Amplite 乙醇定量试剂盒

Amplite 乙醇定量试剂盒

货号	40001	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
规格	200 Tests	价格	2604
Ex (nm)	571	Em (nm)	584
分子量		溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 乙醇定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于乙醇检测的试剂盒，在生命科学研究，临床评估以及食品和药物工业中，非常需要快速进行乙醇定量测量的能力。 该非放射性乙醇测定基于醇氧化酶对乙醇的氧化。 该试剂盒使用我们的Amplite Red，使该套件可以双模式记录，无论是荧光测量还是比色读数。 该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。 该测定是稳定的，灵敏的，并且可以容易地适用于需要测量乙醇的各种应用中的高通量测定。 该测定可在30分钟内完成。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 乙醇定量试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备乙醇工作溶液（50μL）
添加乙醇标准品或测试样品（50μL）
在室温下孵育5-30分钟
监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度（截止= 570 nm）

 

溶液制备

1.储备溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. 1Amplite 乙醇试剂原液（250X）：
将40μLDMSO（组分D）加入到Amplite 乙醇试剂（组分A）的小瓶中以制备250X Amplite 乙醇试剂储备溶液。 应立即使用原液。 注意：Amplite 乙醇试剂在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下不稳定。 反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite 乙醇试剂在高pH（> 8.5）下也不稳定。 因此，反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液（pH 7.4）。

1.2乙醇酶混合物（100X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到乙醇酶混合物（组分C）的小瓶中并充分混合以制备100X乙醇酶混合物。

 

2.标准溶液配制

2.1乙醇标准溶液配制
通过将适量的100％乙醇标准品（组分E）稀释到H 2 O中来制备乙醇标准品，以产生0％至0.1％的乙醇浓度。 包含0％乙醇对照作为空白对照。 最终的乙醇浓度应低两倍（即0％至0.05％）。

 

3.工作溶液配制

将20μL250XAmplite 乙醇试剂储备溶液和50μL100X乙醇酶混合物加入5mL分析缓冲液（组分B）中以制备乙醇工作溶液。

 

操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中乙醇标准品和测试样品的布局。

ES =乙醇标准品（ES1-ES7,0.0001％至0.1％），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
ES1	ES1	…	…
ES2	ES2	…	…
ES3	ES3
ES4	ES4
ES5	ES5
ES6	ES3
ES7	ES7

表2.每个孔的试剂组成

孔	规格	试剂
ES1-ES7	50ul	连续稀释液（0.0001％至0.1％）
BL	50ul	水
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备乙醇标准品（ES），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。注意：高浓度的乙醇（例如0.5％终浓度）可能会由于Amplite 乙醇试剂的过度氧化（导致非荧光产物）而导致荧光信号降低。

2.向乙醇标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙醇工作溶液，使总乙醇测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL乙醇工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应5至30分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm），截止= 570nm监测荧光强度。注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算EtOH样品。 点击使用在线线性回归计算器。

 

图1.使用Gemini荧光酶标仪（Molecular Devices），在固体黑色96孔板上用Amplite 乙醇定量试剂盒测量乙醇剂量响应。

 

参考文献

TAT-surface modified acyclovir-loaded albumin nanoparticles as a novel ocular drug delivery system
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Journal: Journal of Drug Delivery Science and Technology (2019)

Development of Acyclovir-Loaded Albumin Nanoparticles and Improvement of Acyclovir Permeation Across Human Corneal Epithelial T Cells
Authors: Panita Suwannoi, Mullika Chomnawang, Narong Sarisuta, Stephan Reichl, Christel C Müller-Goymann
Journal: Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics (2017)

Enhancement of the antioxidant and starch hydrolase inhibitory activities of king coconut water (Cocos nucifera var. aurantiaca) by fermentation with kombucha ‘tea fungus’
Authors: Mindani I Watawana, Nilakshi Jayawardena, Chaminie B Gunawardhana, Viduranga Y Waisundara
Journal: International Journal of Food Science & Technology (2016): 490–498

On the dynamics of kefir volatome
Authors: Jie-Bi Hu, Sampath Gunathilake, Yu-Chie Chen, Pawel L Urban
Journal: RSC Advances (2014): 28865–28870

pH-Responsive nanoparticle vaccines for dual-delivery of antigens and immunostimulatory oligonucleotides
Authors: John T Wilson, Salka Keller, Matthew J Manganiello, Connie Cheng, Chen-Chang Lee, Chinonso Opara, Anthony Convertine, Patrick S Stayton
Journal: ACS nano (2013): 3912–3925

 

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