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Amplite 比色法尿素定量试剂盒 蓝色
| 货号 | 10058 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 200 Tests | 价格 | 2604 |
| Ex (nm) | 650 | Em (nm) | |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 比色法尿素定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。尿素是动物蛋白质和氨基酸代谢的最终降解产物。它在肝脏中产生，由肾脏分泌并通过尿液排泄。尿素的测定在临床实验室中用于监测健康状况是非常有用的。血尿素氮（BUN）测试是尿素形式的血液中氮的量的量度，主要用于肌酸酐测试，以评估肾功能，帮助诊断肾脏疾病。我们的Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单灵敏的比色法，用于定量生物样品中的尿素浓度，如血清，血浆和尿液等。该分析基于尿素在分析缓冲液中的酶偶联反应，最后生产出蓝色的产品。产生的颜色强度与样品中尿素的浓度成比例，其可以在660-670nm处比色测量。这种Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单的分析方法，可在150μL分析体积中检测低至10μM的尿素。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化而无需分离步骤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法尿素定量试剂盒。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收： | 665nm |
| 推荐孔板： | 透明底板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备尿素标准品或测试样品（50μL）
2.添加尿素工作液（50μL）
3.在室温或37°C孵育30-60分钟
4.添加分析缓冲液II
5.读取665 nm处的吸光度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Assay Enzyme Mix储备液（100X）：
将100μLddH2 O加入到测定酶混合物（组分A）的小瓶中以制备100X测定酶混合物储备溶液。
2.标准溶液
2.1尿素标准
将1μL1.0M尿素标准品（组分D）加入999μLDPBS中以产生1.0mM标准尿素溶液（US7）。 取1.0mM尿素标准溶液进行1：3连续稀释，得到剩余的尿素标准溶液（US6-US1）。
3.工作溶液
将50μL重构的测定酶混合物储备溶液（100X）加入5mL测定缓冲液I（组分B）中以制备尿素工作溶液。 注意：尿素工作溶液应及时使用，避光。 随着储存时间的延长，测定灵敏度会降低。 建议使用新鲜尿素工作溶液以获得最佳效果。
样品分析
表1.透明底部96孔微孔板中尿素标准品和测试样品的布局。 US =尿素标准（US1-US7,1至1000μM），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| US1 | US1 | … | … |
| US2 | US2 | … | … |
| US3 | US3 | ||
| US4 | US4 | ||
| US5 | US5 | ||
| US6 | US6 | ||
| US7 | US7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| US1-US7 | 50ul | 连续稀释液（1至1000μM） |
| BL | 50ul | DPBS |
| TS | 50ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备尿素标准品（US），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。
2.向尿素标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL尿素工作溶液，使总尿素测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL尿素工作溶液，总体积为50μL/孔。
3.在室温或37°C下孵育反应30-60分钟，避光。
4.向每个孔中加入50μL测定缓冲液II（组分C），使得总测定体积为150μL/孔。对于384孔板，向每个孔中加入25μL测定缓冲液II（组分C），总测定体积为75μL/孔。
5.在室温下孵育10-15分钟，并使用吸光度酶标仪监测660-670nm处的吸光度增加。注意：添加分析缓冲液II（组分C）后颜色变为黄色，孵育后尿素标准品或样品孔将显示蓝绿色。颜色的强度将在15-30分钟内达到最大值，并且与尿素的浓度成比例。注意：最终颜色在室温下稳定约1小时，颜色强度会随时间降低。
参考文献
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