质细胞群体的有力工具。在所有现有的荧光染料中，CFSE是广泛用于活细胞分析的优选细胞增殖指示剂。然而，与使用CFSE监测细胞增殖相关的几个严重问题。 1），CFSE对细胞有很强的毒性。 CFSE与所有氨基无差别地反应，因此改变了许多关键的细胞内蛋白质功能（例如细胞膜GPCR）; 2），CFSE反应慢，不方便使用。第二代细胞的CFSE荧光强度比第一代减少10倍以上。你将不得不等待另一代人开始细胞增殖分析。 3），由于CFSE与培养基成分发生反应，您必须使用流式细胞仪去除细胞分析培养基。 CytoTell Green已开发用于消除这些CFSE限制。根据我们客户对CytoTell Green的反馈，CytoTell UltraGreen是我们最新的改进。它有明显的优势。 1），CytoTell UltraGreen很好地保留在细胞中; 2），CytoTell UltraGreen的反应速度更快，使用起来比CFSE更方便。第一代和第二代之间的荧光强度差距显着减小。随着细胞分裂，CytoTell UltraGreen在子细胞之间平均分布，可以测量为染料荧光强度的连续减半; 3）， CytoTell UltraGreen比CFSE更敏感。最多可以显现9代; 4）， CytoTell UltraGreen比CFSE更稳定。 CytoTell UltraGreen原液可以在室温下储存几天。 CytoTell UltraGreen也可以用于标记细胞的长期追踪。使用双参数图进行分析可以为每一代提供更好的分辨率，特别是在未分裂的细胞和第一代细胞之间。使用标准的含甲醛固定剂和基于皂苷的透化缓冲液，用CytoTell UltraGreen标记的细胞可以被固定和透化以用于细胞内靶标的分析。 CytoTell UltraGreen具有519 nm的峰值激发，并且可以被蓝色（488 nm）激光线激发，从而与FITC滤光片组兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的活细胞染色 CytoTell 绿色。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物准备细胞

2.加入1X染料工作液

3.在室温或37 ^o C 下将染料与细胞一起孵育10至30分钟

4.去除染料工作液

5.使用流式细胞仪和适当的过滤器进行分析

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

CytoTell 染料储备液（500X）：
将500 µL DMSO加入到染料粉瓶中，通过涡旋使其充分混合，得到储备液（500X）。注意：储备溶液应及时使用；应将所有剩余的溶液等分并在<-20 ^o C下冷冻。避免重复冻融循环，并避光。

 

2.工作溶液配制

CytoTell 染料工作溶液（1X）：
在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的pH 7缓冲液中以1至500稀释500X DMSO储备溶液（例如1到500的DMX储备溶液稀释到500 µL缓冲液）。涡旋混合均匀。注意：对于不同的细胞类型和/或实验条件，应根据经验确定染料工作溶液的最终浓度。建议以至少十倍以上的浓度进行测试。例如，CytoTell Red在某些细胞类型中使用的量可能要比建议的浓度少得多。

 

样品示例及操作

1.用测试化合物处理细胞所需的时间。

2.离心细胞以获得每管1-5×10 ^5个细胞。

3.在500 µL CytoTell 染料工作溶液中重悬细胞。可选：可以将500X DMSO储备溶液直接添加到细胞中而无需去除培养基（例如，将500 µL DMSO储备溶液添加到500 µL细胞中）

4.在室温或37°C下，将细胞与染料溶液孵育10至30分钟，避光。

5.从细胞中除去染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中，每管可得到1-5×10 ^5个细胞。

6.用流式细胞仪或荧光显微镜监测在Ex / Em（参见表1）下的荧光变化。

 

参考文献

Effector T Cell Resistance to Suppression and STAT3 Signaling during the Development of Human Type 1 Diabetes
Authors: Emmi-Leena Ihantola, Tyyne Viisanen, Ahmad M Gazali, Kirsti Näntö-Salonen, Auni Juutilainen, Leena Moilanen, Reeta Rintamäki, Jussi Pihlajamäki, Riitta Veijola, Jorma Toppari
Journal: The Journal of Immunology (2018): ji1701199

Nanocomposite injectable gels capable of self-replenishing regenerative extracellular microenvironments for in vivo tissue engineering
Authors: Koji Nagahama, Naho Oyama, Kimika Ono, Atsushi Hotta, Keiko Kawauchi, Takahito Nishikata
Journal: Biomaterials Science (2018)

Cooperation of innate immune cells during Hepatitis C virus infection
Authors: Volker Klöss
Journal: (2017)

CXCL12–CXCR4 Axis Is Required for Contact-Mediated Human B Lymphoid and Plasmacytoid Dendritic Cell Differentiation but Not T Lymphoid Generation
Authors: Hirohito Minami, Keiki Nagaharu, Yoshiki Nakamori, Kohshi Ohishi, Naoshi Shimojo, Yuki Kageyama, Takeshi Matsumoto, Yuka Sugimoto, Isao Tawara, Masahiro Masuya
Journal: The Journal of Immunology (2017): ji1700054

Interaction and Mutual Activation of Different Innate Immune Cells Is Necessary to Kill and Clear Hepatitis C Virus-Infected Cells
Authors: Volker Klöss, Oliver Grünvogel, Guido Wabnitz, Tatjana Eigenbrod, Stefanie Ehrhardt, Felix Lasitschka, Volker Lohmann, Alexander H Dalpke
Journal: Frontiers in Immunology (2017): 1238

Onionin A inhibits ovarian cancer progression by suppressing cancer cell proliferation and the protumour function of macrophages
Authors: Junko Tsuboki, Yukio Fujiwara, Hasita Horlad, Daisuke Shiraishi, Toshihiro Nohara, Shingo Tayama, Takeshi Motohara, Yoichi Saito, Tsuyoshi Ikeda, Kiyomi Takaishi
Journal: Scientific Reports (2016)

Multiplexing analysis of cell proliferation and cellular functions using a new multicolor panel of fluorescent cell proliferation dyes (P1290)
Authors: Jinfang Liao, Qin Zhao, Yibo Wu, Zhenjun Diwu
Journal: The Journal of Immunology (2013): 119–4

JSRM Code: 013020300010 Full Text PDF
Authors: A Bertolo, D Pavlicek, A Gemperli, M Baur, T Pötzel, J Stoyanov
Journal: Unknown

 

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